本发明专利技术属于烟草及烟草制品中农药残留的理化检验技术领域，具体说是一种烟草及烟草制品中六种二硝基苯胺类农药残留量的测定方法，该方法是在加速溶剂萃取仪（ＡＳＥ）中萃取农药残留，以气相色谱（配电子俘获检测器（ＥＣＤ））直接测定烟草及烟草制品中止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵等六种二硝基苯胺类农药残留量的方法。本发明专利技术的方法克服了现有技术样品处理方法的不足，针对烟草样品优化了样品前处理方法和仪器检测条件，与现有技术相比本发明专利技术方法具有如下优良效果：本发明专利技术方法样品前处理过程简单，可减少烟草中色素等杂质的干扰，整个操作自动化程度高，并具有操作准确、灵敏度高及重复性好的优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于烟草及烟草制品中农药残留的理化检验
，主要涉及烟草及烟草制品中止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵等六种二硝基苯胺类农药残留量的测定技术，具体说是一种在加速溶剂萃取仪(ASE)中萃取农药残留，以气相色谱(配电子俘获检测器(ECD))直接测定烟草及烟草制品中六种二硝基苯胺类农药残留量的方法。
技术介绍
烟草作为吸食品，其农药残留量问题已成为吸烟安全性问题中的重要组成部分，烟草及烟草制品农药残留量指标是各国在烟草制品质量控制中的重要内容，已成为国际市场烟叶评价和选购的重要因素，也是烟草国际贸易中进行商品检验的重要内容。二硝基苯胺类农药是烟草农残检测的重要指标，国际烟草科学研究合作中心(CORESTA)农用化学品委员会(ACAC)在2003年提出了烟草及烟草制品中包括止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵等6种二硝基苯胺类农药在内的99种农药的推荐性农残限量。GB/T 13595-200中华人民共和国国家标准GB/T 13596-2004烟草及烟草制品拟除虫菊酯杀虫剂、有机磷杀虫剂、含氮农药残留量的测定规定了烟草及烟草制品中的氟节胺、止芽素、异丙乐灵和二甲戊灵等4种二硝基苯胺类农药的测定方法，为该类农药残留量的检测提供了的分析依据，但该法采用丙酮高速匀浆提取提取烟草中的农药残留，用乙酸乙酯和环己烷进行液/液分配，凝胶渗透色谱和硅胶柱层析净化，以气相色谱法(ECD检测器)和气相色谱/质谱法测定，操作步骤比较繁杂，且使用大量有机溶剂，对实验人员毒性较大；HarbJ等HAIBJ，HOFERI，RENAUD J M.Analysis of multiple pesticide residues in tobacco usingpressurized liquid extraction automated solid-phase extraction clean-upand gas chromatography-tandem mass spectrometry.J.Chromatogr.A，2003，1020173-187.介绍了在加速溶剂萃取仪(ASE)中将烟末和硅藻土混合，以丙酮萃取烟草中的农药残留，萃取液经过两步固相萃取净化后，以GC-MS-MS检测烟草中的止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵，为该类农药残留量的检测提供了的分析依据，但该法在加速溶剂萃取仪(ASE)中完成萃取步骤后，需要对萃取液进行浓缩，然后以两步固相萃取净化，实验步骤相对繁琐，且仪器GC-MS-MS价格昂贵，普及性差。未见烟草中此类农药检测的其它文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在克服现有技术缺陷，提供一种采用加速溶剂萃取仪(ASE)萃取烟草及烟草制品中农药残留，无需对萃取液进行进一步处理，直接以气相色谱(配ECD检测器)测定烟草及烟草制品中止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵等六种二硝基苯胺类农药残留量的测定方法，该方法能快速、准确检测烟草及烟草制品中六种二硝基苯胺类农药残留量，测定结果准确、测定干扰少。 本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的本专利技术的包括以下步骤 a、处理弗罗里硅土将弗罗里硅土在马弗炉中550℃灼烧5h，在无干燥剂的干燥器中冷却后，加入5％(质量分数)的水混合均匀，并置于密闭玻璃容器中平衡至少48h； b、内标溶液的配制使用灭蚁灵标准品作为内标物，以正己烷溶解配制成100μg/mL的内标溶液； c、称取样品准确称取等量的烟末和弗罗里硅土，将二者研磨、混匀，转移至底部放一层纤维滤纸和弗罗里硅土的不锈钢萃取池中； d、ASE萃取将不锈钢萃取池放置于ASE仪器上，进行农药萃取； e、萃取液处理在萃取液经加入10μL内标溶液，并经无水Na2SO4干燥后，即为样品待测液； f、准备标准工作溶液分别称取0.02g六种农药标准品止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵到各自的100mL容量瓶中，用正己烷稀释并最终配制成具有浓度梯度的各种农药的标准工作溶液； g、气相色谱测定吸取配制好的不同浓度的农药标准工作溶液，注入气相色谱仪(配ECD检测器)； h、农药残留量测定结果的计算 以内标法进行农药残留量的定量分析，即以农药和内标灭蚁灵的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.99，对提取后的样品进行测定，测得检出农药和内标灭蚁灵的色谱峰面积比，代入标准曲线，求得样品中的止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵等农药的残留量。 在本专利技术中，ASE的仪器参数设置为萃取溶剂正己烷，温度80℃，压力1500psi，加热时间5min，静态时间5min，冲洗体积60％(萃取池体积)，氮气吹扫时间60s，静态循环次数2次。 标准工作溶液的配制方式如下分别称取0.02g每种农药标准品到各自的100mL容量瓶中，精确至0.0001g，用正己烷稀释定容，配制成浓度约为200μg/mL的每种农药单一标准储备液；移取各农药单一标准储备液2.5mL于100mL容量瓶中，用正己烷稀释定容，得到各农药标准品浓度约为5μg/mL的混合储备液；分别移取一定体积的混合储备液于20mL容量瓶中，加入10μL内标溶液，用正己烷稀释定容，即配制成不同浓度的农药标准工作溶液，标准序列0.0125μg/mL，0.025μg/mL，0.125μg/mL，0.25μg/mL，0.5μg/mL，1.25μg/mL和2.5μg/mL；按称取5.00g烟草样品算，即得到标准序列0.05μg/g，0.10μg/g，0.50μg/g，1.00μg/g，2.00μg/g，5.00μg/g和10.00μg/g。 在气相色谱测定时，采用的GC条件为色谱柱DB-35熔融石英毛细管柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm；使用不分流模式，进样口温度230℃，进样量1μL；程序升温50℃持续1min，以25℃/min的速度升至150℃，然后以5℃/min的速度升至260℃，持续5min，再以10℃/min的速度升至290℃，持续15min；载气为氮气，恒速1.2mL/min。 本专利技术的方法克服了现有技术样品处理方法的不足，针对烟草样品优化了样品前处理方法和仪器检测条件。与现有技术相比本专利技术方法具有如下优良效果 (1)本专利技术方法样品前处理过程简单，自动化程度高，大大缩短了每个烟草样品的萃取前处理时间。Harb J等的方法利用加速溶剂萃取技术，具有操作简便、省时省溶剂和减少有机溶剂对环境的污染等特点，但是他们是将烟末和硅藻土混合，硅藻土只能起到分散烟末样品的作用，本专利技术方法将烟末直接与适量的固体基质弗罗里硅土研磨、混匀，装入萃取池中，并将适量的弗罗里硅土至于萃取池的最下端，弗罗里硅土既起到分散烟末样品，提高萃取效率的作用，又能对烟草中的色素及烟草植物组织的其他共萃物起到较好的吸附净化作用，这样就将样品的提取和净化一步完成，即避免了样品转溶、浓缩、净化等过程造成的待测农药组分损失，又使实验操作更加简单、快捷。 (2)Harb J等的方法采用丙酮萃取烟草中的农药，丙酮萃取出的杂质较多，需要繁杂的净化步骤本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种烟草及烟草制品中六种二硝基苯胺类农药残留量的测定方法，其特征在于：该测定方法包括以下步骤： ａ、处理弗罗里硅土：将弗罗里硅土在马弗炉中５５０℃灼烧５ｈ，在无干燥剂的干燥器中冷却后，加入５％（质量分数）的水混合均匀，并置于密闭玻璃容器中平衡至少４８ｈ； ｂ、内标溶液的配制：使用灭蚁灵标准品作为内标物，以正己烷溶解配制成１００μｇ／ｍＬ的内标溶液； ｃ、称取样品：准确称取等量的烟末和弗罗里硅土，将二者研磨、混匀，转移至底部放一层纤维滤纸和弗罗里硅土的不锈钢萃取池中； ｄ、ＡＳＥ萃取：将不锈钢萃取池放置于ＡＳＥ仪器上，进行农药萃取； ｅ、萃取液处理：在萃取液经加入１０μＬ内标溶液，并经无水Ｎａ↓［２］ＳＯ↓［４］干燥后，即为样品待测液； ｆ、准备标准工作溶液：分别称取０．０２ｇ六种农药标准品：止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵到各自的１００ｍＬ容量瓶中，用正己烷稀释并最终配制成具有浓度梯度的各种农药的标准工作溶液； ｇ、气相色谱测定：吸取配制好的不同浓度的农药标准工作溶液，注入气相色谱仪（配ＥＣＤ检测器）； ｈ、农药残留量测定结果的计算： 以内标法进行农药残留量的定量分析，即以农药和内标灭蚁灵的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于０．９９，对提取后的样品进行测定，测得检出农药和内标灭蚁灵的色谱峰面积比，代入标准曲线，求得样品中的止芽素、氟节胺、异丙乐灵、二甲戊灵、乙丁氟灵和氟乐灵等农药的残留量。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：边照阳，唐纲岭，张洪非，李中皓，杨进，侯宏卫，庞永强，胡清源，
申请(专利权)人：中国烟草总公司郑州烟草研究院，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]
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