一种邻苯二甲酸二辛酯的酶联免疫检测方法技术

一种邻苯二甲酸二辛酯的酶联免疫检测方法，属于免疫检测技术领域。本发明专利技术利用合成的邻苯二甲酸二辛酯免疫原免疫得到多克隆抗体，以邻苯二甲酸二辛酯为标准品，以邻苯二甲酸二辛酯半抗原与ＯＶＡ的偶联物作为包被抗原，建立了邻苯二甲酸二辛酯的间接竞争酶联免疫分析方法。本发明专利技术建立了邻苯二甲酸二辛酯的间接竞争ＥＬＩＳＡ方法，为邻苯二甲酸二辛酯的残留检测提供了一种快速高效的检测方法，由于采用的是多克隆抗体，费用较低且稳定性和重复性好。灵敏度为０．０１ｎｇ／ｍＬ，线性范围为０．１－１９ｎｇ／ｍＬ。免疫反应的高特异性和亲和性使ＥＬＩＳＡ具有极高的选择性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种酞酸酯残留检测方法，具体的说是对邻苯二甲酸二辛酯的 一种酶联免疫检测方法，属于免疫检测

技术介绍
邻苯二甲酸二辛酯(Dioctylphthalate， DOP)是酞酸酯的一种。酞酸酯作为增 塑剂在塑料的加工生产中尤其是聚氯乙烯(PVC)的加工生产中被广泛的使用。由 于酞酸酯增塑剂与塑料基质之间没有形成共价键，而是以氢键和范德华力连接， 彼此保持各自独立的化学性质，因而在接触到包装食品中所含的水、油脂时， 便会溶出。经过研究发现，酞酸酯是一种环境激素物质，它干扰生物为保持体 内平衡并调节生长过程的正常激素的产生、释放、转移、代谢、反应和消除， 或在未受损的生物后代中引起不良的健康影响和内分泌功能的改变。美国环保 局将六种酞酸酯列入重点控制的污染物名单中，我国优先污染物黑名单中包括 邻苯二甲酸二辛酯。目前，国内外有关邻苯二甲酸二辛酯的检测主要采用高效 液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、气-质联用法(GC-MS)、液-质联用法(LC -MS)等，这些方法虽然灵敏但其需要昂贵的仪器设备，专业的操作人员，对检 材的要求也比较高，并且需要进一步的样本前处本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种邻苯二甲酸二辛酯的酶联免疫检测方法，其特征在于步骤如下：　（１）抗原的包被　以邻苯二甲酸二辛酯半抗原与卵清蛋白ＯＶＡ的偶联物作为包被抗原，以０．０５Ｍ、ｐＨ９．６的碳酸盐缓冲溶液将包被抗原以１∶５０００～１∶８０００进行稀释 ，作为包被液，在酶标板的每孔中加入１００μＬ，４℃孵育过夜，然后用含０．１％明胶的上述碳酸盐缓冲液２００μＬ／孔作为封闭液，封闭２ｈ；　（２）竞争反应　每孔分别加入以标准品稀释液ＰＢＳＴ稀释的０．０１ｎｇ／ｍＬ、０．１ｎｇ／ｍＬ 、０．５ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ系列浓度之一的邻苯...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胥传来，徐丽广，马伟，李灼坤，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]