定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的诱导培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的诱导培养基。本发明专利技术方法包括分阶段培养所述hiPSC诱导其神经分化，所述阶段包括：阶段a.共培养所述hiPSC与骨髓基质细胞HS5于诱导培养基；阶段b.用HS5条件培养基连续培养所述hiPSC；阶段c.用培养神经元细胞的基础培养基继续培养所述hiPSC。本发明专利技术的方法诱导人类hiPSC细胞定向分化为神经系统细胞，同时抑制非神经系统细胞的生成，从而获得成熟、广谱的神经细胞群。该神经细胞群不仅经过体外验证为具有电冲动发放的成熟神经元，而且这类神经细胞群在小鼠体内实验中也被证实，具有有效的治疗神经系统疾病(如脑卒中、脑损伤)的作用。

【技术实现步骤摘要】
定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的诱导培养基本申请是申请日为2017年07月28日申请号为201710632172.4、专利技术创造名称为“定向诱导hiPSC分化后的神经细胞体系、诱导方法及应用”的专利申请的分案申请。
本专利技术属于神经生物学领域，具体涉及定向诱导hiPSC分化后的神经细胞体系、诱导方法及应用。
技术介绍
人诱导多能干细胞(humaninducedpluripotentstemcells,hiPSC)来源的神经细胞对于细胞移植治疗缺血性脑卒中(以多种不同种系的神经细胞严重缺失为特点)具有显著效应。然而，现有的诱导hiPSC细胞分化为神经细胞的操作效率低，稳定性差。干细胞生物学的最新研究进展为再生医学提供了依据，其中hiPSC细胞的定向分化可以为细胞移植治疗缺血性脑卒中(以各种神经元和神经胶质细胞的严重缺损为特性)患者提供了多种人类神经细胞。有效地诱导、纯化和植入人类神经细胞是建立以hiPSC细胞为基础的神经细胞疗法所必需的。许多有关高效分化神经细胞的方法草案已被提出。然而，这些方法不足以提供成熟的神经细胞谱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的诱导培养基，其特征在于，所述诱导培养基为包括下述组分：20-25％血清替代品、0.5-1.5mM的谷氨酰胺、8-20ng/ml表皮生长因子、8-12ng/ml脑源性神经营养因子、8-15ng/ml神经营养因子-3、0.5-1.5ng/ml转化生长因子β3、400～700ng/ml头蛋白以及2-3％B27添加剂的DMEM/F12培养基，所述百分比为体积百分比。/n

【技术特征摘要】
1.一种定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的诱导培养基，其特征在于，所述诱导培养基为包括下述组分：20-25％血清替代品、0.5-1.5mM的谷氨酰胺、8-20ng/ml表皮生长因子、8-12ng/ml脑源性神经营养因子、8-15ng/ml神经营养因子-3、0.5-1.5ng/ml转化生长因子β3、400～700ng/ml头蛋白以及2-3％B27添加剂的DMEM/F12培养基，所述百分比为体积百分比。


2.如权利要求1所述的诱导培养基，其特征在于，所述培养基还包括1-1.5％非必需氨基酸、8-15ng/ml碱性成纤维细胞生长因子、0.08-0.15mMβ-巯基乙醇以及0.3-0.8mM双丁酰环磷...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨涛，隋昳，
申请(专利权)人：杨涛，
类型：发明
国别省市：上海;31