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一种邻苯二甲酸二异辛酯的酶联免疫检测方法技术

技术编号:2619984 阅读:254 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种邻苯二甲酸二异辛酯的酶联免疫检测方法,属于免疫检测技术领域。本发明专利技术利用合成的邻苯二甲酸二异辛酯免疫原免疫得到多克隆抗体,以邻苯二甲酸二异辛酯为标准品,以邻苯二甲酸二异辛酯半抗原与OVA的偶联物作为包被抗原,建立了邻苯二甲酸二异辛酯的间接竞争酶联免疫分析方法。本发明专利技术建立了邻苯二甲酸二异辛酯的间接ELISA方法,为邻苯二甲酸二异辛酯的残留检测提供了一种快速高效的检测方法,由于采用的是多克隆抗体,费用较低且稳定性和重复性好。灵敏度为0.085ng/mL,线性范围为0.1~25ng/mL。免疫反应的高特异性和亲和性使ELISA具有极高的选择性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种酞酸酯残留检测方法,具体的说是对邻苯二甲酸二异辛酯 的一种酶联免疫检测方法,属于免疫检测

技术介绍
邻苯二甲酸二异辛酯(Diethylhexylphthalate, DEHP )是酞酸酯的一种。酞酸 酯作为增塑剂在塑料的加工生产中尤其是聚氯乙烯(PVC)的加工生产中被广泛 的使用。由于酞酸酯增塑剂与塑料基质之间没有形成共价键,而是以氢键和范 德华力连接,彼此保持各自独立的化学性质,因而在接触到包装食品中所含的 水、油脂时便会溶出。经过研究发现酞酸酯是一种环境激素物质,它干扰生物 为保持体内平衡并调节生长过程的正常激素的产生、释放、转移、代谢、反应 和消除,或在未受损的生物后代中引起不良的健康影响和内分泌功能的改变。 邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯,又称邻苯二甲酸二异辛酯,是邻苯二甲酸酯类 增塑剂中用量最大的一种,应用广泛,在塑料中的含量可达60%。目前,国内 外有关邻苯二甲酸二异辛酯的检测主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法 (GC)、气-质联用法(GC-MS)、液-质联用法(LC-MS)等,但这些方法不仅需要昂 贵的仪器设备,专业的操作人员,本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种邻苯二甲酸二异辛酯的酶联免疫检测方法,其特征在于利用合成的邻苯二甲酸二异辛酯免疫原免疫得到多克隆抗体,以邻苯二甲酸二异辛酯为标准品,以邻苯二甲酸二异辛酯半抗原与OVA的偶联物作为包被抗原,建立动物性食品中的邻苯二甲酸二异辛酯的间接竞争酶联免疫方法;步骤如下: (1)以0.05M的碳酸盐缓冲溶液将包被抗原以1∶5000~1∶8000进行稀释,加入酶标板中,每孔加100μL,4℃孵育过夜,然后用含0.1%明胶的上述碳酸盐缓冲液200μL/孔作为封闭液,封闭2h;  (2)将0.01,0.1,0.5,1,5,10,20ng/mL系列浓度梯度的邻苯二甲酸二异辛酯标准品或处理好...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:胥传来徐丽广马伟李灼坤
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:32[中国|江苏]

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