【技术实现步骤摘要】
牛奶淀粉样蛋白分子印迹电化学传感器及其制法与应用
本专利技术属于分子印迹电化学检测
,具体涉及一种牛奶淀粉样蛋白分子印迹电化学传感器及其制法与应用。
技术介绍
牛乳腺炎(Bovinemastitis)是一种影响奶牛健康的主要疾病,乳腺炎导致牛奶产量减少、治疗开支负担加重。亚临床乳腺炎(SM)是一种缺乏全身或局部炎症迹象的疾病,亚临床乳腺炎通常通过诸如加利福尼亚乳腺炎测试(CMT)、通过对SCC的实验室分析或乳汁病原微生物检测法来诊断。急性期反应期蛋白(Acutephaseprotein,APP)是在压力、外伤、感染或炎症等刺激激发动物机体产生早期蛋白,血清淀粉样蛋白A(SAA)、触珠蛋白(HP)、C反应蛋白(CRP)、铜蓝蛋白等是常见的APP,人类医学中,APP在炎症性疾病的诊断和预后中已被使用了很长一段时间,它们的测定已成为兽医学中的重要诊断工具,部分APP已经成功应用到商业检测。在奶牛中,最主要的APP是SAA和Hp,血清淀粉样蛋白A是一种具有多种蛋白质种类的APP,主要在肝脏遭受急性刺激是产生的反应,它的 ...
【技术保护点】
1.一种牛奶淀粉样蛋白分子印迹电化学传感器的制备方法,其特征在于包括:/n提供电极;/n在电极表面依次修饰rGO-Au复合纳米粒子、戊二醛、模板分子,获得模板分子修饰的电极,其中,所述模板分子为牛奶淀粉样蛋白;/n以及,以吡咯为功能单体,采用循环伏安法在所述模板分子修饰的电极表面电聚合形成聚吡咯分子印迹膜,之后去除模板分子从而制得牛奶淀粉样蛋白分子印迹电化学传感器。/n
【技术特征摘要】
1.一种牛奶淀粉样蛋白分子印迹电化学传感器的制备方法,其特征在于包括:
提供电极;
在电极表面依次修饰rGO-Au复合纳米粒子、戊二醛、模板分子,获得模板分子修饰的电极,其中,所述模板分子为牛奶淀粉样蛋白;
以及,以吡咯为功能单体,采用循环伏安法在所述模板分子修饰的电极表面电聚合形成聚吡咯分子印迹膜,之后去除模板分子从而制得牛奶淀粉样蛋白分子印迹电化学传感器。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于包括:
将rGO-Au复合纳米粒子的壳聚糖溶液涂覆于所述电极表面,经干燥处理制得rGO-Au复合纳米粒子修饰的电极;
将戊二醛水溶液涂覆于所述rGO-Au复合纳米粒子修饰的电极表面并于25-30℃活化处理1-2h,制得戊二醛修饰的电极,其中,所述戊二醛水溶液的浓度为2.0-3.0wt%;
以及,将模板分子溶液覆于所述戊二醛修饰的电极表面并于25-30℃下反应1-2h,之后于4-8℃继续反应8-12h,制得所述模板分子修饰的电极,其中,所述模板分子为牛奶淀粉样蛋白,所述模板分子溶液的浓度为50-200μg/mL。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于:
采用柠檬酸钠还原法制备Au纳米粒子分散液;
将壳聚糖溶于乙酸溶液形成壳聚糖溶液,之后与rGO的分散液超声混合形成rGO的壳聚糖溶液,其中所述乙酸溶液的浓度为0.15-0.25mol/L,壳聚糖溶液中壳聚糖的浓度为0.2-0.3mg/mL,rGO的分散液中rGO的浓度为0.5-1.5mg/mL;
以及,将所述Au纳米粒子分散液与rGO的壳聚糖溶液超声混合处理,获得所述rGO-Au复合纳米粒子的壳聚糖溶液;
优选的,所述壳聚糖溶液与rGO的分散液的体积比为1:2-1:3;
优选的,所述Au纳米粒子分散液与rGO的壳聚糖溶液的体积比为1:1-1:2。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于:所述rGO-Au复合纳米粒子的壳聚糖溶液、戊二醛水溶液与模板分子溶液的体积比为5~20:5:5;
和或,所述制备方法还包括:使用pH为7.4的磷酸缓冲盐溶液冲洗所述模板分子修饰的电极。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于包括:
将含有吡咯的pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液进行除氧处理,之后将所述模板分子修饰的电极浸入所获混合液,并采用循环伏安法电聚合形成所述聚吡咯分子印迹膜,其中,所述循环伏安法电聚合的反应条件包括:混合液中吡咯浓度为80~100mmol/L,扫描电位为-0.3V~0.8V,...
【专利技术属性】
技术研发人员:薛峰,张正荣,戴建君,陈诗胜,蒋原,周萍萍,汤芳,曹佩,
申请(专利权)人:南京农业大学,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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