基于CRISPR技术的核酸检测的信号放大磁珠技术系统及其应用技术方案

本发明专利技术公开了一种报告磁珠，所述报告磁珠包括磁珠、核苷酸和高催化活性的酶相链接。本发明专利技术还公开了基于CRISPR技术的核酸检测的信号放大磁珠技术系统，本发明专利技术还公开报告磁珠的构建方法以及应用。本发明专利技术通过引入报告磁珠，将信号放大磁珠技术系统的灵敏度从aM（1000‑10000 copies/mL）浓度级别提高到zM（1‑10 copies/mL）浓度级别。

【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR技术的核酸检测的信号放大磁珠技术系统及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及基于CRISPR技术的核酸检测的信号放大磁珠技术系统及其应用。
技术介绍
CRISPR核酸检测技术可以用于植物、动物、微生物、病毒等来源的DNA或RNA分子的检测。目前用于CRISPR核酸检测的蛋白有Cas13a、Cas12a、Cas14、Cas12b、Cas13b、Csm6等具有旁路核酸切割活性的Cas蛋白。Cas13a蛋白分子：识别特异性的单链RNA分子，激活旁路核酸切割活性，非特异性地切割任意单链RNA分子。crRNA核酸分子可以和Cas13a蛋白分子结合，形成crRNA-Cas13a复合体。当crRNA核酸分子与目标RNA分子匹配时，Cas13a会对目标RNA进行特异性切割，并因此而激活Cas13a的旁路核酸切割活性，对所遇到的任意单链RNA分子进行高效的非特异性切割。一个目标RNA分子可以激活一个Cas13a蛋白，激活后的Cas13a蛋白可以切割大量的任意单链RNA分子。利用Cas13a蛋白的这个特点可以用于特异性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种报告磁珠，其特征在于，所述报告磁珠包括磁珠、核苷酸和高催化活性的酶相连接。/n

【技术特征摘要】
1.一种报告磁珠，其特征在于，所述报告磁珠包括磁珠、核苷酸和高催化活性的酶相连接。


2.根据权利要求1所述的报告磁珠，其特征在于，所述核苷酸为单链DNA、双链DNA或单链RNA中的一种或几种。


3.根据权利要求1所述的报告磁珠，其特征在于，所述核苷酸为生物素连接的ssDNA。


4.根据权利要求1所述的报告磁珠，其特征在于，所述高催化活性的酶为β-Gal酶、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、羧酸酯水解酶、糖苷水解酶、蛋白酶、酪氨酸酶、单胺氧化酶、硝基还原酶、硫氧还蛋白还原酶、γ-谷氨酰转移酶中的一种。


5.权利要求1~4任一项所述的报告磁珠的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将磁珠与核苷酸通过共价键方式链接得到核苷酸-磁珠，通过链霉亲和素和生物素将高催化活性的酶和核苷酸-磁珠链接。


6.基于CRISPR技术的核酸检测的信号放大磁珠技术系统，其特征在于，所述信号放大磁珠技术系统包含权利要求1~4任一项所述的报告磁珠。


7.权利要求1~4任一项所述的报告磁珠或权利要求6所述的信号放大磁珠技术系统在制备核酸检测试剂或试剂盒中的应用。


8.一种核酸检测试剂盒，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑敦武，
申请(专利权)人：苏州顶点生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32