适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程和微生物代谢工程领域，公开了适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用，本发明专利技术人工设计了四种适用于地衣芽胞杆菌的启动子（R1‑R4）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、角蛋白酶KER为目的蛋白，与启动子P43相比，研究发现启动子R2效果最佳，显著提高了GFP、KER的表达水平，其中GFP产量提高63.5倍，KER酶活提高7.8倍。最后，将启动子R2应用于代谢工程中，与对照菌株相比，通过将其应用于代谢途径强化使聚γ‑谷氨酸、杆菌肽的产量分别提高了52.09％和20.39％。

【技术实现步骤摘要】
适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用
本专利技术涉及基因工程和微生物代谢工程领域，具体涉及适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用。
技术介绍
启动子是位于基因转录单元上游的一段特殊DNA序列，具有启动基因转录的功能，并在调控基因转录水平中发挥着重要的作用。随着合成生物学和代谢途径工程的发展，人们逐渐发现，为了实现目标产物的高产，强化目的蛋白的表达水平和目的代谢物的代谢通量是至关重要的。由于启动子是基因转录的开关，并被认定为是建立基因高效表达工具的主要表达元件，从而启动子改造是开发能优化蛋白表达水平和代谢物代谢途径技术的首选策略。目前，启动子改造策略主要围绕着σ因子识别和结合的启动子核心区(-35区、核心间隔区、-10区)做改良工作。如周等人在枯草芽胞杆菌中，通过随机突变策略改造启动子PsrfA的核心间隔区，获得的最佳突变启动子PBH4较原始启动子PsrfA，使GFP的表达水平提高了2倍(DOI:10.1186/s12934-019-1148-3)，又如严等人在枯草芽胞杆菌中，通过对启动子PylB的-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.适用于地衣芽胞杆菌的启动子，所述的启动子的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.适用于地衣芽胞杆菌的启动子，所述的启动子的核苷酸序列为SEQIDNO.3所示。


2.适用于地衣芽胞杆菌的启动子，所述的启动子的核苷酸序列为SEQIDNO.2所示。


3.适用于地衣芽胞杆菌的启动子，所述的启动子的核苷酸序列为SEQIDNO.4所示。


4.适用于地衣芽胞杆菌的启动子，所述的启动子的核苷酸序列为SEQIDNO.5所示。


5.权利要求1-4中的所述的任一启动子，在提高地衣芽胞杆菌外源蛋白表达量中的应用。


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【专利技术属性】
技术研发人员：陈守文，饶忆，蔡冬波，马昕，莫非，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42