一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术属于生物技术领域，具体公开了一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，包括盒体，盒体内设有RIPA裂解液、脱脂奶封闭液、兔抗GAPDH内参一抗多克隆抗体、TBST、兔抗鸡MLP多克隆抗体、HRP标记的羊抗兔IgG二抗，所述盒体内设置五个隔板，五个隔板将盒体分成六个试剂存放区，六个试剂存放区内分别设置衬垫，衬垫上设置试剂容纳腔，试剂容纳腔沿盒体宽度方向设置，试剂容纳腔内放置试剂瓶。本实用新型专利技术能够特异性识别鸡骨骼肌中的MLP蛋白，准确度高。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒
本技术涉及生物技术检测用具领域，具体是一种检测鸡MLP蛋白的试剂盒。
技术介绍
鸡肉由于具有高蛋白、低胆固醇、低脂肪和低热量等特点，已成为世界各地消费者普遍接受的优质动物蛋白质来源。另外，与猪、牛相比，肉鸡具有饲养周期短、饲料转化率高、饲养及加工自动化程度高等优点，因此，鸡肉也是最经济的动物蛋白质来源。在我国，鸡肉产品主要来源于白羽肉鸡和黄羽肉鸡两大类。白羽肉鸡为引进品种，属于快大型肉鸡，具有生长速度快、饲料转化率高、产肉量多等特点，适合工业规模化生产，但是口感欠佳。黄羽肉鸡是由我国的传统消费习惯形成的特殊消费食品，相对于白羽肉鸡，黄羽肉鸡具有抗病力强、肉质鲜美等特点。随着生活水平的提高和消费观念的转变，色、香、味俱佳且安全的鸡肉越来越受到消费者的青睐。因此，探究骨骼肌生长发育调控机制、保证鸡快速安全生长并保持肉品质的同步改良是当今肉鸡育种工作者面临的重要理论和实践问题。骨骼肌的肌生成是一个十分复杂的过程，受到严格的发育程序调控，依赖于调控因子精确的时空表达。生肌调节因子家族(MyogenicRegulationFactors,MRFs被公认为是调控骨骼肌肌生成的关键因子，在MRFs激活肌生成和肌肉特异性基因表达的过程中，需要一些辅助因子的参与。富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白3(Cysteineandglycinerichprotein3,CSRP3又被称为肌肉LIM蛋白(muscleLIMprotein,mlP，是肌细胞分化所必需的正向调节因子，缺乏MLP的肌细胞，不能被诱导分化；过表达MLP时，则肌细胞分化能力增强。目前商品化的MLP抗体仅是针对鼠或人的抗体，不能够特异性识别鸡骨骼肌中的MLP蛋白，大大限制了MLP在鸡上的研究。因此，开发研究一种能够特异性识别鸡骨骼肌中的MLP蛋白的试剂盒，具有重要的意义。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，本技术能够特异性识别鸡骨骼肌中的MLP蛋白，准确度高。本技术的目的是通过以下技术方案实现的，一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，其特征是，所述试剂盒包括盒体，盒体内设有RIPA裂解液、脱脂奶封闭液、兔抗GAPDH内参一抗多克隆抗体、TBST、兔抗鸡MLP多克隆抗体、HRP标记的羊抗兔IgG二抗；所述盒体内设置五个隔板，五个隔板将盒体分成六个试剂存放区，六个试剂存放区内分别设置衬垫，衬垫上设置试剂容纳腔，试剂容纳腔沿盒体宽度方向设置，试剂容纳腔内放置试剂瓶。优选的，所述盒体顶部设有第一定位块，第一定位块为U形结构，第一定位块内侧壁上设有定位槽；第一定位块端部与对应的盒体长侧壁顶部形成L形缺口；所述试剂盒还包括盖板，盖板端部上设有第二定位块；盖板两侧设置在第一定位块的定位槽中，第二定位块与L形缺口相配合，第一定位块与第二定位块组成方形框架。与现有技术相比，本技术具有以下有益效果：第一，本技术将盒体自左至右分成六个试剂存放区，六个试剂存放区依次排开，相邻试剂存放区通过隔板进行隔开。本技术通过将盖板插入盒体上设置的U形定位块的定位槽中，实现盖板的安装与定位。第二，本技术盖板上设置第二定位块，第二定位块与第一定位块组成矩形框架，与盒体外框架重合设置，组装后的试剂盒整体协调。附图说明图1是本技术用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒盒体的俯视图；图2是本技术用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒盒体的纵向剖视图；图3是本技术用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒盖板的结构示意图；图4是本技术用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒的侧视图；图5是图4中A部位放大图。具体实施方式结合具体实施例和附图对本技术作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于说明目的，而不用于限制本技术范围。如图1-5所示，一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，包括盒体1、盖板14。盒体1内设有RIPA裂解液2(购自北京普利莱基因技术有限公司)、脱脂奶封闭液3＜购自生工生物工程(上海)股份有限公司＞、兔抗GAPDH内参一抗多克隆抗体4(购自南京金斯瑞生物科技有限公司)、TBST5(购自北京索莱宝科技有限公司)、兔抗鸡MLP多克隆抗体6(其制备方法按照公开号CN110194797A、公开日2019年9月3日的专利公开文件记载的兔抗鸡MLP多克隆抗体方法制备)、HRP标记的羊抗兔IgG二抗7(购自南京钟鼎生物技术有限公司)。盒体1内设置五个隔板9，五个隔板9将盒体1分成六个试剂存放区8，六个试剂存放区8内分别设置衬垫10，衬垫10上设置试剂容纳腔11，试剂容纳腔11沿盒体1宽度方向设置，试剂容纳腔11内放置试剂瓶。本技术将盒体自左至右分成六个试剂存放区，六个试剂存放区依次排开，相邻试剂存放区通过隔板进行隔开。盒体1顶部设有第一定位块12，第一定位块12为U形结构，第一定位块12内侧壁上设有定位槽13；第一定位块12端部与对应的盒体长侧壁顶部形成L形缺口16；盖板14端部上设有第二定位块15，第二定位板15沿盖板宽度方向设置。盖板14两侧设置在第一定位块12的定位槽13中，第二定位块15与L形缺口相配合，第一定位块12与第二定位块15组成方形框架。本技术通过将盖板插入盒体上设置的U形定位块的定位槽中，实现盖板的安装与定位。本技术盖板上设置第二定位块，第二定位块与第一定位块组成矩形框架，与盒体外框架重合设置，组装后的试剂盒整体协调。利用本技术检测鸡MLP蛋白的操作步骤如下：(1)采集鸡肌肉组织样品，置于液氮速冻后转入-80℃冰箱保存；将保存的肌肉组织每个样品取300mg，加入试剂2(RIPA)裂解液，用玻璃匀浆器上下手动匀浆20次，将匀浆物转移到1.5ml离心管，12000r/min、4℃离心5min，取上清，测定蛋白浓度后；制备质量浓度4％浓缩胶和质量浓度10％分离胶后，每孔上样30μg蛋白；浓缩胶恒压90V，分离胶恒压200V，待溴酚兰跑到胶底部时，电转印至NC膜上(300mA)恒流，1.5h；电转结束后，将NC膜置于试剂3中，37℃封闭1h；(2)用试剂3将试剂6(鸡MLP蛋白多克隆抗体和试剂)、试剂4(兔抗GAPDH内参一抗多克隆抗体)分别稀释成1:2000，37℃孵育1.5h或4℃孵育过夜；(3)将膜取出后用试剂5(TBST)清洗3次，每次5min；用试剂3将试剂7(HRP标记的羊抗兔IgG二抗)稀释成1:500，37℃孵育1.5h；(4)将膜取出后用试剂5(TBST)清洗4次，每次5min；ECL化学发光显色，定影；对胶片进行扫描，然后用UVP凝胶图像处理系统Labworks4.6软件分析目的条带的灰度值，将MLP条带灰度值与GAPDH条带灰度值进行比值，所得比值即是MLP蛋白的相对含量。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，其特征是，所述试剂盒包括盒体(1)，盒体(1)内设有RIPA裂解液(2)、脱脂奶封闭液(3)、兔抗GAPDH内参一抗多克隆抗体(4)、TBST(5)、兔抗鸡MLP多克隆抗体(6)、HRP标记的羊抗兔IgG二抗(7)；/n所述盒体(1)内设置五个隔板(9)，五个隔板(9)将盒体(1)分成六个试剂存放区(8)，六个试剂存放区(8)内分别设置衬垫(10)，衬垫(10)上设置试剂容纳腔(11)，试剂容纳腔(11)沿盒体(1)宽度方向设置，试剂容纳腔(11)内放置试剂瓶。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测鸡MLP蛋白的试剂盒，其特征是，所述试剂盒包括盒体(1)，盒体(1)内设有RIPA裂解液(2)、脱脂奶封闭液(3)、兔抗GAPDH内参一抗多克隆抗体(4)、TBST(5)、兔抗鸡MLP多克隆抗体(6)、HRP标记的羊抗兔IgG二抗(7)；
所述盒体(1)内设置五个隔板(9)，五个隔板(9)将盒体(1)分成六个试剂存放区(8)，六个试剂存放区(8)内分别设置衬垫(10)，衬垫(10)上设置试剂容纳腔(11)，试剂容纳腔(11)沿盒体(1)宽度方向设置，试剂容纳腔(11)内放置试剂瓶。...

【专利技术属性】
技术研发人员：单艳菊，姬改革，束婧婷，刘一帆，章明，屠云洁，巨晓军，邹剑敏，
申请(专利权)人：江苏省家禽科学研究所，
类型：新型
国别省市：江苏;32