一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术涉及一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒和检测方法，属于水质检测领域，所述试剂盒包括溴化N‑十二烷基异喹啉试剂、副溶血弧菌烈性噬菌体悬液和不同浓度梯度的副溶血弧菌菌悬液。利用所述试剂盒进行检测水体中副溶血弧菌的方法为将待检测水样装在检测管中，加入专用烈性噬菌体，能够特异性、快速地裂解其中的副溶血弧菌，生成多种小分子和离子，从而引起σ数值增加。由于σ增量与给检测管所装水体中副溶血弧菌的数量成正比，所以测定Δσ即可计算出待测水体样品中副溶血弧菌的定量信息。该方法可以在养殖现场快速确定含有多种微生物的复杂水体中副溶血弧菌的量，为渔业生产管理提供高时效性、准确的支撑数据。

A field detection kit and method for Vibrio parahaemolyticus in water

【技术实现步骤摘要】
一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒和检测方法
：本专利技术属于水质检测领域，具体地涉及一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒和检测方法。
技术介绍
：副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)属于革兰氏阴性菌，嗜盐，广泛存在于渔业环境和水生生物体中，检测水体中副溶血弧菌的常用方法主要是基于富集培养-分离培养-生化反应的国家标准(GB4789.7-2013)方法。该方法虽然是金标准，但操作复杂、劳动强度大、周期长，精确性严重依赖操作者的专业水平，因而无法实现现场、快速、精确测定。近年来，基于基因检测的分子生物学方法(黄梦诗，杨倩倩，张艳，谷阳光，赵俊，张旭志，丁东生，曲克明.海水中副溶血弧菌的可视化LAMP快速检测方法.中国渔业质量与标准，2017,7(6),58-65)和免疫学检测方法(李欣彤.上海地区海产品中副溶血弧菌的分离鉴定、分子分型及tdh基因的克隆表达[硕士毕业论文]；南京农业大学,2013)得到了快速发展，明显提高了副溶血弧菌的检测效率。然而，新方法囿于贵重仪器和专业分析场所，目前仍然不能实现副溶血弧菌的现场、快速、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括溴化N-十二烷基异喹啉试剂、副溶血弧菌烈性噬菌体悬液和浓度梯度为10

【技术特征摘要】
1.一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括溴化N-十二烷基异喹啉试剂、副溶血弧菌烈性噬菌体悬液和浓度梯度为1011、1010、109、108、107、106和105CFU/ml副溶血弧菌的菌悬液。


2.利用权利要求1所述试剂盒检测水体中副溶血弧菌的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：
1)取待测水体，平均分成两份，分别装入SA和SB两个离心管；其中SA加入溴化N-十二烷基异喹啉，在便携式超声波仪中超声5min，超声功率30W，使水体中所有种类的细菌完全裂解，制成阴性对照液S阴；
2)取一定量S阴液，加入已知浓度的副溶血弧菌菌悬液，制成含有106CFU/ml副溶血弧菌的阳性对照液S阳；
3)取相同体积的SB、S阴和阳S阳，SB即待测样S测，分别装入检测管T测、T阴和T阳,然后再分别加入等量副溶血弧菌烈性噬菌体悬液，混匀；
4)将检测管T测、T阴和T阳同时、分别放入化学和生物过程在线监测系统的三个检测通道中，分别记录三个检测管中被测液的初始电容耦合非接触电导响应值σ测初、σ阴初和σ阳初；静止30min后，再分别记录三个检测管中被测液的终点电容耦合非接触电导响应值σ测终、σ阴终和σ阳终；
5)根据下面公式分别计算S测、S阴和S阳的电容耦合非接触电导响应变化值：
Δσ测＝σ测终-σ测初
Δσ阴＝σ阴终-σ阴初
Δσ阳＝σ阳终-σ阳初
6)将Δσ测数值带入工作曲线函数关系式获得待测水体中副溶血弧菌的浓度；根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲克明，张旭志，朱建新，徐勇，张艳，杨倩倩，闫华，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院黄海水产研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37