一种无血清细胞冻存液、制备方法及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种无血清细胞冻存液、制备方法及其使用方法，涉及生物医药技术领域。本发明专利技术无血清细胞冻存液包括如下组份：聚乙二醇4～6g/100mL，海藻糖0.5～2.5g/100mL，葡萄糖2～3g/100mL，全反式维甲酸0.5～1.5mg/100mL及少量抗坏血酸0.5mg/100ml，溶剂为无血清基础培养基，最终PH为6.8～7.4；使用方法包括消化、冻存、复苏。本发明专利技术细胞冻存液是成分明确、不含外源血清和有机溶剂，避免外源蛋白污染，同时可不采用程序降温，直接冻存于‑80℃；能有效地保护干细胞活性，维持并保证细胞冻融之后活性不丢失；本发明专利技术冻存方法，复苏时减少细胞吸水涨破的风险，保证细胞活性。

【技术实现步骤摘要】
一种无血清细胞冻存液、制备方法及其使用方法
本专利技术属于生物医药
，特别是涉及一种无血清细胞冻存液、一种无血清细胞冻存液的制备方法以及一种无血清细胞冻存液的使用方法。
技术介绍
随着生物及细胞类制剂的增多，细胞在越来越多方面应用，而细胞的存放往往限制了细胞的应用。在细胞培养过程中随着传代次数的增加，细胞的各种生物特性都会逐渐发生变化。因此原代细胞或细胞种子的及时保存就显得尤为必要。除此之外，购买、交换和运送某些细胞也需要利用细胞冻存的形式来进行。因此，及时方便地进行细胞的冻存在实际工作中显得十分必要。目前，最成熟和最稳定的冻存细胞技术是将加有保护剂的细胞悬液置于-196℃液氮中，这样可以使细胞暂时脱离生长状态而保持细胞的特性，在需要的时候经过复苏程序，使得细胞重新生长增殖以用于实验。关于细胞冻存损伤的现象，研究提出了两因素假说：冰晶损伤假说和溶液损伤假说。两种假说归结于“溶质损伤”和“胞内冰损伤”两大原因，现有冻存液也是基于此来设计冻存液及降温速率。因此，目前细胞冻存及复苏的基本原则普遍遵循的是慢冻快融的方式，实践证明这本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无血清细胞冻存液，其特征在于，包括如下组份：/n聚乙二醇4～6g/100mL，海藻糖0.5～2.5g/100mL，葡萄糖2～3g/100mL，全反式维甲酸0.5～1.5mg/100mL及少量抗坏血酸0.5mg/100ml，溶剂为无血清基础培养基，最终PH为6.8～7.4。/n

【技术特征摘要】
1.一种无血清细胞冻存液，其特征在于，包括如下组份：
聚乙二醇4～6g/100mL，海藻糖0.5～2.5g/100mL，葡萄糖2～3g/100mL，全反式维甲酸0.5～1.5mg/100mL及少量抗坏血酸0.5mg/100ml，溶剂为无血清基础培养基，最终PH为6.8～7.4。


2.如权利要求1所述的一种无血清细胞冻存液的制备方法，其特征在于，具体配置方法包括如下步骤(以100ml为例)：
S01、称取5g上述浓度的聚乙二醇溶解于80ml基础培养基中；
S02、加入2g上述浓度的海藻糖，搅拌使其溶解；
S03、加入2.5g上述浓度的葡萄糖，搅拌使其溶解；
S04、加入1mg上述浓度的全反式维甲酸，搅...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴军，黄人卉，于树祥，
申请(专利权)人：上海雅酶生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31