一种双酚A的酶联免疫检测方法技术

一种双酚Ａ的酶联免疫检测方法，属于免疫检测技术领域。本发明专利技术利用合成的双酚Ａ免疫原免疫得到多克隆抗体，以双酚Ａ为标准品，以双酚酸半抗原与ＯＶＡ的偶联物作为包被抗原，建立双酚Ａ的间接竞争酶联免疫检测方法。本发明专利技术建立了双酚Ａ的间接竞争ＥＬＩＳＡ方法，为双酚Ａ的残留检测提供了一种快速高效的检测方法，由于采用的是多克隆抗体，费用较低且稳定性和重复性好。灵敏度为０．１ｎｇ／ｍｌ，线性范围为０～１００ｎｇ／ｍｌ。免疫反应的高特异性和亲和性使ＥＬＩＳＡ具有极高的选择性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种烷基酚残留检测方法，更具体的说是对双酚A的一种酶联 免疫检测方法，属于免疫检测

技术介绍
双酚A(BisphenolA， BPA)是近几年从食品包装材料中新发现的一种"破坏 内分泌化学物质(Endocrine Disrupting Chemicals, ECD)"，具有某些雌激素特性。 BPA的发现引起了各国对食品及包装材料的广泛关注，己相继有从蔬菜罐头、 婴儿用调制液、食品罐等检出BPA的报道。BPA是生产PC树脂及环氧(EP)树 脂的主要原料，又用于酚醛树脂、可塑性聚酯、抗氧剂及聚氯乙烯(PVC)稳定剂 等。因此，在食品包装材料、容器内壁涂料等方面有着重要的用途。在职业生 产和日常生活中，BPA可通过皮肤、呼吸道、消化道等途径进入人体，BPA对皮 肤、呼吸道、消化道和角膜均有中等强度刺激性。人类主要通过食用含有BPA 材料包装的食物，使用婴儿奶瓶，牙科填充物和密封罐等摄入BPA。双酚A是一 种弱雌性激素，对雄性生殖系统有一定的损害，具有内分泌干扰物作用，可能 会引起性早熟，对胚胎也会有一定影响。BPA在低剂量时即具有DNA氧化损伤 作用。BPA能诱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种双酚Ａ的酶联免疫检测方法，其特征在于利用合成的双酚Ａ免疫原免疫得到多克隆抗体，以双酚Ａ为标准品，以双酚酸半抗原与ＯＶＡ的偶联物作为包被抗原，建立双酚Ａ的间接竞争酶联免疫检测方法；步骤如下：　（１）以０．０５Ｍ的碳酸盐缓冲溶液稀释包 被抗原１∶５０００～１∶８０００，加入酶标板中，每孔１００μＬ，４℃孵育过夜，然后用含０．１％明胶的上述碳酸盐缓冲液作为封闭液，封闭２ｈ；　（２）将系列浓度梯度的双酚Ａ标准品、及处理好的样品，分别加入到各自的酶标孔中，每孔５０μＬ；将 多克隆抗体以抗体稀释液以１∶６０００～１∶９０００的比例稀释，然后每孔加入５０μＬ稀释后的多克隆抗体；３７℃...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胥传来，李灼坤，马伟，徐丽广，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]