法呢基途径的生物标志物制造技术

本发明专利技术涉及新的生物标志物，其可以用于确定物质干扰法呢基途径的程度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】法呢基途径的生物标志物二膦酸盐(bisphosphonates)，尤其是氨基二膦酸盐抑制甲羟戊酸途径 中的关键酶，法呢二磷酸(FPP)合成酶(Green JR. 二膦酸盐临床前综述 (Bisphosphonates: preclinical review ) , The Oncologist 2004; 9(Suppl4):3-13)。对该酶的抑制导致蛋白质异戊二烯化的减少(Rogers MJ, Gordon S, Benford HL， Coxon FP， Luckman SP, M6nkk6nen J, Frith JC. Cellular and molecular mechanisms of action of bisphosphonates(二勝酸盐作 用的细胞和分子机制).Cancer(癌症).2000;88(12Suppl):2961-78)。结果，影 响了 FPP的产生并因此影响了角鲨烯和类固醇(胆固醇)的生物合成。此外， 涉及将法呢基或香叶基香叶基基团转移到蛋白质的半胱氨酸氨基酸残基 上的信号传导蛋白的异戊二烯化也被阻碍。异戊二烯化是涉及许多代谢途 径的一些关键蛋白的充分激活所必需的翻译后修饰，所述代谢途径是细胞 存活，细胞骨架组构和癌症进展的基础(Green JR. Bisphosphonates: preclinical review( 二膦酸盐临床前综述).The Oncologist 2004; 9(Suppl4):3-13; Wakeling AE. Inhibitors of growth factor signalling(生长因子 信号传导的抑制剂).Endocr Relat Cancer. 2005 Jul;12 Suppl l:S183-7)。其中 二膦酸盐干扰的途径描述在例如Reszka和Rodan, Mini-Reviews in Medicinal Chemistry(在药物化学中的小综述)，2004,第4巻,第712页，图3 中。猫尿氨酸 (2-氨基-7-羟基-5，5- 二甲基-4-硫代庚酸) (HOOCCH(NH2)CH2SC(CH3)2CH2CH2OH)是 一 种已知在雄性猫尿中大量 存在的重要的含硫的氨基酸。已经推测猫尿氨酸起着吸引雌猫的雄性信息 素的作用(Hendriks WH， Woolhouse AD， Tartelin MF， Moughan PJ (1995b) Synthesis of felinine， 2-amino-7-hydroxy-5,5-dimethyl-4-thiaheptanoic acid(猫 尿氨酸，2-氨基-7-羟基-5,5-二甲基-4-硫代庚酸的合成).Bioorg Chem(生物 有机化学)23: 89-100)。到目前为止，没有显示猫尿氨酸存在于除了猫之 外的物种中。猫尿氨酸的衍生物，Y-谷氨酰基felinyl甘氨酸的肾代谢物最近在家养 猫的血液中被鉴定出来(W. H. Hendricks， D.R. Harding, K. J.Rutherfuurd-Marwick (2004)， Isolation and characterization of renal metabolites of ， y-glutamylfelinylglycine in the urine of the domestic cat (Feliscatus)( y-谷氨酰基felinyl甘氨酸的肾代谢物在家养猫(Felis catus)尿中的分 离和表征)，Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol 139， 245-251)。这种三肽在其它动物物种中以类似于谷胱甘肽-S-缀合物的方式由肾代谢。除了 前述游离猫尿氨酸的存在之外，在猫尿中还显示一些包含猫尿氨酸的代谢 物的存在，包括N-乙酰基猫尿氨酸，felinyl甘氨酸和未改变的Y-谷氨酰基 felinyl甘氨酸。y-谷氨酰基felinyl甘氨酸在猫中的肾代谢以与谷胱甘肽S-缀合物在其它动物物种中类似的方式进行，尽管检测到felinyl甘氨酸说明 可能存在微小的差别。专利技术描述本专利技术涉及一种新的生物标志物，其可以用于确定化合物干扰类固醇 代谢的程度的方法中。所述生物标志物可以是2-氨基-7-羟基-5,5-二甲基-4-硫代庚酸，也称为猫尿氨酸的任何天然存在的衍生物。所述衍生物包括下 式的化合物<formula>formula see original document page 6</formula>V其中R , R，， R"和R，"独立地是H, CH3， COCH3, COH, OCH3, OC2H5, Gly, Gin, Glu， Ala, Val, Met,磷酸根，或焦磷酸根。所述标志物的优选的实施方案是Y-谷氨酰基felinyl甘氮酸(3-甲基丁 醇gluthatione), felinyl甘氨酸，猫尿氨酸或N-乙酰基-猫尿氨酸。前述的标志物用在确定物质干扰类固醇代谢的程度的方法中，所述方 法包括确定所述标志物在用所述物质处理受试者的体液，和完整的组织或组 织提取物中的存在或不存在，其中N-乙酰基-猫尿氨酸的存在指示干扰类 固醇代谢的物质，而N-乙酰基-猫尿氨酸的不存在指示不干扰类固醇代谢 的物质。体液可以是来自身体的任何流体，如血液，血浆，血清或尿液。完整 的组织是任何类型的组织，其在根据本专利技术进行分析前从身体中移出。组 织提取物是来自从身体中移出的组织的任何提取物，其使用本领域众所周 知的提取方法获得。本文所述的方法是在它们从身体中移出后，在样品(体液，完整的组织，组织提取物)上进行的离体(ex-vivo)，原位或体外方法。在本专利技术的一个实施方案中，确定干扰法呢二磷酸产生的程度。优选 地，所述体液是尿液，血浆或血清。在最优选的实施方案中，在受试者的尿液中确定N-乙酰基-猫尿氨酸的存在或不存在。术语"干扰类固醇代谢的程度"涉及猫尿氨酸衍生物的产生和类固醇代谢之间的关联，如FPP的抑制。因此。更高水平的猫尿氨酸衍生物与强 烈的干扰(例如FPP的较强烈抑制)相关，而猫尿氨酸衍生物的低或不可检 测的水平与较弱干扰相关(例如FPP的更小的抑制，其可以由不同的抑制 机制造成并且导致更低的抑制，例如蛋白质异戊二烯化的更小的抑制)。因 此，存在在猫尿氨酸衍生物产生和法呢二磷酸产生之间的关联。用于本文的术语"受试者"涉及任何哺乳动物，优选地涉及人受试者。 尽管要理解的是，本文所述的方法没有直接在受试者身体上进行的。因此， 它们不是体内方法。发现，N-乙酰基-猫尿氨酸可以用于区别不同的二膦酸盐，伊班膦酸 盐和唑来膦酸盐。二膦酸盐是焦磷酸盐的类似物，其中偕位(geminal)氧已经被碳取代 (见，附图说明图1在Mini-Reviews in Medicinal Chemistry (在药物化学的小综述) 2004,第4巻，第712页中)。伊班膦酸盐结构见例如图2，在Mini-Reviews in Medicinal Chemistry (在药物化学的小综述)2004，第4巻，第712页中。唑来膦酸盐结构见例如图2，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种确定物质干扰类固醇代谢的程度的方法，所述方法包括：　－确定在用所述物质处理的受试者的体液和完整的组织或组织提取物中，下式的猫尿氨酸衍生物的存在或不存在，　＊＊＊　其中Ｒ，Ｒ’，Ｒ”和Ｒ”’独立地是：Ｈ，ＣＨ↓［３］，Ｃ ＯＣＨ↓［３］，ＣＯＨ，ＯＣＨ↓［３］，ＯＣ↓［２］Ｈ↓［５］，Ｇｌｙ，Ｇｌｎ，Ｇｌｕ，Ａｌａ，Ｖａｌ，Ｍｅｔ，磷酸根，或焦磷酸根，其中所述猫尿氨酸衍生物的存在指示干扰类固醇代谢的物质，所述猫尿氨酸衍生物的不存在指示不干扰类固醇代谢的物质。　－其中确定干扰法呢二磷酸产生的程度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗兰克迪耶泰勒，格茨施洛特贝克，汉斯森，劳拉苏特迪克，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]