一体化诊断试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一体化诊断试剂盒及其应用，涉及生命医学检测、诊断技术领域。所述试剂盒的本体呈圆盘形，包括样本加样槽、清洗液存储槽、裂解液存储槽、洗脱液存储槽、油存储槽、裂解清洗槽、洗脱槽、扩增槽、废液存放槽；所述液体存储区包括裂解液槽、清洗液槽、洗脱液槽及油槽；所述样本加样槽位于圆盘中部，所述液体存储区环样本加样槽同心分布，所述扩增槽位于试剂盒的边缘。本发明专利技术通过设计圆盘结构，匹配电机带动试剂盒转动产生离心力，并在磁力和PCR磁珠作用下，完成对样本基因的裂解清洗、洗脱与扩增，最终检测获得结果。本发明专利技术采用盘式结构在检测时间上缩短至20到30分钟，并可以对导致症状的多种病菌和病毒进行同时检测。

【技术实现步骤摘要】
一体化诊断试剂盒及其应用
本专利技术涉及生命医学检测、诊断
，具体为一种一体化诊断试剂盒及其应用。
技术介绍
在传染病领域，为了控制传染的蔓延，需要快速得出致病原因，或者快速得出人员是否被传染，需要非常快速和准确的分子诊断产品。BioFire公司的FilmArray产品是目前已经成功商业化经典之作，该产品采用巢式多重PCR分析技术。整个FilmArray试剂可以简单分为两个部分，上面的储液管组和下面的反应层。在专利US8409508中公开了这种储液管组的基本结构以及使用真空吸取液体的原理和过程，单个储液管通过热塑封的方式与柔性袋贴合在一起，其中储液管底部与柔性袋内的反应池连通。储液管壁有两个开口，上面的开口为排气口，用于储液管封装时抽取内部的空气形成真空腔，下面的开口为试剂入口，一般为密封状态，刺破后试剂可被真空吸入。与其他POCT产品一样，FilmArray也是采用测试仪器和一次性测试芯片的模式来进行检测，其产品相对于市面上其他疾病检测芯片来说，具有非常明显的竞争优势，可以对导致症状的多种病菌和病毒进行同时检测，最终定位导致疾病的原因，主要得益于多重PCR技术。但由于试剂盒的制作工艺非常复杂，导致FilmArray的产品价格高昂，因此有必要针对性的设计一种一体化诊断试剂盒，在满足多种类检测要求以及不改变产品性能和便捷性的前提下，解决工艺复杂度的问题，降低产品的成本。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种一体化诊断试剂盒，在满足多种类检测要求以及不改变产品性能和便捷性的前提下，解决工艺复杂度的问题，降低产品的成本。为实现上述目的，本专利技术提供了一种一体化诊断试剂盒，包括圆盘形试剂盒本体，以及分布于本体上的样本加样槽、清洗液存储槽、裂解液存储槽、洗脱液存储槽、油存储槽、裂解清洗槽、洗脱槽、扩增槽、废液存放槽；其中：所述样本加样槽位于试剂盒的中部，所述清洗液存储槽、裂解液存储槽、洗脱液存储槽、油存储槽与所述样本加样槽同心布置；所述扩增槽的位置靠近试剂盒边缘，所述裂解清洗槽与洗脱槽靠近液体存储区；所述样本加样槽通过与裂解清洗槽由加样流道连通；所述裂解清洗槽与废液存放槽由清洗废液流道连通；所述裂解清洗槽与所述洗脱槽由磁珠移动通道连通；所述洗脱槽与所述扩增槽由毛细流道连通；所述清洗液存储槽、裂解液存储槽、洗脱液存储槽、油存储槽各至少一个；所述清洗液存储槽设有清洗液溢流口，所述清洗液溢流口与清洗液流道连通，所述清洗液流道与裂解清洗槽连通；所述裂解液存储槽的设有裂解液溢流口，所述裂解液溢出口与裂解清洗槽连通；所述洗脱液存储槽的设有洗脱液溢流口，所述洗脱液溢出口与洗脱槽连通；所述油存储槽的设有便于油流出的扩增流道，所述扩增流道与扩增槽连通。进一步地，所述样本加样槽为圆形，进一步地，所述样本加样槽位于试剂盒本体的中心；进一步地，所述所述清洗液存储槽、裂解液存储槽、洗脱液存储槽、油存储槽环绕所述样本加样槽布置，且均为扇形；进一步地，所述清洗液存储槽有两个以上，所述清洗液存储槽均设有溢流口，所述清洗液存储槽分别与清洗液流道连通，所述清洗液流道为环形，并且位于所述清洗液存储槽的外壁；进一步地，所述扩增槽包含两个以上，并依次连通；所述扩增槽与样本加样槽同心布置；进一步地，所述废液存放槽与样本加样槽同心布置，并靠近试剂盒的边缘；进一步地，所述清洗废液流道呈U型或S型；进一步地，所述毛细流道呈U型或S型。本专利技术还有一个目的在于，提供利用一体化诊断试剂盒检测目标基因的方法，包括以下步骤：1.将试剂盒置于相匹配、带有电机的工作台上，将PCR样本加入样本加样槽，将试剂盒与匹配的电机连接，将裂解液加入裂解液存储槽，启动电机，试剂盒同步旋转，在离心力的作用下，样本和裂解液进入裂解清洗槽，并加入PCR磁珠，对样本进行裂解反应；反应完后，加磁力，电机离心力将反应后裂解液离心流入废液存放槽；2.撤去磁力，向清洗液存储槽中加入清洗液，启动电机，清洗液流入裂解清洗槽后停止电机，在震荡搅拌下进行清洗；清洗完毕后加磁力，聚集磁珠沿磁珠通道进入洗脱槽；启动电机，清洗废液离心流入废液存放槽；3.向洗脱液存储槽中加入洗脱液，随电机旋转进入洗脱槽，撤去磁力、停止电机，进行振动搅拌洗脱操作，完成后加磁力将磁珠移去，启动电机，洗脱液通过毛细流道进入扩增槽；4.向油存储槽加入油，随电机旋转进入扩增槽，控制其腔体变温循环进行扩增反应，反应结束后检测扩增槽的荧光信号，得出检测结果。优先地，所述步骤2可以根据需要重复两次及以上；进一步地，所述步骤4中所述扩增槽中预先存有PCR扩增所需要的冻干试剂，所述冻干试剂包含扩增反应所需的引物及PCR扩增需要的其他成分；进一步地，所述步骤4可以根据需要进行多次扩增。本专利技术提供的一体化诊断试剂盒的工作原理为：在匹配电机旋转离心力的作用下，试剂盒的中的对应的试剂会随溢流口流入连通的区域分别先后进入裂解清洗槽、洗脱槽与扩增槽，并借助磁力吸附或释放PCR磁珠完成裂解清洗及洗脱，最后进入扩增并反应，检测扩增荧光信号获得检测结果。与现有技术相比，本专利技术具备以下有益效果：1、本专利技术的方案采用盘式结构，能够解决工艺复杂度的问题，不改变产品性能和便捷性的前提下很大程度降低产品的成本，另外在检测时间上缩短至20到30分钟；2、利用该试剂盒进行多重PCR扩增，可以对导致症状的多种病菌和病毒进行同时检测。附图说明图1为本专利技术一体化诊断试剂盒的一个实施例示意图。图2为本专利技术一体化诊断试剂盒一个实施例局部放大示意图。图中：1样本加样槽、2清洗液存储槽、3裂解液存储槽、4洗脱液存储槽、5油存储槽、6裂解清洗槽、7洗脱槽、8扩增槽、9废液存储槽、10清洗废液流道、11毛细流道、12裂解液溢流口、13加样流道、14清洗液溢流口、15清洗液流道、16磁珠移动通道、18扩增流道、19试剂盒本体。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例请参阅图1和图2(图2为图1中A部分的放大图)，本实施例提供一种一体化诊断试剂盒，试剂盒本体(19)为圆盘形，分布于本体上的有：样本加样槽(1)，由清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)组成的液体存储区，裂解清洗槽(6)，洗脱槽(7)，扩增槽(8)、废液存放槽(9)；样本加样槽(1)为圆形，位于试剂盒的中部，优选中心位置；液体存储区环绕所述样本加样槽(1)同心布置；扩增槽(8)和废液存放槽(9)的位置靠近试剂盒的边缘；扩增槽(8)至少一个(本实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种一体化诊断试剂盒，其特征在于，包括圆盘形试剂盒本体(19)，和分布于试剂盒本体(19)上的样本加样槽(1)、清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)、裂解清洗槽(6)、洗脱槽(7)、扩增槽(8)、废液存放槽(9)；/n所述样本加样槽(1)位于试剂盒的中部；所述清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)与所述样本加样槽(1)同心布置；所述扩增槽(8)的位置靠近试剂盒边缘，所述裂解清洗槽(6)与洗脱槽(7)靠近液体存储区；/n所述样本加样槽(1)与裂解清洗槽(6)由加样流道(13)连通；所述裂解清洗槽(6)与废液存放槽(9)由清洗废液流道(10)连通；所述裂解清洗槽(6)与所述洗脱槽(7)由磁珠移动通道(16)连通；所述洗脱槽(7)与所述扩增槽(8)由毛细流道(11)连通；/n所述清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)各至少一个；/n所述清洗液存储槽(2)的设有清洗液溢流口(14)，所述清洗液溢流口(14)与清洗液流道(15)连通；所述清洗液流道(15)与裂解清洗槽(6)连通；/n所述裂解液存储槽(3)的设有裂解液溢流口(12)，所述裂解液溢出口(12)与裂解清洗槽(6)连通；/n所述洗脱液存储槽(4)的设有洗脱液溢流口(17)，所述洗脱液溢出口(17)与洗脱槽(7)连通；/n所述油存储槽(5)的设有便于油流出的扩增流道(18)，所述扩增流道(18)与扩增槽(8)连通。/n...

【技术特征摘要】
1.一种一体化诊断试剂盒，其特征在于，包括圆盘形试剂盒本体(19)，和分布于试剂盒本体(19)上的样本加样槽(1)、清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)、裂解清洗槽(6)、洗脱槽(7)、扩增槽(8)、废液存放槽(9)；
所述样本加样槽(1)位于试剂盒的中部；所述清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)与所述样本加样槽(1)同心布置；所述扩增槽(8)的位置靠近试剂盒边缘，所述裂解清洗槽(6)与洗脱槽(7)靠近液体存储区；
所述样本加样槽(1)与裂解清洗槽(6)由加样流道(13)连通；所述裂解清洗槽(6)与废液存放槽(9)由清洗废液流道(10)连通；所述裂解清洗槽(6)与所述洗脱槽(7)由磁珠移动通道(16)连通；所述洗脱槽(7)与所述扩增槽(8)由毛细流道(11)连通；
所述清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)各至少一个；
所述清洗液存储槽(2)的设有清洗液溢流口(14)，所述清洗液溢流口(14)与清洗液流道(15)连通；所述清洗液流道(15)与裂解清洗槽(6)连通；
所述裂解液存储槽(3)的设有裂解液溢流口(12)，所述裂解液溢出口(12)与裂解清洗槽(6)连通；
所述洗脱液存储槽(4)的设有洗脱液溢流口(17)，所述洗脱液溢出口(17)与洗脱槽(7)连通；
所述油存储槽(5)的设有便于油流出的扩增流道(18)，所述扩增流道(18)与扩增槽(8)连通。


2.根据权利要求1所述的一体化扩增试剂盒，其特征在于，所述样本加样槽(1)为圆形，位于试剂盒本体(19)中心。


3.根据权利要求1所述的一体化扩增试剂盒，其特征在于，所述所述清洗液存储槽(2)、裂解液存储槽(3)、洗脱液存储槽(4)、油存储槽(5)环绕所述样本加样槽(1)布置，且均为扇形。


4.根据权利要求1所述的一体化扩增试剂盒，其特征在于，所述扩增槽(8)包含两个以上，并依次连通，与样本加样槽(1)同心布置。


5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈坦，彭绍铁，喻婷，
申请(专利权)人：鄂州康芯医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42