一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，涉及愈伤组织培养技术领域，包括以下步骤：步骤A：三七愈伤组织的准备；步骤B：液体培养基制作；步骤C：纸桥培养。该三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，通过本配方配置的液体培养基，搭配培养三七愈伤组织的纸桥，通过该种培养方法，使三七愈伤组织能够快速持续的吸收液体培养基内的培养液，使愈伤组织营养吸收稳定均衡且高效，以达到培养三七愈伤组织快速扩繁的效果，通过2,4‑D、6‑BA、NNA和IBA四种激素组成液体培养基，使三七愈伤组织生长稳定性更强，且涨势速度快，愈伤组织健康，生长态势更加优异。

【技术实现步骤摘要】
一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法
本专利技术涉及愈伤组织培养
，具体为一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法。
技术介绍
三七为五加科植物，主产于云南文山州，故名文山三七。味甘，味苦，性温，有止血止痛，活血化瘀的功效，三七主根呈类圆锥形或圆柱形。表面灰褐色或灰黄色，有断续的纵皱纹和支根痕；顶端有茎痕，周围有瘤状突起；体重，质坚实，断面灰绿色、黄绿色或灰白色，木部微呈放射状排列；筋条呈圆柱形或圆锥形；剪口呈不规则的皱缩块状或条状，表面有数个明显的茎痕及环纹，断面中心灰绿色或白色，边缘深绿色或灰色。三七有“止血神药”之称，散瘀血，止血而不留瘀，对出血兼有瘀滞者更为适宜。三七具有较强的止血作用，对不同动物，不同给药途径，不同制剂，均显示明显止血作用；三七具有活血散瘀功效，能抗血小板聚集，抗血栓形成；三七“祛瘀生新”，现代研究证实三七具有补血作用；三七注射液可显著促进红细胞、网织红细胞、血红蛋白的恢复，市场供不应求。通过愈伤组织培养技术，能快速对三七种苗进行培育繁殖，以达到高效栽培利用三七的目的。在中国专利技术专利申请号：CN201810872944.6中公开有一种快速扩繁三七愈伤组织的培养体系和培养方法，该快速扩繁三七愈伤组织的培养体系和培养方法，虽然在实际对三七愈伤组织进行培养扩繁时，培养液对三七愈伤组织的供给不够均衡稳定，三七愈伤组织的整体营养吸收效率低，生长周期仍较长，无法达到培养三七愈伤组织快速扩繁的效果。因此，提出一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法来解决上述问题很有必要。
技术实现思路
（一）解决的技术问题本专利技术的目的在于提供一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，以解决上述
技术介绍
中提出的现有的三七愈伤组织培养扩繁技术中，培养液对三七愈伤组织的供给不够均衡稳定，三七愈伤组织的整体营养吸收效率低，生长周期仍较长，无法达到培养三七愈伤组织快速扩繁效果的问题。（二）技术方案为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，包括以下步骤：A：三七愈伤组织的准备，选取由一年生健康三七诱导出来的三七绿色胚性愈伤组织；B：液体培养基制作，液体培养基由2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成；C：纸桥培养，三七绿色胚性愈伤组织通过液体培养基纸桥培养，纸桥为手工折叠的滤纸纸桥，将滤纸纸桥放入液体培养基内，通过纸桥吸收液体培养基，并将愈伤棚起于纸桥上部，且不使愈伤组织淹没于液体中，使愈伤组织快速吸收液体培养基而快速生长。可选的，所述步骤C中，培养温度为20-28℃，弱光培养亮度300-500Lx。可选的，所述液体培养基2,4-D、6-BA、NNA、IBA的质量浓度比为0.5-1.5：0.5-1.5：0.05-0.2：0.1-1。可选的，所述液体培养基，2,4-D浓度为0.5mg/L、6-BA浓度为0.5mg/L、NNA浓度为0.05mg/L、IBA浓度为0.1mg/L。可选的，所述液体培养基，2,4-D浓度为1.2mg/L、6-BA浓度为1.2mg/L、NNA浓度为0.15mg/L、IBA浓度为0.8mg/L。可选的，所述液体培养基，2,4-D浓度为1mg/L、6-BA浓度为1mg/L、NNA浓度为0.1mg/L、IBA浓度为0.5mg/L。可选的，所述液体培养基为添加2,4-D、6-BA、NNA和IBA的1/2MS培养基。可选的，所述液体培养基的PH为5-7。（三）有益效果与现有技术相比，本专利技术提供了一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，具备以下有益效果：1、该三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，通过本配方配置的液体培养基，搭配培养三七愈伤组织的纸桥，通过该种培养方法，使三七愈伤组织能够快速持续的吸收液体培养基内的培养液，使愈伤组织营养吸收稳定均衡且高效，以达到培养三七愈伤组织快速扩繁的效果。2、该三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，本专利技术通过2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成液体培养基，使三七愈伤组织生长稳定性更强，且涨势速度快，愈伤组织健康，生长态势更加优异。附图说明图1为固体培养基三七绿色胚性愈伤组织扩繁（2周）生长图片；图2为本专利技术液体纸桥三七绿色胚性愈伤组织扩繁（2周）生长图片。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的解释说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本专利技术的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本专利技术的宗旨和精神的情况下，可以对本专利技术进行各种修改和替换。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。实施例1一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，包括以下步骤：A：三七愈伤组织的准备，选取由一年生健康三七诱导出来的三七绿色胚性愈伤组织；B：液体培养基制作，液体培养基由2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成，2,4-D浓度为0.5mg/L、6-BA浓度为0.5mg/L、NNA浓度为0.05mg/L、IBA浓度为0.1mg/L，液体培养基的PH为5；C：纸桥培养，三七绿色胚性愈伤组织通过液体培养基纸桥培养，纸桥为手工折叠的滤纸纸桥，将滤纸纸桥放入液体培养基内，通过纸桥吸收液体培养基，并将愈伤棚起于纸桥上部，且不使愈伤组织淹没于液体中，使愈伤组织快速吸收液体培养基而快速生长，培养温度为20℃，弱光培养亮度300Lx。实施例2：一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，包括以下步骤：A：三七愈伤组织的准备，选取由一年生健康三七诱导出来的绿色胚性愈伤组织；B：液体培养基制作，液体培养基由2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成，2,4-D浓度为1.2mg/L、6-BA浓度为1.2mg/L、NNA浓度为0.15mg/L、IBA浓度为0.8mg/L，液体培养基的PH为7；C：纸桥培养，三七绿色胚性愈伤组织通过液体培养基纸桥培养，纸桥为手工折叠的滤纸纸桥，将滤纸纸桥放入液体培养基内，通过纸桥吸收液体培养基，并将愈伤棚起于纸桥上部，且不使愈伤组织淹没于液体中，使愈伤组织快速吸收液体培养基而快速生长，培养温度为28℃，弱光培养亮度为400Lx。实施例3：一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，包括以下步骤：A：三七愈伤组织的准备，选取由一年生健康三七诱导出来的绿色胚性愈伤组织；B：液体培养基制作，液体培养基由2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成，2,4-D浓度为1mg/L、6-BA浓度为1mg/L、NNA浓度为0.1mg/L、IBA浓度为0.5mg/L，液体培养基的PH为5.8；C：纸桥培养，三七绿色胚性愈伤组织通过液体培养基纸桥培养，纸桥为手工折叠的滤纸纸桥，将滤纸纸桥放入液体培养基内，通过纸桥吸收液体培养基，并将愈伤棚起于纸桥上部，且不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，其特征在于包括以下步骤：/nA、三七愈伤组织的准备，选取由一年生健康三七诱导出来的三七绿色胚性愈伤组织；/nB、液体培养基制作，液体培养基由2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成；/nC、纸桥培养，三七绿色胚性愈伤组织通过液体培养基纸桥培养，纸桥为手工折叠的滤纸纸桥，将滤纸纸桥放入液体培养基内，通过纸桥吸收液体培养基，并将愈伤棚起于纸桥上部，且不使愈伤组织淹没于液体中，使愈伤组织快速吸收液体培养基而快速生长。/n

【技术特征摘要】
1.一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，其特征在于包括以下步骤：
A、三七愈伤组织的准备，选取由一年生健康三七诱导出来的三七绿色胚性愈伤组织；
B、液体培养基制作，液体培养基由2,4-D、6-BA、NNA和IBA四种激素组成；
C、纸桥培养，三七绿色胚性愈伤组织通过液体培养基纸桥培养，纸桥为手工折叠的滤纸纸桥，将滤纸纸桥放入液体培养基内，通过纸桥吸收液体培养基，并将愈伤棚起于纸桥上部，且不使愈伤组织淹没于液体中，使愈伤组织快速吸收液体培养基而快速生长。


2.根据权利要求1所述的一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，其特征在于：所述步骤C中，培养温度为20-28℃，弱光培养亮度300-500Lx。


3.根据权利要求1所述的一种三七绿色胚性愈伤组织扩繁的培养方法，其特征在于：所述液体培养基2,4-D、6-BA、NNA、IBA的质量浓度比为0.5-1.5：0.5-1.5：0.05-0.2：0.1-1。


4.根据权利要求3所述的一种三七绿色胚性...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯垒，杨生超，张广辉，马春花，刘冠泽，和四梅，查明思，谢业翠，张双艳，闫静，向贵生，郭兆宽，李满桥，张家琪，徐文娟，朱金玉，韩堂珍，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：云南;53