用于编码核糖核酸的器官保护性表达和调节的组合物和方法技术

一种用于在一个或多个靶器官内表达一种或多种多肽的经分离mRNA序列，所述序列包含至少一个编码至少一种多肽的编码序列；至少第一非翻译区(UTR)序列和多个微RNA(miRNA)结合位点序列。所述miRNA结合位点序列中的每一个位于所述第一UTR序列内、紧邻所述第一UTR序列的5'或紧邻所述第一UTR序列的3'；并且所述miRNA结合位点序列允许所述编码序列在所述一个或多个靶器官内的至少第一细胞类型和第二细胞类型中的差异表达。提供使用组合物的方法，尤其用于治疗疾病，如肝癌、脑癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌和肾癌。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于编码核糖核酸的器官保护性表达和调节的组合物和方法
本专利技术涉及信使核糖核酸(mRNA)递送技术，和在多种治疗性、诊断性和预防性适应症中使用这些mRNA递送技术的方法。这样的递送系统可用作独立干预，或与其它治疗组分组合。
技术介绍
基因疗法为将编码多核苷酸引入到患者的细胞中以便治疗疾病的过程。举例来说，突变和/或无功能的基因可以在靶细胞中由完整的复本替换。基因疗法通常依赖于病毒载体以将编码多核苷酸引入到靶细胞中，但存在其它技术以在不使用病毒的情况下将多核苷酸递送到细胞。病毒的优点包括相对较高的可能转染速率，以及通过控制病毒进入靶细胞的结合蛋白将病毒靶向到特定细胞类型的能力。相比之下，将编码多核苷酸引入到细胞中的非病毒方法可能具有低转染速率的问题，以及具有针对特定器官和细胞类型的靶向表达的有限选择。然而，病毒干预的性质携带毒性和发炎的风险，但还具有对引入因子的表达的持续时间和程度的有限控制。基于生物途径的肿瘤疗法具有优于传统化学治疗剂的优点，因为其可采用许多不同机制来更精确地靶向和消灭癌症，例如经由直接细胞溶解、细胞毒素免疫效应机制和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于在一个或多个靶器官内表达一种或多种多肽的经分离mRNA序列，所述序列包含：/n至少一个编码至少一种多肽的编码序列；/n至少第一非翻译区(UTR)序列；/n多个微RNA(miRNA)结合位点序列；/n其中所述miRNA结合位点序列中的每一个位于所述第一UTR序列内、紧邻所述第一UTR序列的5'或紧邻所述第一UTR序列的3'；并且/n其中所述miRNA结合位点序列允许所述编码序列在所述一个或多个靶器官内的至少第一细胞类型和第二细胞类型中的差异表达。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180219 US 62/632,056;20180906 US PCT/US2018/04971.一种用于在一个或多个靶器官内表达一种或多种多肽的经分离mRNA序列，所述序列包含：
至少一个编码至少一种多肽的编码序列；
至少第一非翻译区(UTR)序列；
多个微RNA(miRNA)结合位点序列；
其中所述miRNA结合位点序列中的每一个位于所述第一UTR序列内、紧邻所述第一UTR序列的5'或紧邻所述第一UTR序列的3'；并且
其中所述miRNA结合位点序列允许所述编码序列在所述一个或多个靶器官内的至少第一细胞类型和第二细胞类型中的差异表达。


2.根据权利要求1所述的经分离mRNA序列，其中所述mRNA序列包含大于两个、适合地大于三个、通常大于四个结合位点序列。


3.根据权利要求1或2所述的经分离mRNA序列，其中所述多个miRNA结合位点序列包含至少两个大体上相似的序列。


4.根据权利要求1到3中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述多个miRNA结合位点序列包含至少两个大体上不同的序列。


5.根据权利要求1到4中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述多个miRNA结合位点序列大体上与选自由以下组成的群组中的至少一个或多个的miRNA序列互补：miRNA-122、miRNA-125a、miRNA-125b、miRNA-199、miRNA-124a、Let-7、miRNA-148a、miRNA-148b、miRNA-375、miRNA-143、miRNA-145、miRNA192、miRNA194、miRNA-204、miRNA215、miRNA-30b和miRNA-30c。


6.根据权利要求1到5中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述多个miRNA结合位点序列中的至少一个包含SEQIDNO:1到7中的一个或多个。


7.根据权利要求6所述的经分离mRNA序列，其中所述多个miRNA结合位点序列中的至少一个包含SEQIDNO:1。


8.根据权利要求1到7中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述结合位点序列包含SEQIDNO:1、2、3、4和5中的每一个；或其中所述结合位点序列包含SEQIDNO:1、2、5、6和7中的每一个。


9.根据权利要求1到8中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述第一细胞类型和第二细胞类型是来自由以下组成的群组的不同选择：非赘生性细胞，转化细胞表型、癌前表型和赘生性表型。


10.根据权利要求1到9中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述一个或多个靶器官选自由以下组成的群组：肝、脑、肺、乳房、胰腺、结肠和肾。


11.根据权利要求1到10所述的经分离mRNA序列，其中所述一种或多种多肽中的至少一种包含治疗增强因子。


12.根据权利要求11所述的经分离mRNA序列，其中所述治疗增强因子为选自由以下组成的群组的免疫调节分子：
(i)参与免疫反应和发炎的细胞因子(或其配体)，其选自以下中的一种或多种：TNFα、TNFβ、IFNα、IFNβ、IFNγ、IL1、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CXCL9和CXCL10；
(ii)树突状细胞活化剂，其选自以下中的一种或多种：GM-CSF、TLR7和TLR9；
(iii)靶向以下细胞受体和其配体的分子，其选自以下中的一种或多种：CD40、CD40L、CD160、2B4、Tim-3、GP-2、B7H3和B7H4；
(iv)TGFβ抑制剂；
(v)T细胞膜蛋白3抑制剂；
(vi)程序性死亡1(PD1)、程序性死亡配体1(PDL1)、程序性死亡配体2(PDL2)、细胞毒性T-淋巴细胞抗原4(CTLA4)和淋巴细胞活化基因3(LAG3)的抑制剂；和
(vii)NF-κB抑制剂。


13.根据权利要求1到12中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述mRNA包含超过一个开放阅读框(ORF)。


14.根据权利要求1到12中任一项所述的经分离mRNA序列，其中所述mRNA包含选自由以下组成的群组中的一个的序列：SEQIDNO:18到29。


15.一种药物组合物，其包含根据权利要求1到14中任一项所述的经分离mRNA序列和递送颗粒，所述序列包含于所述递送颗粒内；和药学上可接受的载剂。


16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述递送颗粒是选自由以下组成的群组中的至少一个：氨基醇脂质颗粒、脂质体、外来体、细胞衍生的囊泡和聚合颗粒。


17.根据权利要求15或16所述的组合物，其中所述递送颗粒靶向一个或多个靶器官中的一个或多个。


18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述递送颗粒包含选自以下的靶向剂：蛋白质、肽、碳水化合物、糖蛋白、脂质、小分子和核酸；且
其中所述靶向剂优先与所述一个或多个靶器官中的细胞缔合。


19.一种多核苷酸表达载体构筑体，其编码根据权利要求1到14中任一项所述的mRNA序列。


20.一种病毒载体，其包含根据权利要求1到19中任一项所述的mRNA序列或根据权利要求20所述的多核苷酸表达载体构筑体。


21.一种用于治疗癌症的方法，所述方法包含向有需要的个体给予包含根据权利要求1到20中任一项所述的经分离mRNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·米科尔，
申请(专利权)人：联合治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国;US