一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料及其制备方法和使用方法技术

一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料及其制备方法和使用方法，它属于农业微生物领域，具体涉及一种预防水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料及其制备方法和使用方法。本发明专利技术的目的是要解决现有使用浓硫酸用于预防寒地水稻育苗根腐病存在使用过程中容易造成人员烧伤，使用不当会又会造成烧苗现象的问题。一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，以复合微生物发酵剂作为菌种，接种于固体发酵培养基中。备方法：一、配置固体发酵培养基；二、发酵，得到用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料；使用方法：先将用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料与育秧土混合均匀，再装盘。本发明专利技术主要用于制备微生物发酵肥料。

【技术实现步骤摘要】
一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料及其制备方法和使用方法
本专利技术属于农业微生物领域，具体涉及一种预防水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料及其制备方法和使用方法。
技术介绍
东北地区为我国重要商品粮基地，尤其是寒地水稻种植面积位居全国首位。寒地水稻种植因环境影响，需要提前在温室大棚中育苗抢积温，但由于春季经常发生低温冻害，水稻育苗时常发生大面积根腐病，严重地区整棚水稻秧苗病死，给稻农造成巨大损失。导致寒地水稻育苗根腐病的病菌多属于真菌，最适生长pH程弱碱性，育苗前期，常发生低温冻害，秧苗弱，病菌极易侵入秧苗根部，从近地表外开始腐烂，有灰色或紫色霉状物，传染性强，先由点到片发病，逐渐向四周蔓延扩展，若防治不及时，两三天内就可扩展到整栋育秧棚，而将育苗土的pH值控制在酸性条件下，真菌类病害就没有滋生的适宜土壤环境条件，其发病几率大大降低。为抑制根腐病发生，稻农常采用调整土壤酸度来抑制病菌，常用的是浓硫酸，因浓硫酸为易制毒化学品，不易购买，且使用过程中容易造成人员烧伤，使用不当会又会造成烧苗现象。中国已公开专利《一种防治水稻根腐病有机肥的制备方法》(申请号：201711235696.6)中公开一种水稻有机肥，以包括酵母菌、放线菌、枯草杆菌和根霉菌中二种或以上作为混合菌种，使用辐照强度20-30雷姆的γ射线和光照强度210-230lux紫外光交替照射，获取具有较高抗生素代谢能力的变异菌种，以豆粕、大豆秸秆、西瓜藤、稻壳、葡萄叶和鸡粪等有机原料制备蒸煮有机料，再利用变异菌种对蒸煮有机料进行发酵，得到发酵有机料，发酵有机料经过制粒和包衣，得到水稻有机肥，但是专利中明确给出水稻有机肥使用方法为：先将水稻田水排干，晾晒3-4天至土壤水分含量在50％-60％，然后按照每亩300-400kg均匀施撒水稻有机肥，晾晒2天后向稻田中浇灌水；而大田水稻根腐病产生的原因是根部长期浸渍在水中、土壤中氧气含量降低，为真菌滋生提供了生长繁殖条件；虽然大田水稻根腐病与寒地水稻育苗根腐病都属于水稻根腐病，但发病原因不同；所以该水稻有机肥只能用于预防大田水稻根腐病，而无法代替浓硫酸用于预防寒地水稻育苗根腐病。
技术实现思路
本专利技术的目的是要解决现有使用浓硫酸用于预防寒地水稻育苗根腐病存在使用过程中容易造成人员烧伤，使用不当会又会造成烧苗现象的问题，而提供一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料及其制备方法和使用方法。一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，以复合微生物发酵剂作为菌种，接种于固体发酵培养基中，且用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料的生物活性不低于1×108CFU/g；所述复合微生物发酵剂与固体发酵培养基的质量比(5～15):(85～95)；所述复合微生物发酵剂中的活性微生物包括植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和哈茨木霉；所述固体发酵培养基按照重量份数由20～40份豆粕粉、10～30份玉米粉、10～20份糠醛渣、10～20份过磷酸钙和5～15份稻壳粉混合而成。一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料的制备方法，具体是按以下按步骤完成的：一、配置固体发酵培养基：按照重量份数称取20～40份豆粕粉、10～30份玉米粉、10～20份糠醛渣、10～20份过磷酸钙和5～15份稻壳粉并混合均匀，然后将含水量调至55～65％，得到固体发酵培养基；二、发酵：将复合微生物发酵剂和固体发酵培养基装入带呼吸阀的发酵袋中，在温度为25～35℃下发酵20d～30d，得到用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料；所述复合微生物发酵剂与固体发酵培养基的质量比(5～15):(85～95)；所述用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料的生物活性不低于1×108CFU/g；所述复合微生物发酵剂按照重量份数由2～3份植物乳杆菌发酵液、1～2份嗜酸乳杆菌发酵液、1～2份巨大芽孢杆菌发酵液、2～3份胶冻样芽孢杆菌发酵液和1～2份哈茨木霉发酵液组成；所述植物乳杆菌发酵液是按以下步骤制备的：①、制备植物乳杆菌种子培养基：取20g葡萄糖、10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母粉、1g磷酸氢二钾、2g柠檬酸三胺、1ml吐温80、5g乙酸钠、0.5g七水硫酸镁和0.25g一水硫酸锰加入水中并混匀，然后加入水定容至1L，将pH控制为5.5～5.8，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到植物乳杆菌种子培养基；②、活化：在无菌操作台上取一接种环植物乳杆菌接种于植物乳杆菌种子培养基中，在空气浴摇床50r/min～100r/min和温度为37℃下培养24h～36h，得到植物乳杆菌液体种子；所述植物乳杆菌液体种子中活菌数不小于1×107CFU/mL；③、制备植物乳杆菌发酵培养基：取10kg～20kg大豆蛋白粉、10kg～20kg葡萄糖、1kg～2kg乳糖、0.5kg～1kg氯化钠、0.5kg～1.5kg磷酸氢二钠和0.2kg～0.5kg消泡剂加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，将pH控制为5.5～6.0，得到植物乳杆菌发酵培养基；④、发酵培养：将植物乳杆菌液体种子和植物乳杆菌发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为37±2℃下发酵时间24h～36h，得到植物乳杆菌发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为50r/min～100r/min；发酵过程中每小时通入无菌空气5min～10min，且通风比为1:(0.5～1)；所述植物乳杆菌液体种子与植物乳杆菌发酵培养基的质量比1:30；所述植物乳杆菌发酵液中活菌数不小于1×108CFU/mL；所述嗜酸乳杆菌发酵液是按以下步骤制备的：①、制备嗜酸乳杆菌种子培养基：取20g葡萄糖、10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母粉、1g磷酸氢二钾、2g柠檬酸三胺、1ml吐温80、5g乙酸钠、0.5g七水硫酸镁和0.25g一水硫酸锰加入水中并混匀，然后加入水定容至1L，将pH控制为5.5～5.8，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到嗜酸乳杆菌种子培养基；②、活化：在无菌操作台上取一接种环嗜酸乳杆菌接种于嗜酸乳杆菌种子培养基中，在空气浴摇床50r/min～100r/min和温度为37℃下培养24h～36h，得到嗜酸乳杆菌液体种子；所述嗜酸乳杆菌液体种子中活菌数不小于1×107CFU/mL；③、制备嗜酸乳杆菌发酵培养基：取10kg～20kg大豆蛋白粉、10kg～20kg葡萄糖、1kg～2kg乳糖、0.5kg～1kg氯化钠、0.5kg～1.5kg磷酸氢二钠和0.2kg～0.5kg消泡剂加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，将pH控制为5.5～6.0，得到嗜酸乳杆菌发酵培养基；④、发酵培养：将嗜酸乳杆菌液体种子和嗜酸乳杆菌发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为37±2℃下发酵时间24h～36h，得到嗜酸乳杆菌发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为50r/min～100r/min；发酵过程中每小时通入无菌空气5min～10min，且通风比为1:(0.5～1)；所述嗜酸乳杆菌液体种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于它以复合微生物发酵剂作为菌种，接种于固体发酵培养基中，且用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料的生物活性不低于1×10

【技术特征摘要】
1.一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于它以复合微生物发酵剂作为菌种，接种于固体发酵培养基中，且用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料的生物活性不低于1×108CFU/g；所述复合微生物发酵剂与固体发酵培养基的质量比(5～15):(85～95)；所述复合微生物发酵剂中的活性微生物包括植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和哈茨木霉；所述固体发酵培养基按照重量份数由20～40份豆粕粉、10～30份玉米粉、10～20份糠醛渣、10～20份过磷酸钙和5～15份稻壳粉混合而成。


2.根据权利要求1所述的一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于所述复合微生物发酵剂按照重量份数由2～3份植物乳杆菌发酵液、1～2份嗜酸乳杆菌发酵液、1～2份巨大芽孢杆菌发酵液、2～3份胶冻样芽孢杆菌发酵液和1～2份哈茨木霉发酵液组成；且植物乳杆菌发酵液中活菌数不小于1×108CFU/mL，嗜酸乳杆菌发酵液中活菌数不小于1×108CFU/mL，巨大芽孢杆菌发酵液中活菌数不小于1×1010CFU/mL，所述胶冻样芽孢杆菌发酵液中活菌数不小于1×1010CFU/mL，哈茨木霉发酵液中活孢子数不小于1×108CFU/mL。


3.根据权利要求2所述的一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于所述植物乳杆菌发酵液是按以下步骤制备的：
①、制备植物乳杆菌种子培养基：取20g葡萄糖、10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母粉、1g磷酸氢二钾、2g柠檬酸三胺、1ml吐温80、5g乙酸钠、0.5g七水硫酸镁和0.25g一水硫酸锰加入水中并混匀，然后加入水定容至1L，将pH控制为5.5～5.8，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到植物乳杆菌种子培养基；
②、活化：在无菌操作台上取一接种环植物乳杆菌接种于植物乳杆菌种子培养基中，在空气浴摇床50r/min～100r/min和温度为37℃下培养24h～36h，得到植物乳杆菌液体种子；所述植物乳杆菌液体种子中活菌数不小于1×107CFU/mL；
③、制备植物乳杆菌发酵培养基：取10kg～20kg大豆蛋白粉、10kg～20kg葡萄糖、1kg～2kg乳糖、0.5kg～1kg氯化钠、0.5kg～1.5kg磷酸氢二钠和0.2kg～0.5kg消泡剂加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，将pH控制为5.5～6.0，得到植物乳杆菌发酵培养基；
④、发酵培养：将植物乳杆菌液体种子和植物乳杆菌发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为37±2℃下发酵时间24h～36h，得到植物乳杆菌发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为50r/min～100r/min；发酵过程中每小时通入无菌空气5min～10min，且通风比为1:(0.5～1)；所述植物乳杆菌液体种子与植物乳杆菌发酵培养基的质量比1:30；所述植物乳杆菌发酵液中活菌数不小于1×108CFU/mL。


4.根据权利要求2所述的一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于所述嗜酸乳杆菌发酵液是按以下步骤制备的：
①、制备嗜酸乳杆菌种子培养基：取20g葡萄糖、10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母粉、1g磷酸氢二钾、2g柠檬酸三胺、1ml吐温80、5g乙酸钠、0.5g七水硫酸镁和0.25g一水硫酸锰加入水中并混匀，然后加入水定容至1L，将pH控制为5.5～5.8，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到嗜酸乳杆菌种子培养基；
②、活化：在无菌操作台上取一接种环嗜酸乳杆菌接种于嗜酸乳杆菌种子培养基中，在空气浴摇床50r/min～100r/min和温度为37℃下培养24h～36h，得到嗜酸乳杆菌液体种子；所述嗜酸乳杆菌液体种子中活菌数不小于1×107CFU/mL；
③、制备嗜酸乳杆菌发酵培养基：取10kg～20kg大豆蛋白粉、10kg～20kg葡萄糖、1kg～2kg乳糖、0.5kg～1kg氯化钠、0.5kg～1.5kg磷酸氢二钠和0.2kg～0.5kg消泡剂加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，将pH控制为5.5～6.0，得到嗜酸乳杆菌发酵培养基；
④、发酵培养：将嗜酸乳杆菌液体种子和嗜酸乳杆菌发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为37±2℃下发酵时间24h～36h，得到嗜酸乳杆菌发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为50r/min～100r/min；发酵过程中每小时通入无菌空气5min～10min，且通风比为1:(0.5～1)；所述嗜酸乳杆菌液体种子与嗜酸乳杆菌发酵培养基的质量比1:30；所述嗜酸乳杆菌发酵液中活菌数不小于1×108CFU/mL。


5.根据权利要求2所述的一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于所述巨大芽孢杆菌发酵液是按以下步骤制备的：
①、制备巨大芽孢杆菌种子培养基：取5g牛肉膏、10g蛋白胨和3g氯化钠加入水中并混匀，然后加入水定容至1L，将pH控制为7.5，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到巨大芽孢杆菌种子培养基；
②、活化：在无菌操作台上取一接种环巨大芽孢杆菌接种于巨大芽孢杆菌种子培养基中，在空气浴摇床150r/min～200r/min和温度为37±2℃下培养18h～24h，得到巨大芽孢杆菌液体种子；所述巨大芽孢杆菌液体种子中活菌数不小于1×108CFU/mL；
③、制备巨大芽孢杆菌发酵培养基：取5kg～10kg动物蛋白胨、5kg～10kg玉米糖化醪、1kg～2kg氯化钠、0.1kg～0.4kg氢氧化钠、0.5kg～1.5kg磷酸氢二钠和0.2kg～0.5kg消泡剂加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，将pH控制为7.0～7.5，得到巨大芽孢杆菌发酵培养基；
④、发酵培养：将巨大芽孢杆菌液体种子和巨大芽孢杆菌发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为37±2℃下发酵时间18h～24h，得到巨大芽孢杆菌发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为180r/min～220r/min；发酵过程中通风比为1:(0.5～1)；所述巨大芽孢杆菌液体种子与巨大芽孢杆菌发酵培养基的质量比1:50；所述巨大芽孢杆菌发酵液中活菌数不小于1×1010CFU/mL。


6.根据权利要求2所述的一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于所述胶冻样芽孢杆菌发酵液是按以下步骤制备的：
①、制备胶冻样芽孢杆菌种子培养基：取10g蔗糖、0.5g磷酸氢二钾、0.4g酵母提取物、0.2g七水硫酸镁和0.2g氯化镁加入水中并混匀，然后加入水定容至1L，将pH控制为7.0～7.5，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到胶冻样芽孢杆菌种子培养基；
②、活化：在无菌操作台上取一接种环胶冻样芽孢杆菌接种于胶冻样芽孢杆菌种子培养基中，在空气浴摇床150r/min～200r/min和温度为37±2℃下培养18h～24h，得到胶冻样芽孢杆菌液体种子；所述胶冻样芽孢杆菌液体种子中活菌数不小于1×108CFU/mL；
③、制备胶冻样芽孢杆菌发酵培养基：取10kg～20kg糖蜜、5kg～10kg120目的豆粕粉、1kg～2kg七水硫酸镁、0.5kg～1kg磷酸二氢钾和0.5kg～1kg碳酸钙加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，将pH控制为7.0～7.5，得到胶冻样芽孢杆菌发酵培养基；
④、发酵培养：将胶冻样芽孢杆菌液体种子和胶冻样芽孢杆菌发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为37±2℃下发酵时间18h～24h，得到胶冻样芽孢杆菌发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为160r/min～220r/min；发酵过程中通风比为1:(0.5～1)；所述胶冻样芽孢杆菌液体种子与胶冻样芽孢杆菌发酵培养基的质量比1:50；所述胶冻样芽孢杆菌发酵液中活菌数不小于1×1010CFU/mL。


7.根据权利要求2所述的一种用于预防寒地水稻育苗根腐病的微生物发酵肥料，其特征在于所述哈茨木霉发酵液是按以下步骤制备的：
①、制备哈茨木霉种子培养基：取200g土豆，切碎后加入水中蒸煮40min，用纱布过滤，得到土豆蒸煮液，向土豆蒸煮液中加入20g葡萄糖并混匀，加入水定容至1L，然后采用121℃蒸汽灭菌20min，冷却至室温后，得到哈茨木霉种子培养基；
②、活化：在无菌操作台上，将PDA平板培养基中洗脱的哈茨木霉孢子接种于哈茨木霉种子培养基中，在空气浴摇床200r/min和温度为26℃下培养3d，得到哈茨木霉液体种子；所述哈茨木霉液体种子中活孢子数应不低于1×106CFU/mL；
③、制备哈茨木霉发酵培养基：取10kg～20kg可溶性淀粉、2.5kg～5kg酵母膏、0.5kg～1kg七水硫酸亚铁、0.5kg～1kg七水硫酸镁和0.5kg～1kg磷酸二氢钾加入水中并混匀，然后加入水定容至1000L，得到哈茨木霉发酵培养基；
④、发酵培养：将哈茨木霉液体种子和哈茨木霉发酵培养基放入机械搅拌通风发酵罐中，在温度为23～28℃下发酵时间3d～5d，得到哈茨木霉发酵液，发酵过程中搅拌速度控制为150r/min～250r/min；发酵过程中通风比为1:(1～2)；所述哈茨木霉液体种子与哈茨木...

【专利技术属性】
技术研发人员：高照亮，隽加香，于锡宏，宋东洋，王磊，杜恩鹏，付学鹏，王咏，赵美兰，赵维斌，车力格尔，徐鑫波，
申请(专利权)人：哈尔滨艾加生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23