用于改善存活蛋白疫苗在癌症治疗中的功效的方法技术

本发明专利技术的发明专利技术名称是用于改善存活蛋白疫苗在癌症治疗中的功效的方法。本发明专利技术提供了用于改善疫苗在癌症治疗中功效的方法。本发明专利技术的方法包括在用存活蛋白疫苗接种前，给予至少两剂量的干扰DNA复制的剂。还提供了用于本发明专利技术方法的组合物。

Methods for improving the efficacy of survival protein vaccines in cancer treatment

【技术实现步骤摘要】
用于改善存活蛋白疫苗在癌症治疗中的功效的方法本申请是分案申请，原申请的申请日为2013年3月27日、申请号为201380076924.3(PCT/CA2013/050248)、专利技术名称为“用于改善存活蛋白疫苗在癌症治疗中的功效的方法”。专利
本专利技术总体涉及用于治疗癌症的方法，并且具体地，涉及通过使用干扰DNA复制的剂的预处理改善存活蛋白疫苗在癌症治疗中的功效的方法。专利技术背景由接种疫苗诱导的免疫应答可以主要地分为体液型或细胞型。典型地期望体液应答防止遭受病毒或细菌入侵者，而针对病毒感染的细胞和癌细胞的免疫性典型地涉及细胞介导的应答。体液免疫具有的本质特征是由B细胞产生高水平抗体，而细胞免疫的特征是CD8+细胞毒T淋巴细胞的活化作用增加。许多已经在临床前开发中显示出希望的疫苗在人类中测试时，最终未能证实临床益处。由于涉及癌症疫苗，治疗性干预是一种复杂的挑战，并且疾病的许多方面例如相对于护理标准的治疗时机、癌症阶段与类型，对治疗的结果都具有影响。然而，存在着三种免疫疗法特性，如果它们被严格结合，则可以提供更好的结果：(1)疫苗免疫原性(即，佐剂)；(2)肿瘤相关抗原的适当选择；和(3)克服肿瘤诱导的免疫抑制的能力(Weir等人，癌症(Cancer)3:3114-3142，2011；Berzofsky等人，放射肿瘤学研究(SeminOncol)39(3):348-354,2012)。专利技术概述申请人现在已经发现癌症疫苗(即，存活蛋白疫苗)的功效可以通过预先给予至少两次剂量的干扰DNA复制的剂来提高。因此，在一方面，本专利技术涉及用于受试者的癌症治疗中提高疫苗功效的方法，所述方法包括：(i)以足够提供免疫-调节作用的量向受试者给予至少两次剂量的干扰DNA复制的剂；和(ii)随后向受试者给予治疗有效量的疫苗，其中疫苗包括至少一种存活蛋白抗原。在本专利技术方法的实施方式中，将干扰DNA复制的剂每日给予受试者，持续每14天中的连续7天(即，每周交替治疗)。在一个实施方式中，这种用干扰DNA复制的剂的每周交替治疗，在第一次给予存活蛋白疫苗之前约一周开始。在本专利技术方法的实施方式中，将存活蛋白疫苗每三周一次向受试者给予。在本专利技术方法的实施方式中，干扰DNA复制的剂是烷化剂，如例如环磷酰胺。在本专利技术方法的实施方式中，存活蛋白疫苗是这样的疫苗，其包括一种或多种具有如下氨基酸序列的存活蛋白肽抗原：FEELTLGEF(SEQIDNO:1)；FTELTLGEF(SEQIDNO:2)；LTLGEFLKL(SEQIDNO:3)；LMLGEFLKL(SEQIDNO:4)；RISTFKNWPF(SEQIDNO:5)；RISTFKNWPK(SEQIDNO:6)；STFKNWPFL(SEQIDNO:7)；和LPPAWQPFL(SEQIDNO:8)。在本专利技术方法的实施方式中，存活蛋白疫苗是免疫疫苗公司的候选抗癌症免疫疗法疫苗DPX-Survivac。DPX-Survivac包括五种包括如下氨基酸序列的合成存活蛋白肽抗原：FTELTLGEF(SEQIDNO:2)、LMLGEFLKL(SEQIDNO:4)、RISTFKNWPK(SEQIDNO:6)、STFKNWPFL(SEQIDNO:7)、和LPPAWQPFL(SEQIDNO:8)；来自破伤风类毒素的通用T辅助细胞表位(AQYIKANSKFIGITEL；SEQIDNO:9)；聚肌胞甘酸(polyI:C)多核苷酸佐剂；由DOPC和胆固醇组成的脂质体；和疏水载体ISA51VG。在另一方面，本专利技术涉及干扰DNA复制的剂与包括至少一种存活蛋白抗原的疫苗组合用于提供疫苗在癌症治疗中功效的用途，其中至少两次剂量的剂在给予疫苗前给予。在另一方面，本专利技术涉及用于在此所描述的方法的组合物。本专利技术的其他方面以及特征在本领域普通技术人员结合相应图审阅本专利技术具体实施例的以下描述时将变得显而易见。附图概述在附图中，其仅通过举例解释说明了本专利技术的实施方式：图1图解说明了评估DPX-Survivac的安全性和免疫原性的第一阶段临床试验的设计。在研究的第-7天和+49之间，在有或没有低剂量环磷酰胺的口服给予情况下(50mg，1天两次，巴克斯特(Baxter))，疫苗每三周进行给予(3次接种，间隔约21天)。每14天中持续连续7天每天给药低剂量环磷酰胺。环磷酰胺旨在第一次接种前一周开始。患者接受(1)0.5mL的DPX-Survivac的三次给予(同龄组A)，(2)与所概括的低剂量口服环磷酰胺组合的0.1mLDPX-Survivac的三次给予(同龄组B)或(3)与所概括的低剂量口服环磷酰胺组合的0.5mLDPX-Survivac的三次给予(同龄组C)。至第一次接种之前(基线)和在每次接种后的约3-4周收集血液样品，以分离并冷-藏保存外周血单核细胞(PBMC’s)。当可能时，血液样品也在较晚的时间点进行收集。PBMC被用于包括ELISPOT的免疫测定，以及基于流式血细胞计数术的测定例如四聚体染色和胞内细胞因子染色(ICS)。图2提供ELISPOT检测结果，并显示在来自接种的卵巢癌患者的外周血单核细胞(PBMC)中，DPX-Survivac诱导的干扰素γ产生增加。在IFN-γELISPOT测定中，用存活蛋白肽刺激受试者PBMC过夜。所展现的数据代表来自个体受试者的点形成单位/百万PBMC的数量，并且线代表处于基线和在一次、两次和三次剂量的疫苗给予之后的平均值。图3提供了相对于在患者的基线免疫应答代表这些患者的IFN-γ分泌细胞的成倍增加的刺激倍数(factor)的总结。使用可获得的ELISPOT结果来计算刺激倍数。在肽刺激不存在的情况下，将在ELISPOT中具有不明原因的高背景样品排除在分析之外。2倍的最小刺激倍数需要考虑到在给定时间点患者的免疫应答。图4提供了ELISPOT检测结果，并显示在来自接种的卵巢癌患者的PBMC中，DPX-Survivac诱导的IFN-γ产生的增加。在IFN-γELISPOT测定中，用存活蛋白肽刺激受试者PBMC过夜。所呈现的数据代表来自个体受试者的点形成单位(SFU)/百万PBMC的数量。图5图解说明了来自代表性受试者02-04的MHC-多聚体染色结果。通过利用DPX-Survivac肽和相应的MHC分子设计的肽-特异性CD8+T细胞结合MHC-多聚体试剂(四聚物)的能力，来测试外周血单核细胞的肽-特异性CD8+T细胞的存在。该测定在未刺激的PBMC(先体外后体内(exvivo))上或在体外在一种或多种HLA-匹配的存活蛋白肽的存在下刺激10天的PBMC中进行。基于HIV肽的无关MHC-多聚体充当阴性对照。所示的图描绘了特异地结合MHC-多聚体试剂的接种后PBMC样品中的CD8+T细胞的百分数。使用流式细胞计数法检测具体的T细胞，其中PBMC被门控在CD3+活细胞上，以便显示细胞对CD8+的双阳性和四聚物结合。图6：来自接种的卵巢癌患者的外周血单核细胞(PBMC)中DPX-Sur本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于在受试者中改善疫苗在癌症治疗中的功效的方法，所述方法包括：/n(i)以足够提供免疫-调节作用的量向受试者给予至少两剂量的干扰DNA复制的剂；并且/n(ii)随后向所述受试者给予治疗有效量的疫苗，其中所述疫苗包括至少一种存活蛋白抗原。/n

【技术特征摘要】
1.用于在受试者中改善疫苗在癌症治疗中的功效的方法，所述方法包括：
(i)以足够提供免疫-调节作用的量向受试者给予至少两剂量的干扰DNA复制的剂；并且
(ii)随后向所述受试者给予治疗有效量的疫苗，其中所述疫苗包括至少一种存活蛋白抗原。


2.根据权利要求1所述的方法，包括在给予所述疫苗前至少两天，并且优选地在给予所述疫苗前至少四天，向所述受试者给予第一剂量的所述剂。


3.根据权利要求1所述的方法，包括在给予所述疫苗前约一周，向所述受试者给予第一剂量的剂。


4.根据权利要求1至3任一项中所述的方法，包括给予所述剂持续至少连续两天的期间。


5.根据权利要求1至4任一项中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·曼苏尔，N·L·伯恩斯坦，G·M·韦尔，M·M·斯坦福，
申请(专利权)人：免疫疫苗技术有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA