无级差渗漏脱水组织制片法制造技术

一种无级差渗漏脱水组织制片法，主要解决传统的等级脱水法因级差过大、造成组织收缩变脆而影响对组织的观察和研究的问题。主要方法是：在高浓度脱水剂容器和渗漏筒中分别装有无水乙醇和５０％乙醇，二者液量之比为５∶１，将欲脱水的组织放置在渗漏筒内；高浓度脱水剂通过下方的液柱间断断流器及控制阀的控制，缓慢滴入到渗漏筒内，同时从中央管中排出等量的液体，则组织中的水分即被逐步脱去。该方法能提供良好的组织切片，利于对组织或细胞的观察研究。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物组织脱水制片技术，特别是一种无级差渗漏脱水组织制片法。长期以来，国内外生物组织制片技术均采用传统的等级脱水法，即组织经过70%、80%、95%、100%酒精逐级脱去组织中的水份。目前，先进的全自动电脑程序控制的脱水机和微波技术，在脱水方面的应用均是按等级脱水法原理设计，虽然在自动化或脱水程度等方面有所进展，但是，仍然尚未突破传统的等级脱水法的原理。这种等级脱水法，在脱水剂的每个等级之间存在着明显的级差。组织(特别是含水份丰富的组织或细胞)在这种脱水过程中，常因级差过大，造成组织收缩或变脆等不良变化，十分影响对组织或细胞的微观结构的观察和研究。等级脱水法延用至今，虽然是一种经典的传统方法，但仍不完善，尚有进一步改进的必要。本专利技术的目的在于克服上述现有技术之不足，突破传统的级差脱水法，提供一种简便易行的无级差组织脱水法，从而更好地为研究组织和细胞结构及形态提供优良的切片。本专利技术的目的是这样实现的它主要是借助于高浓度脱水剂容器、渗漏筒所组成的连通装置来完成。在高浓度脱水剂容器1中加入无水乙醇。在渗漏筒5中加入50%乙醇。其无水乙醇与50%乙醇的液量之比为5∶1。将欲脱水的组织放置在渗漏筒5内。容器1中的高浓度脱水剂通过下方的液柱间断断流器2及输送管上的控制阀3或流量计的控制，以20～40滴/分、20滴≈1毫升的速度，缓慢地从渗漏筒5的下方进入到渗漏筒内，同时从渗漏筒5中的中央管4排出等量的液体。待高浓度脱水剂全部滴完或再保留1～2小时后，则组织中的水份即被脱去。然后，从渗漏筒内取出组织常规透明、浸腊和包埋。本专利技术的主要优点在于克服了传统脱水法因级差过大给组织带来的不良影响。组织不变形，收缩很微小，组织也不因级差过大或时间过长而变脆，脱水彻底，能制作优良的组织切片。对观察组织或细胞的微观结构十分有利。为医学病理学，组织学和生物学的研究提供了一种优良的制片技术，方法十分简单，易于推广运用。该方法还可以理解为是一种洗脱法或称置换法，改脱水剂用透明剂则可以用于组织透明，由于透明剂多为脂容剂(如二甲苯)，还可以提高脱脂能力;用某种洗脱剂可以洗脱组织中的某种化学成分，从收集液中可以定量分析组织中某些化学成分，用缓冲液进行洗脱，把荧光标记的抗体放在透析袋内再置入渗漏筒内，以该方法可以进行透析则可以得到更纯净的荧光标记的抗体;还可以用本法模拟人体内环境，动态观察与研究离体组织的生物化学方面的变化。根据本方法的原理可以制造不同型号的仪器，如组织脱水机、处理机、分析仪等。加之电脑、动力、恒温等设备可以按实验的要求与目的编制各种工作程序，所以本方法具有十分广泛的开发前景。下面结合附图及实施对本专利技术作进一步说明。附图说明图1是本专利技术的工作流程图。图中，A为高浓度脱水剂供给部分，其中1为高浓度脱水剂容器，2为液柱间断断流器，3为控制阀或流量计;B为工作效应部分，其中4为中央管，5为渗漏筒(附加温控制)，6为浓度监测计，7为活性碳过滤柱;C为分段回收部分，其中8为三通莫非氏管，9为回收瓶，10为排气管。图2是本专利技术中渗漏筒5的几种结构示意图。依照渗漏筒的不同结构可分为以下四类一、中央管式渗漏筒(包括图中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ所示)，其中Ⅰ、Ⅱ为粗中央管式(组织置入中央管内)，Ⅰ图的结构为容量恒定的渗漏筒，Ⅱ图的结构为可以调节容量的渗漏筒，Ⅲ、Ⅳ为细中央管式(组织放在中央管周围)，Ⅲ图为底部直接注入式，Ⅳ图为插入注入式;二、连通器式渗漏筒(见Ⅴ图)，它是依靠三通莫非氏管的高度调节渗漏筒内维持液量的水平;三、有限调节的渗漏筒(见Ⅶ图)，其周边有三组收集管道，可供调节三种不同的容量;四、复合式渗漏筒(见Ⅵ图)，由前后两部分组成，前部供调节渗漏曲线，后部为组织脱水部分。上述图中箭头指示液体流动方向。细中央管式渗漏筒可借调节中央管的高低调节液量。图3是本专利技术中的酒精蒸馏回收仪示意图。根据组织的数量、大小和对渗漏脱水曲线的不同要求，设计了上述不同结构的渗漏筒，可供使用时选用。几种渗漏筒在使用时共同特点是可以在脱水过程中，始终保持相对恒定的液量，即在注入高浓度脱水剂的同时排出相等的液量;高浓度脱水剂注入部位均在渗漏筒的下部，排出部分则在上部，这样可保证在脱水过程中脱水剂均匀扩散。为了使排出后的高浓度脱水剂回收再用，可在渗漏筒后面设置分段回收装置(即图1中C部分)，它由六个小组构成(依次编为Ⅰ-Ⅵ组)，每组由三通莫非氏管8、回收瓶9和排气管10组成，如图所示互相串联。在脱水过程中，由于收集的先后秩序不同，收集到的脱水剂浓度也不同，最先收集到的浓度最低，以后的浓度逐级升高，所以又称为分段梯度回收装置，回收到的脱水剂可以重复使用。为了纯净回收脱水剂和动态观察脱水过程的浓度变化，还在渗漏筒的下部与回收装置之间依次串联了活性碳过滤柱7和浓度比重监测计6(见图1中B部分)。由于活性碳具有较强的吸附能力，自渗漏筒内排出的脱水剂中的各种杂质可以在此被清除。浓度比重监测计6可以间接测到渗漏筒内脱水剂在脱水过程中的变化。上述的分段回收装置还可以由一种酒精蒸馏回收仪取代(见图3)，该回收仪必须要有控温系统保证在回收时控制脱水剂所需的沸点，这样才能得到含水份较少、浓度较高的脱水剂。根据本专利技术的原理，还可以设计在脱水过程中脱水剂的浓度变化计算公式设a%为渗漏筒内脱水剂起始浓度。n为滴加高浓度脱水剂的滴数。m为每滴的液量(毫升)。b为渗漏筒内维持液量(毫升)。则an＝( (b-m)/(b) ·an-1%+ (m)/(b) )%，级差＝an%-an-1%为了公式计算方便，以每滴为一个计算单位，如以耗量500毫升无水酒精计算(20滴/ml)，可以计算出104个递增的浓度，同时按公式也可得到104个级差递减的级差，实际上在高浓度进入渗漏筒时已无滴加现象存在，是以细管道液柱流入渗漏筒。所以在提高渗漏筒内的浓度时已无级差存在，这种浓度的变化对组织的脱水是十分有利的。根据公式输入微机计算已经得到与理论相符合的数据，而且计算数据与试验数据也相符，说明本专利技术的原理和公式设计是正确的，科学性较强。依公式计算数据可以绘制该方法的工作曲线，可供工作时使用，免去了计算的繁琐。利用本专利技术在某些特殊要求的科研课题中，可制作全脏器大切片和特殊要求的切片，如1、全心切片用于心内膜弹力纤维增生症(EFE)的内膜研究。2、全结肠切片用于先天性巨结肠粘膜病变病理研究与临床意义。3、全肾切片(肾病研究)。4、全肺切片，用于儿童结核病观察、肺囊肿病变观察等。权利要求1.一种用于医学病理学中的无级差渗漏脱水组织制片法，主要借助高浓度脱水剂容器、渗漏筒所组成的连通装置来完成，其特征在于在高浓度脱水剂容器(1)中加入无水乙醇，在渗漏筒(5)中加入50%乙醇，其无水乙醇与50%乙醇的液量之比不5∶1；将欲脱水的组织放置在渗漏筒(5)内，容器(1)中的高浓度脱水剂通过下方的液柱间断断流器(2)及输送管上的控制阀(3)或流量计的控制，以20～40滴/分、20滴≈1毫升的速度，缓慢地从渗漏筒(5)下方进入到渗漏筒(5)内，同时从渗漏筒(5)中的中央管(4)排出等量的液体，待高浓度脱水剂全部滴完或再保留1～2小时后，则组织中的水份即被脱去，然后从渗漏筒内取出组织常规透明、浸腊和包埋。全文摘要一种无级差渗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于医学病理学中的无级差渗漏脱水组织制片法，主要借助高浓度脱水剂容器、渗漏筒所组成的连通装置来完成，其特征在于：在高浓度脱水剂容器（１）中加入无水乙醇，在渗漏筒（５）中加入５０％乙醇，其无水乙醇与５０％乙醇的液量之比不５∶１；将欲脱水的组织放置在渗漏筒（５）内，容器（１）中的高浓度脱水剂通过下方的液柱间断断流器（２）及输送管上的控制阀（３）或流量计的控制，以２０～４０滴／分、２０滴≈１毫升的速度，缓慢地从渗漏筒（５）下方进入到渗漏筒（５）内，同时从渗漏筒（５）中的中央管（４）排出等量的液体，待高浓度脱水剂全部滴完或再保留１～２小时后，则组织中的水份即被脱去，然后从渗漏筒内取出组织常规透明、浸腊和包埋。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁建生，
申请(专利权)人：鲁建生，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]