一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂、制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂、制备方法及其应用，涉及兽用疫苗佐剂领域。一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，按照质量百分含量由如下成分组成：高分子胶束物质15%‑50%，非离子型纤维素醚0.1%‑5%，余量为水。本发明专利技术还提供所述兽用疫苗的一种温敏型水凝胶佐剂的制备方法，具体步骤包括：称取各组分，混合，在2‑10℃溶胀成均一体系，即得温敏型水凝胶佐剂。本发明专利技术温敏型水凝胶佐剂，原材料简单易得，价格低廉，黏度小，副作用小且能显著延长免疫持续期。

【技术实现步骤摘要】
一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂、制备方法及其应用
本专利技术涉及兽用疫苗佐剂领域，具体涉及一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂、制备方法及其应用。
技术介绍
佐剂通常是指能非特异性地增强机体对抗原的特异性免疫应答的物质。根据其作用机制不同，可将佐剂分为两大类：一类是免疫刺激性佐剂，如LPS、细胞因子等，对免疫系统的活性细胞呈现直接刺激或活化作用；另一类是抗原递呈系统(也称为疫苗传递系统，vaccinedeliverysystem,VDS),如铝胶、矿物油、脂质体等，可以保护疫苗抗原，延长抗原在机体内的存留时间，从而形成持续的免疫刺激和高效的免疫反应。目前，动物疫苗中使用较为广泛的仍然是矿物油佐剂，但由于疫苗中白油和表面活性剂所含比例较高，注射后动物应激反应较大，甚至形成无菌性化脓损害和接种部位附近的肉芽肿等，对畜禽产品品质产生了不良影响；且传统油包水疫苗通常粘度较大，注射困难，严重影响了疫苗的免疫效果和疫病的有效防控。温敏型水凝胶是水凝胶的一种，在药物缓释、组织工程、细胞工程等方面已有应用。当体系温度低于临界转变温度时，温敏性基质能够与水分子结合形成氢键，使凝胶基质能够溶解于水中，体系为流动的液相。当温度升高至临界转变温度时，氢键受到破坏，疏水作用下聚合物链随之发生收缩，成胶基质与水相分离，体系发生相转变，成为凝胶态。凝胶体系具有特殊的网状交联结构，可以将药物或其他活性成分包裹在三维网状结构内，随着凝胶的溶蚀缓慢释放药物或其他活性物质，可使其免于快速降解或失活，延长药物在体内的作用时间，进而达到缓释控释的目的。但是，现有技术中缺乏适用于兽用疫苗，黏度小，副作用小且能延长免疫持续期的温敏型水凝胶佐剂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，该佐剂原材料简单易得，价格低廉，黏度小，副作用小且能显著延长免疫持续期。本专利技术的另一目的是提供上述兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂的制备方法。本专利技术的再一目的是提供兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂的应用。本专利技术的目的采用如下技术方案实现：一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，按照质量百分含量由如下成分组成：高分子胶束物质15％-50％，非离子型纤维素醚0.1％-5％，余量为水。在本专利技术中，所述高分子胶束物质为泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、Soluplus、卡波姆中的一种或者几种的混合物。在本专利技术中，所述非离子型纤维素醚为羟丙基甲基纤维素。优选的技术方案中，兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂按照质量百分含量由如下成分组成：余量为水。在本专利技术中，所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，泊洛沙姆407的质量百分含量为14-30％，泊洛沙姆188的质量百分含量为1-5％。本专利技术还提供所述兽用疫苗的一种温敏型水凝胶佐剂的制备方法，具体步骤包括：称取各组分，混合，在2-10℃溶胀成均一体系，即得温敏型水凝胶佐剂。在本专利技术中，所述混合是在0-10℃条件下进行的。本专利技术还提供一种含所述兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂的疫苗。在本专利技术中，所述温敏型水凝胶疫苗包括质量比为0.5-4:1的温敏型水凝胶佐剂和抗原水溶液。在本专利技术中，所述抗原为猪圆环病毒病毒或猪细小病毒。本专利技术的有益效果：(1)本专利技术兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，成分简单，原材料易得，价格低廉，使用方便；与该佐剂相结合配制成的疫苗，通针性良好，黏度小易于注射，显著减轻了接种时的工作量；易储存，副作用小，且能显著延长免疫持续期。本专利技术所选原材料生物安全性和体内降解性均良好。凝胶在成胶后形成交联的网状三维结构，可在交联孔洞内负载抗原，而后随半固态凝胶在体内的溶蚀达到抗原的缓释效果。(2)本专利技术温敏型水凝胶佐剂的制备方法，简单易操作，成本低。附图说明图1不同疫苗注射部位的组织切片观察。其中(1)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)、(7)、(8)分别对应温敏型水凝胶疫苗PCV2-1、温敏型水凝胶疫苗PCV2-2、温敏型水凝胶疫苗PCV2-3、温敏型水凝胶疫苗PCV2-4、温敏型水凝胶疫苗PCV2-5、温敏型水凝胶疫苗PCV2-6、温敏型水凝胶疫苗PCV2-7、温敏型水凝胶疫苗PCV2-8免疫组小鼠；(9)为对照疫苗PCV2-1免疫组小鼠；(10)为注射生理盐水的空白对照组小鼠。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术进行详细说明，但本专利技术并不仅包括以下实施例，还包括在专利技术基础上的其他实施例。本专利技术中各材料来源如下：泊洛沙姆407、泊洛沙姆188均购自Sigma公司。卡波姆购自Lubrizol公司。Soluplus购自上海BASF公司，是聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物，由N-乙烯基-ε-己内酰胺、乙酸乙烯酯和聚乙二醇(57：30：13)共聚而成，分子量为90,000～140,000g/mol。羟丙基甲基纤维素购自sigma公司。实施例1温敏型水凝胶佐剂的筛选温敏型水凝胶佐剂1，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂2，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂3，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂4，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂5，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂6，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂7，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。温敏型水凝胶佐剂8，按照质量百分含量，由如下组分组成：余量为水。按照各温敏型水凝胶佐剂的组分和含量，称取各物质，混合，置于冰水浴下搅拌，于4℃条件下静置12小时，以溶胀成均一体系，然后用0.22μm滤膜过滤除菌，分别得到温敏型水凝胶佐剂1-8。采用翻转法(一种温敏凝胶基质及其制备方法与应用，专利号ZL201610243442.8)，将上述不同配方配制的水凝胶置于西林瓶中，放入水浴中，水浴温度自30℃开始升温，控制升温速度在0.5℃/min，每温度点维持5-10min。将西林瓶倾斜60度，以样品保持30秒内不流动作为胶凝判定依据，记录不同温度下各样品的胶凝时间。结果发现，上述8个温敏型水凝胶佐剂，在32℃以下，均无法胶凝，体系保持流动性。当温度升至34℃时，样品黏度陡增，体系流动性急剧下降，逐渐胶凝。考察了上述各温敏型水凝胶佐剂在36-40℃(人或动物常见的体温范围)的成胶时间，结果如表1。由表1可见，温敏型水凝胶佐剂1-8在36-40℃均可成胶，且随着温度的升高，成胶的时间逐渐缩短。表1不同水凝胶在36-40℃的成胶时间本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，其特征在于，按照质量百分含量由如下成分组成：/n高分子胶束物质15%-50%，/n非离子型纤维素醚0.1%-5%，/n余量为水。/n

【技术特征摘要】
1.一种兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，其特征在于，按照质量百分含量由如下成分组成：
高分子胶束物质15%-50%，
非离子型纤维素醚0.1%-5%，
余量为水。


2.根据权利要求1所述兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，其特征在于：所述高分子胶束物质为泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、Soluplus、卡波姆中的一种或者几种的混合物。


3.根据权利要求1所述兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，其特征在于：所述非离子型纤维素醚为羟丙基甲基纤维素。


4.根据权利要求3所述兽用疫苗的温敏型水凝胶佐剂，其特征在于，按照质量百分含量由如下成分组成：
泊洛沙姆15-35%，
Soluplus0.1-10%，
卡波姆0.01-0.2%，
羟丙基甲基纤维素0.1-5%，
余...

【专利技术属性】
技术研发人员：张金秋，苗晋锋，卢宇，邓碧华，周明旭，马芳，尹文竹，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32