寡核苷酸官能化的疏水性聚合物纳米颗粒制造技术

本发明专利技术涉及一种寡核苷酸官能化的疏水性聚合物纳米颗粒及其制备方法。所述纳米颗粒是负载染料的聚合物纳米颗粒，并通过以下物质官能化：(a)靶特异性的寡核苷酸，和/或(b)非特异性的寡核苷酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】寡核苷酸官能化的疏水性聚合物纳米颗粒本专利技术涉及寡核苷酸官能化的疏水性聚合物纳米颗粒，其制备方法及其作为生物传感器的用途。核酸普遍存在的性质使它们成为几乎任何类型的生物学研究中的通用靶标。检测生物体液和细胞内部的核酸，特别是信使RNA(mRNA)和微RNA(miRNA)目前是诊断疾病，例如癌症、病毒感染等的核心。因此，近年来核酸检测领域呈指数型发展。使用荧光染料直接检测溶液中核酸的最灵敏的方法达到约5nM的检测极限。甚至使用具有FRET机制的DNA纳米结构的分子探针的最先进且最近的实例能够实现0.33nM的LOD。1然而，这通常不足以检测生物学样品中超低浓度的核酸。因此，RNA和DNA检测需要分子倍增技术，特别是PCR。2然而，PCR是多步骤的过程，其需要昂贵的试剂、精密设备和训练有素的工作人员的复杂组合。此外，PCR中使用的扩增的指数性质使PCR对污染和制备中的微小变化高度敏感，这会产生假阳性和假阴性结果。化学家开发了各种荧光探针，它们可以达到低得多的RNA浓度，最多可达几pM，但是它们都使用基于酶3或杂交链反应4的分子倍增法。在较早的工作中，提出了阳离子共本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种聚合物纳米颗粒，其包含：/n-疏水性聚合物，所述疏水性聚合物的链带有至少一个式(I')的结构，/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180309 EP 18305253.91.一种聚合物纳米颗粒，其包含：
-疏水性聚合物，所述疏水性聚合物的链带有至少一个式(I')的结构，



其中：
-A表示选自以下的间隔基：-(CH2)m-、-(CH2)pNH-CO(CH2)q-、-(CH2)pCO-NH(CH2)q-、-(CH2)pO(CH2)q-、-(CH2)pNH(CH2)qO-、-(CH2)mCO-、-CO(CH2)m-，m、p和q各自独立地表示选自0至8的整数，优选选自0至5的整数，更优选选自0至3的整数，
-D表示选自以下的基团：
-其中R'表示氢、卤素、(C1至C8)烷基，
-选择性被单取代的环(C3至C7)烷基、选择性被单取代的单环非芳香族杂环基团或选择性被单取代的单环芳香族基团，
-E表示其中Ra是H或(C1至C8)烷基，
-X、Y、Z相同或不同，并且各自独立地表示选自-(CH2)r-、-(CH2-CH2-O)r-、-(CH2-CH2-NH)r-、-(CH2)sNH-CO(CH2)t-、-(CH2)sCO-NH(CH2)t-的间隔基，其中r、s和t彼此独立地表示选自0至8的整数，优选选自0至3的整数，
-R1表示：
--COOH，
--PO(OH)2、-PO(ORb)OH、-O-PO(OH)2、-O-PO(ORb)OH，其中Rb为甲基或乙基，
--S(＝O)2-OH、-OS(＝O)2OH，
-n表示选自1至10，特别是1至3的整数，
当D表示时，E可以不存在；
所述式(I)的结构与聚合物的羧基结合并且位于纳米颗粒的表面上，
任选地，所述聚合物纳米颗粒包含发光染料。


2.根据权利要求1所述的负载染料的聚合物纳米颗粒，其包含：
-疏水性聚合物，所述疏水性聚合物的链带有至少一个式(I)的结构，



其中：
-A表示选自以下的间隔基：-(CH2)m-、-(CH2)pNH-CO(CH2)q-、-(CH2)pCO-NH(CH2)q-、-(CH2)pO(CH2)q-、-(CH2)pNH(CH2)qO-、-(CH2)mCO-、-CO(CH2)m-，m、p和q各自独立地表示选自0至8的整数，优选选自0至5的整数，更优选选自0至3的整数，
-D表示选自以下的基团：
-其中R'表示氢、卤素、(C1至C8)烷基，
-选择性被单取代的环(C3至C7)烷基、选择性被单取代的单环非芳香族杂环基团或选择性被单取代的单环芳香族基团，
-E表示其中Ra是H或(C1至C8)烷基，
-X、Y、Z相同或不同，并且各自独立地表示选自-(CH2)r-、-(CH2-CH2-O)r-、-(CH2-CH2-NH)r-、-(CH2)sNH-CO(CH2)t-、-(CH2)sCO-NH(CH2)t-的间隔基，其中r、s和t彼此独立地表示选自0至8的整数，优选选自0至3的整数，
-n表示选自1至10，特别是1至3的整数，
当D表示时，E可以不存在；
所述式(I)的结构与聚合物的羧基结合并且位于纳米颗粒的表面上，和
-由至少一种供体染料和位阻氟化阴离子的盐形成的能量供体，所述能量供体被包封在疏水性聚合物中。


3.根据权利要求2所述的负载染料的聚合物纳米颗粒，其中所述疏水性聚合物的链至少带有式(Ia)的结构：



其中x、y和z分别表示选自0至8的整数，优选选自0至5的整数，更优选选自0至3的整数。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的负载染料的聚合物纳米颗粒，其中所述疏水性聚合物选自聚甲基丙烯酸酯、脂肪族聚酯和聚苯乙烯及其衍生物。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的负载染料的聚合物纳米颗粒，其中所述供体染料选自罗丹明衍生物或花菁衍生物。


6.一种寡核苷酸官能化的疏水性聚合物纳米颗粒，所述纳米颗粒是根据权利要求1至5中任一项所述的疏水性聚合物纳米颗粒，其中至少一部分叠氮基被转化为三唑基团或其衍生物，并被以下物质官能化：
(a)靶特异性的寡核苷酸，和/或
(b)非特异性的寡核苷酸。


7.一种寡核苷酸官能化的疏水性聚合物纳米颗粒，其包含至少一种能量供体染料和至少一种能量受体染料，所述纳米颗粒为：
-根据权利要求2至5中任一项所述的负载染料的聚合物纳米颗粒，其中至少一部分叠氮基被转化为三唑基团或其衍生物，并被以下物质官能化：
(a)靶特异性的寡核苷酸，和
(b)非特异性寡核苷酸，
并且其中能量受体染料与形成发夹环结构的靶特异性的寡核苷酸结合或与和...

【专利技术属性】
技术研发人员：安德里·克里姆钦科，尼娜·梅尔尼丘克，安德烈亚斯·赖施，
申请(专利权)人：斯特拉斯堡大学，法国国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：法国;FR