体外再生丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶的解蛋白活性的方法技术

这是一种体外再生与ＨＣＶ ＮＳ３蛋白质相关的丝氨酸蛋白酶活性的方法，包括对ＮＳ３中所含序列和ＮＳ４Ａ中所含序列的利用。该方法利用ＨＣＶ ＮＳ４Ａ蛋白质或其中所含的序列作为丝氨酸蛋白酶活性或普遍而言与ＮＳ３相关的酶活性的辅助因子的能力。当ＮＳ４Ａ与ＮＳ３的摩尔比至少为１∶１时获得丝氨酸蛋白酶的最佳活性。ＮＳ３与ＮＳ４Ａ还可以作为ＮＳ３－ＮＳ４Ａ前体掺入反应混合物，因为通过自蛋白水解反应，该前体会产生等摩尔量的ＮＳ３和ＮＳ４Ａ。也有可能使前体中的ＮＳ３与ＮＳ４Ａ之间的切割位点发生突变，这样ＮＳ４Ａ仍以共价键形式与ＮＳ３相结合。可随后从所述非解蛋白前体中除去不影响ＮＳ３解蛋白活性的序列。本发明专利技术还涉及一种包含ＮＳ３和ＮＳ４Ａ中所含序列的组合物以及利用这些组合物建立为了治疗目的能选择可抑制与ＮＳ３相关的酶活性的化合物的酶促试验。附图表示在本方法以中用于激活培养细胞中和体外的ＨＣＶ ＮＳ３蛋白酶的质粒载体。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种体外再生ＨＣＶ　ＮＳ３蛋白酶的解蛋白活性的方法，其特征在于将ＮＳ３和ＮＳ４Ａ中所含的序列都用于反应混合物中。２．依据权利要求１的体外再生ＨＣＶ　ＮＳ３蛋白酶的解蛋白活性的方法，其中ＮＳ４Ａ与ＮＳ３的比例为１∶１。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：R狄弗朗希斯克，C法拉，L托梅，
申请(专利权)人：布安格莱荻公司分子生物学研究所，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]