反应处理装置制造方法及图纸

技术编号:26044607 阅读:48 留言:0更新日期:2020-10-23 21:24
反应处理装置(30)包括:反应处理容器(10);对样本照射第1激发光并对样本产生的第1荧光进行检测的第1荧光检测装置(50);以及对样本照射第2激发光并对样本产生的第2荧光进行检测的第2荧光检测装置(54)。第1荧光的波长范围和第2激发光的波长范围的至少一部分重叠。第1激发光及第2激发光以规定的占空比闪烁发光,在将第1激发光和第2激发光的闪烁的占空比设为d时,第1激发光和第2激发光的闪烁的相位差被设定在2π(p

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】反应处理装置
本专利技术涉及用于聚合酶链式反应(PCR:PolymeraseChainReaction)的反应处理装置。
技术介绍
基因检查被广泛应用于各医学领域中的检查、农作物或病原性微生物的识别、食品的安全性评价、以及病原性病毒或各种感染症的检查中。为了高灵敏度地检测微小量的DNA,已知对将DNA的一部分进行扩增而得到的结果进行分析的方法。其中,使用了PCR的方法是对从活体等提取的极微量的DNA的某一部分选择性地进行扩增的受到瞩目的技术。PCR是对将含有DNA的活体样本与由引物或酶等构成的PCR试剂混合而得到的样本施加规定的热循环,反复引起变性、退火及延伸反应,对DNA的特定部分选择性地进行扩增的技术。在PCR中,一般是向PCR配管或形成有多个孔洞的微板(微孔)等反应处理容器中加入规定量的对象样本来进行的。但近年,使用具备在基板上形成有微细的流路的反应处理容器(也被称为芯片)来进行的技术已被实用化(例如专利文献1)。[在先技术文献][专利文献]专利文献1:日本特开2009-232700号公报
技术实现思路
[专利技术要解决的课题]在使用具备上述那样的流路的反应处理容器的PCR中,有时因检测样本的定量的变化等目的而使用荧光检测装置。在样本中添加荧光色素,并在PCR的期间使用荧光检测装置向样本照射激发光,来检测样本发出的荧光。由于随着DNA的扩增的进展而从样本发出的荧光的强度增加,所以能够将该荧光的强度值作为PCR的进展或反应的终端的判定材料的指标。在PCR中,根据扩增对象而使用混合有多种荧光色素的试剂的情况较多,在这种情况下需要设置多个荧光检测装置。特别是在一边使样本在形成于板状的反应处理容器内的流路中流动、一边检测来自样本的荧光那样的反应处理装置中,为了检测通过一条截面积例如为2mm2以下的流路的样本的荧光,需要沿流路的延伸方向排列多个荧光检测装置。例如,在通过PCR使O-157扩增的情况下,需要同时测定VT1,VT2。例如东洋纺株式会社的检查套装(FIK-362)中,作为荧光色素使用ROX(为通过大致绿色光的照射被激发,并发出大致红色的荧光的荧光色素,以下将这样的荧光的特性称为“绿激发/红荧光”)、Cy5(红激发/红外荧光)。在这种情况下需要2个荧光检测装置。另外,在检测诺如病毒的情况下需要同时测定G1,G2,例如宝生物株式会社的检查套装(RR255A)及东洋纺株式会社的检查套装(FIK-253)在荧光色素中都使用了FAM(蓝激发/绿荧光)、ROX(绿激发/红荧光)、Cy5(红激发/红外荧光)。这种情况需要3个荧光检测装置。在像这样使用多个荧光检测装置对通过流路的样本进行荧光检测的情况下,有可能在荧光检测装置间产生干扰。以下举例来进行说明。在同时向样本添加FAM和ROX作为荧光色素使用的情况下,为激发ROX而照射的激发光的与大致绿色相当的光的波长范围,和从FAM发出的荧光的与大致绿色相当的光的波长范围的一部分存在重叠。该情况下,为激发ROX而照射的激发光的一部分若进入用于检测从FAM发出的荧光的光电转换元件等光检测器中,则成为干扰,有可能无法进行高灵敏度的测定。通常,激发光的光量为数十μW,而检测对象的荧光的光量为数pW以下的量级。因荧光检测装置以能够检测这样的微弱光量的荧光的方式构成,所以即使仅有极少的一部分激发光到达该光检测器,也会呈现为较大的噪声。另外,在同时向样本添加ROX和Cy5作为荧光色素使用的情况下,为激发Cy5而照射的激发光的大致红色的光的波长范围,和从ROX发出的荧光的与大致红色相当的光的波长范围的一部分存在重叠。这种情况下,为激发Cy5而照射的激发光的一部分若进入到用于检测从ROX发出的荧光的光检测器中,也会成为噪声,有可能无法进行高灵敏度的荧光测定。本专利技术鉴于以上课题而完成,其目的在于提供一种在具备多个荧光检测装置的反应处理装置中,能够抑制荧光检测装置间的干扰的技术。[用于解决技术课题的技术方案]为解决上述课题,本专利技术的一个方案的反应处理装置包括:形成有供样本移动的流路的反应处理容器;使第1激发光照射流路中所设定的第1荧光检测区域中的样本,并对通过第1激发光的照射而从样本产生的第1荧光进行检测的第1荧光检测装置;以及使第2激发光照射流路中设定的第2荧光检测区域中的样本,并对通过第2激发光的照射而从样本产生的第2荧光进行检测的第2荧光检测装置。第1荧光的波长范围和第2激发光的波长范围的至少一部分重叠。第1激发光及第2激发光以规定的占空比闪烁发光。在将第1激发光和第2激发光的闪烁的占空比设为d时,第1激发光与第2激发光的闪烁的相位差被设定在2π(pm-Δpm)[rad]~2π(pm+Δpm)[rad]的范围内、或2π{(1-pm)-Δpm}[rad]~2π{(1-pm)+Δpm}[rad]的范围内(其中pm=d-d2及Δpm=0.01×pm)。本专利技术的其他方案也是反应处理装置。该装置包括:形成有供样本移动的流路的反应处理容器;使第1激发光照射流路中设定的第1荧光检测区域中的样本,并对通过第1激发光的照射而从样本产生的第1荧光进行检测的第1荧光检测装置;以及使第2激发光照射流路中设定的第2荧光检测区域中的样本,并对通过第2激发光的照射而从样本产生的第2荧光进行检测的第2荧光检测装置。第1荧光的波长范围和第2激发光的波长范围的至少一部分重叠。第1激发光及第2激发光以规定的占空比闪烁发光。在将第1激发光和第2激发光的闪烁的占空比设为d时,第1激发光与第2激发光的闪烁的相位差被设定在2π(pm-Δpm)[rad]~2π(pm+Δpm)[rad]的范围内、或2π{(1-pm)-Δpm}[rad]~2π{(1-pm)+Δpm}[rad]的范围内(其中pm=d-d2及Δpm=(d-d2)/{k·(N0')/V10},N0'是第1激发光和第2激发光的闪烁的相位差为0rad时的第1荧光检测装置的信号输出的噪声,V10是第2荧光检测装置未工作的情况下的第1荧光检测装置的信号输出,k=20)。在上述方案中,也可以是k=100/3。另外,也可以是k=100。第1荧光检测装置也可以具备照射第1激发光并接收第1荧光的第1光学头。第2荧光检测装置也可以具备照射第2激发光并接收第2荧光的第2光学头。在第1光学头及第2光学头的数值孔径处于0.07~0.23的范围内的情况下,第1荧光检测区域的中心与第2荧光检测区域的中心之间的距离也可以被设定为4mm以上。流路也可以具备:维持在第1温度的第1温度区域;维持在高于第1温度的第2温度的第2温度区域;以及连接第1温度区域和第2温度区域的连接区域。也可以基于由第1荧光检测装置检测到的荧光信号来控制流路内的样本的移动。第1荧光检测区域也可以设定于连接区域的大致中间点。第1荧光检测装置也可以照射蓝色光作为第1激发光,并且检测绿色光作为第1荧光。第2荧光检测装置也可以照射绿色光作为第2激发光,并且检测红色光作为第2荧光。也可以还包括使第3激发光照射本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种反应处理装置,其特征在于,包括:/n反应处理容器,其形成有供样本移动的流路,/n第1荧光检测装置,其使第1激发光照射所述流路中设定的第1荧光检测区域中的样本,并对通过所述第1激发光的照射而从样本产生的第1荧光进行检测,以及/n第2荧光检测装置,其使第2激发光照射所述流路中设定的第2荧光检测区域中的样本,并对通过所述第2激发光的照射而从样本产生的第2荧光进行检测;/n所述第1荧光的波长范围和所述第2激发光的波长范围的至少一部分重叠,/n所述第1激发光及所述第2激发光以规定的占空比闪烁发光,/n在将所述第1激发光和所述第2激发光的闪烁的占空比设为d时,所述第1激发光与所述第2激发光的闪烁的相位差被设定在2π(p

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180323 JP 2018-0567671.一种反应处理装置,其特征在于,包括:
反应处理容器,其形成有供样本移动的流路,
第1荧光检测装置,其使第1激发光照射所述流路中设定的第1荧光检测区域中的样本,并对通过所述第1激发光的照射而从样本产生的第1荧光进行检测,以及
第2荧光检测装置,其使第2激发光照射所述流路中设定的第2荧光检测区域中的样本,并对通过所述第2激发光的照射而从样本产生的第2荧光进行检测;
所述第1荧光的波长范围和所述第2激发光的波长范围的至少一部分重叠,
所述第1激发光及所述第2激发光以规定的占空比闪烁发光,
在将所述第1激发光和所述第2激发光的闪烁的占空比设为d时,所述第1激发光与所述第2激发光的闪烁的相位差被设定在2π(pm-Δpm)[rad]~2π(pm+Δpm)[rad]的范围内、或2π{(1-pm)-Δpm}[rad]~2π{(1-pm)+Δpm}[rad]的范围内,其中pm=d-d2及Δpm=0.01×pm。


2.一种反应处理装置,其特征在于,包括:
反应处理容器,其形成有供样本移动的流路,
第1荧光检测装置,其使第1激发光照射所述流路中设定的第1荧光检测区域中的样本,并对通过所述第1激发光的照射而从样本产生的第1荧光进行检测,以及
第2荧光检测装置,其使第2激发光照射所述流路中设定的第2荧光检测区域中的样本,并对通过所述第2激发光的照射而从样本产生的第2荧光进行检测;
所述第1荧光的波长范围和所述第2激发光的波长范围的至少一部分重叠,
所述第1激发光及所述第2激发光以规定的占空比闪烁发光,
在将所述第1激发光和所述第2激发光的闪烁的占空比设为d时,所述第1激发光与所述第2激发光的闪烁的相位差被设定在2π(pm-Δpm)[rad]~2π(pm+Δpm)[rad]的范围内、或2π{(1-pm)-Δpm}[rad]~2π{(1-pm)+Δpm}[rad]的范围内,其中pm=d-d2及Δpm=(d-d2)/{k·(N0')/V10},N0'是所述第1激发光和所述第2激发光的闪烁的相位差为0rad时的所述第1...

【专利技术属性】
技术研发人员:福泽隆竹内秀光川口磨
申请(专利权)人:日本板硝子株式会社
类型:发明
国别省市:日本;JP

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