一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂及冻存方法和应用技术

本发明专利技术适用于生物冻存技术领域，提供了一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂及冻存方法和应用，该无血清冻存保护剂包括以下组分：Knockout DMEM培养基、KSR血清替代物、二甲基亚砜、青链霉素。本发明专利技术通过以不含血清的Knockout DMEM培养基作为基质，联合使用KSR血清替代物、二甲基亚砜和青链霉素作为低温保护剂，不仅可以降低冻存保护剂的成本和避免了外源性病原体及病毒污染的风险，而且还能长期低温保存牛睾丸组织，减少细胞凋亡，维持组织形态，较好的保护了生精细胞和睾丸体细胞，使得冻存复苏后的睾丸组织结构完整、各类睾丸细胞的活性高，可正常增殖、发育。

A serum-free cryoprotectant for bovine testicular tissue and its cryopreservation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂及冻存方法和应用
本专利技术属于生物冻存
，尤其涉及一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂及冻存方法和应用。
技术介绍
动物种质资源保存一般有活体保种、精液冻存和胚胎保存等方式。活体保种场大都以封闭繁育为主，全群留种，易受制于群体规模、市场开发等因素；另外进口或本土优良种畜存在基础保种畜群数量少、血统更新和扩充困难等问题，因此活体保种工作依然存在很多困难。冷冻精液技术虽已应用于生产实践，但不适于一些需要保种的新生或幼龄动物、突然死亡或不便采精的动物。胚胎保存则程序繁杂，需要较高技术要求。鉴于此，性腺组织的冻存为解决这一问题提供了新途径。其中，哺乳动物睾丸组织的低温保存是生命科学、农业科学和再生医学领域的研究热点。睾丸组织结构复杂且包含多种睾丸细胞，因此，睾丸组织的冷冻保存需要兼顾各类睾丸细胞对低温的耐受能力，使用有效降低低温损伤的冻存保护剂是维持睾丸组织结构完整和生理活性的关键。细胞或组织冻存液多以渗透性的二甲基亚砜（DMSO）、乙二醇、甘油或非渗透性的蔗糖、葡聚糖、牛血清白蛋白等作为冷冻保护剂，有效避免本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂，其特征在于，包括以下按照体积百分数计的组分：Knockout DMEM培养基62%~88%、KSR血清替代物5%~15%、二甲基亚砜5%~15%、青链霉素2%~8%，各组分的体积百分数之和为100%。/n

【技术特征摘要】
1.一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂，其特征在于，包括以下按照体积百分数计的组分：KnockoutDMEM培养基62%~88%、KSR血清替代物5%~15%、二甲基亚砜5%~15%、青链霉素2%~8%，各组分的体积百分数之和为100%。


2.根据权利要求1所述的一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂，其特征在于，所述无血清冻存保护剂包括以下按照体积百分数计的组分：KnockoutDMEM培养基70%~80%、KSR血清替代物8%~12%、二甲基亚砜8%~12%、青链霉素4%~6%，各组分的体积百分数之和为100%。


3.根据权利要求1所述的一种牛睾丸组织的无血清冻存保护剂，其特征在于，所述无血清冻存保护剂包括以下按照体积百分数计的组分：KnockoutDMEM培养基72.5%~77.5%、KSR血清替代物9%~11%、二甲基亚砜9%~11%、青链霉素4.5%~5.5%，各组分的体积百分数之和为100%。


4.一种如权利要求1~3中任一项所述的无血清冻存保护剂在冻存牛睾丸组织中的应用。

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【专利技术属性】
技术研发人员：张学明，朱文倩，姜禹，蔡宁宁，杨蕊，石建忠，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22