与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1及其应用制造技术

本发明专利技术属于肿瘤生物诊断技术领域，具体公开了一种与人结直肠癌相关的分子标记物RAN Binding Protein 1（RANBP1）及其应用。所述分子标记物RANBP1的氨基酸序列如SEQ NO.1所示，扩增所述分子标记物RANBP1的引物为RANBP1‑F与RANBP1‑R（具体序列见后）。通过研究表明，RANBP1表达水平升高可以作为诊断结直肠癌发生及预后的生物标记物,其抗体可用于结直肠癌诊断试剂盒的使用。

【技术实现步骤摘要】
与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1及其应用
本专利技术属于肿瘤生物诊断
，涉及一种与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1及其应用。
技术介绍
结直肠癌(colorectalcancer，CRC)是全球范围内发病率和致死率都极高的恶性肿瘤之一。据统计结直肠肿瘤患者死亡人数占全球因肿瘤死亡总人数的9％以上。近年来，结直肠癌在我国发病率也逐渐增高，2015年的数据统计显示，结直肠癌在男性中发病率高达10.13％，位于常见恶性肿瘤第四位，而在女性中其发病率仅次于乳腺癌和肺癌，为9.25％。同时，结直肠癌潜伏期长，且常在潜伏期内无症状出现，因此，早期筛查诊断结直肠癌具有重要的意义，对患者治疗及生存至关重要。目前，CRC的筛查过程主要包括粪便隐血测试(FOBT)，粪便免疫化学试验(FIT)，软乙状结肠镜等方式，这些方法已被证明能够有效降低结直肠癌死亡率。虽然这些检测方便快捷，对病人无伤害，病人依从性高，但存在定位差,特异性差的缺陷，所以我们旨在开发新的分子标记物，提高结直肠癌患者的早期筛查率，从而提升结直肠患者的生存率。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种与人结直肠癌相关的分子标记物RANBindingProtein1(RANBP1)及其应用，通过研究证明在人结直肠癌组织中RANBP1蛋白的表达明显高于正常结直肠组织，且与不良预后相关。具体讲，RANBP1表达水平升高可以作为诊断结直肠癌发生及预后的生物标记物,其抗体可用于结直肠癌诊断试剂盒的使用。一种与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1，其特征在于，所述分子标记物RANBP1的氨基酸序列如SEQNO.1所示。SEQNO.1：MAAAKDTHEDHDTSTENTDESNHDPQFEPIVSLPEQEIKTLEEDEEELFKMRAKLFRFASENDLPEWKERGTGDVKLLKHKEKGAIRLLMRRDKTLKICANHYITPMMELKPNAGSDRAWVWNTHADFADECPKPELLAIRFLNAENAQKFKTKFEECRKEIEEREKKAGSGKNDHAEKVAEKLEALSVKEETKEDAEEKQ一种核酸分子，编码上述分子标记物RANBP1的核苷酸序列(cDNA序列)如SEQNO.2所示。SEQNO.2：GCCGGCGCCAGACGCGGAGGGAAGGAGCTACGAGTAGCCGCCGAGAGGCCGCGGAGCCAGCGACGACCGACCCAGCCGAGCCGCCGCCGCCGCCGCGCCCCCATGGCGGCCGCCAAGGACACTCATGAGGACCATGATACTTCCACTGAGAATACAGACGAGTCCAACCATGACCCTCAGTTTGAGCCAATAGTTTCTCTTCCTGAGCAAGAAATTAAAACACTGGAAGAAGATGAAGAGGAACTTTTTAAAATGCGGGCAAAACTGTTCCGATTTGCCTCTGAGAACGATCTCCCAGAATGGAAGGAGCGAGGCACTGGTGACGTCAAGCTCCTGAAGCACAAGGAGAAAGGGGCCATCCGCCTCCTCATGCGGAGGGACAAGACCCTGAAGATCTGTGCCAACCACTACATCACGCCGATGATGGAGCTGAAGCCCAACGCAGGTAGCGACCGTGCCTGGGTCTGGAACACCCACGCTGACTTCGCCGACGAGTGCCCCAAGCCAGAGCTGCTGGCCATCCGCTTCCTGAATGCTGAGAATGCACAGAAATTCAAAACAAAGTTTGAAGAATGCAGGAAAGAGATCGAAGAGAGAGAAAAGAAAGCAGGATCAGGCAAAAATGATCATGCCGAAAAAGTGGCGGAAAAGCTAGAAGCTCTCTCGGTGAAGGAGGAGACCAAGGAGGATGCTGAGGAGAAGCAATAAATCGTCTTATTTTATTTTCTTTTCCTCTCTTTCCTTTCCTTTTTTTAAAAAATTTTACCCTGCCCCTCTTTTTCGGTTTGTTTTTATTCTTTCATTTTTACAAGGGACGTTATATAAAGAACTGAACTC一种用于检测与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1的扩增引物，扩增权利要求1所述的标记物RANBP1的引物为：RANBP1-F：5’-GCCATCCGCTTCCTGAATG-3’RANBP1-R:5’-TCTCTCTTCGATCTCTTTCCTGC-3’上述与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1在制备结直肠癌诊断、预后评估、或治疗及辅助治疗的相关产品上的应用。作为改进的是，所述相关产品为检测试剂。作为改进的是，所述检测试剂权利要求1所述的含有分子标记物RANBP1。作为改进的是，所述检测试剂含有抗体，所述抗体特异性结合分子标记物RANBP1，检测方法为免疫组织化学法。进一步改进的是，所述抗体为单克隆抗体或者多克隆抗体。作为改进的是，所述检测实际包含上述的扩增引物。进一步改进的是，所述检测试剂使用的检测方法为qRT-PCR法。一种检测试剂盒，所述试剂盒包含上述的检测试剂，所述检测试剂含有抗体或扩增引物。有益效果：与现有技术相比，本专利技术一种与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1及其应用，具有如下优势：该分子标记物在结直肠癌肿瘤组织的表达明显高于相应的正常组织，且其表达量与肿瘤的临床分期呈正相关，与预后，生存率呈负相关，可以作为结直肠癌早期筛查，预后评估指标。附图说明图1为RANBP1基因在TCGA数据库中471例临床结直肠癌组织和41例正常结直肠组织中的表达情况；图2为RANBP1在TCGA数据库中41对临床结直肠癌组织及其对应正常组织中的表达情况；图3为TCGA数据库中，不同RANBP1表达量的临床患者的生存曲线；图4为免疫组织化学实验检测临床结直肠癌患者肿瘤组织(Tumor)及其对应的正常组织中RANBP1表达情况；图5为临床结直肠癌患者肿瘤样本RANBP1免疫组化统计结果；图6为不同临床分期的结直肠癌患者肿瘤组织中RANBP1的表达情况；图7为临床样本中不同RANBP1表达量的结直肠癌患者的生存曲线；图8为RANBP1在正常结直肠上皮细胞及结直肠肿瘤细胞中的表达情况；图9为结直肠癌细胞中用siRNA特异性敲低RANBP1后mRNA水平的表达量，其中，(a)为一种结直肠癌细胞系HCT116的RANBP1敲低后mRNA结果，(b)为一种结直肠癌细胞系RKO的RANBP1敲低后mRNA结果；图10为结直肠癌细胞中用siRNA特异性敲低RANBP1后蛋白水平的表达量，其中，(a)为一种结直肠癌细胞系HCT116的RANBP1敲低后本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1，其特征在于，所述分子标记物RANBP1的氨基酸序列如SEQ NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1，其特征在于，所述分子标记物RANBP1的氨基酸序列如SEQNO.1所示。


2.一种核酸分子，其特征在于，编码权利要求1所述分子标记物RANBP1的核苷酸序列如SEQNO.2所示。


3.一种用于检测与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1的扩增引物，其特征在于，扩增权利要求1所述的标记物RANBP1的引物为：
RANBP1-F：5’-GCCATCCGCTTCCTGAATG-3’，
RANBP1-R:5’-TCTCTCTTCGATCTCTTTCCTGC-3’。


4.基于权利要求1所述的与人结直肠癌相关的分子标记物RANBP1在制备结直肠癌诊断、预后评估、或治疗及辅助治疗的相关产品上的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：袁小琴，左思雨，郑旦旦，沈铭，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32