应用于骨肉瘤细胞成像或治疗的Au DENPs-巨噬细胞复合物制造技术

本发明专利技术公开了一种应用于骨肉瘤的细胞成像以及同时细胞治疗的Au DENPs‑巨噬细胞复合物的制备方法：以第五代树状大分子为模板，将经马来酰亚胺活化的聚乙二醇单甲醚通过化学键间相互作用连接在G5.NH

Au denps macrophage complex for osteosarcoma cell imaging or therapy

【技术实现步骤摘要】
应用于骨肉瘤细胞成像或治疗的AuDENPs-巨噬细胞复合物
本专利技术涉及纳米医学诊疗试剂领域，尤其涉及一种应用于骨肉瘤的细胞成像或细胞治疗的AuDENPs-巨噬细胞复合物及其制备方法。
技术介绍
纳米医学正在逐渐改变癌症治疗方法，并为肿瘤的诊治带来新的希望。比如，某些被动靶向或者主动靶向肿瘤的纳米药物递送系统可以实现药物在机体的准确递送，从而避免对正常组织的毒害作用，延长药物在体内的代谢过程，进而增强药物的疗效。实现肿瘤对于免疫纳米药物的反应成像是设计、开发和应用有效的靶向治疗的关键。为了验证靶标的准确性，必须监测纳米药物在临床相关组织中的分布，最好是使用非侵入性的手段，以确定目标组织的吸收和非目标组织的最低吸收。实现这一目标最直接的方法是对纳米材料进行标记，这样就可以使用成像系统，如MRI(磁共振成像)、CT(计算机断层扫描)在体检测到纳米材料。这样不仅可以确定纳米粒子的生物分布，还可以监测肿瘤对治疗的反应性以及其他相关反应，例如肿瘤的免疫细胞浸润情况。纳米颗粒与周围环境和可能相互作用的细胞类型范围之间可能发生相互作用。例如，纳米颗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种应用于骨肉瘤的细胞成像以及细胞治疗的Au DENPs-巨噬细胞复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)取G5聚酰胺-胺树状大分子加入溶剂中，得到含有G5聚酰胺-胺树状大分子溶液的浓度为3～4mmol/L，然后加入11.8～12.5mg/mL的mPEG-MAL，搅拌反应3d，得到G5.NH

【技术特征摘要】
1.一种应用于骨肉瘤的细胞成像以及细胞治疗的AuDENPs-巨噬细胞复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取G5聚酰胺-胺树状大分子加入溶剂中，得到含有G5聚酰胺-胺树状大分子溶液的浓度为3～4mmol/L，然后加入11.8～12.5mg/mL的mPEG-MAL，搅拌反应3d，得到G5.NH2-mPEG溶液；
(2)用水稀释G5.NH2-mPEG溶液，并加入HAuCl4溶液，剧烈搅拌，获得金/树状大分子混合物，所述HAuCl4溶液与G5.NH2-mPEG的摩尔比为100；
(3)将上述溶液剧烈搅拌30min后，加入24～30mg/mLNaBH4溶液，继续搅拌2h得到[(Au0)100-G5.NH2-mPEG]DENP；
(4)在磁力搅拌下，将三乙胺加入[(Au0)100-G5.NH2-mPEG]DENP中，继续搅拌30min后，加入乙酸酐，反应24h；
(5)将上述混合溶液透析3d以除去过量的反应物，冻干，获得最终产物——AuDENPs；
(6)使用含有10％胎牛血清的DMEM细胞培养基培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞，将AuDENPs加入培养基中，培养12-48h，得到AuDENPs-巨噬细胞复合物。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括：
步骤(7)利用LPS作为阳性对照，进一步使用包括流式、PCR、免疫荧光、ELISA的技术检测AuDENPs-巨噬细胞复合物中M1型巨噬细胞的标志物，判断其极化状态；
步骤(8)将AuDENPs-巨噬细胞复合物与小鼠骨肉瘤K7细胞共同孵育，使用包括流式...

【专利技术属性】
技术研发人员：王悍，尹芳芳，史向阳，范钰，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：上海;31