含硫化合物的检测制造技术

提供一种检测特定有机硫化合物的方法，该方法能把选定化合物与更为常见的含硫化合物例如天然存在的化合物如含硫氨基酸区分开来。优选痕迹量或以上浓度的这类化合物的测量，在环境、生物和医用分析领域内是特别重要的。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测特定有机硫化合物的方法，该方法能把选定化合物与更为常见的含硫化合物例如天然存在的化合物如含硫氨基酸区分开来。优选痕迹量或以上浓度的这类化合物的测量，在环境、生物和医用分析领域内是特别重要的。已经研究出许多主要利用鲁米诺(Luminol)和过草酸盐反应测量无机和有机物质的液相化学发光方法(Robards K和Worsfold PJ，Anal Chim.Acta，1992 226 147)，然而，还发现了另外的化学发光反应，如发现某些有机硫类也能产生化学发光(Lancaster J S和Worsfold P JAna.Proc.，1989 26 19)。本专利技术则能提供区分一组特定有机硫化合物与其它的有机硫化合物如半胱氨酸和胱氨酸的方法。芥子气，二-(2-氯乙基)硫，一种能用于化学毒气中的毒剂的测定，在战用毒气情况和为了保证控制这种试剂的使用不违背国际法的情况下，是特别重要的。2，2＇-二羟基二乙硫是芥子气制造的主要前体之一(Lundin S J”“Verification of Dual-Use Chemicals Under theChemical Weapons ConventionThe Case of Thiodiglycol”1991 SIPRI)并且已被证明除了存在于芥子气中毒人的生物样品中以外(Wils E RJ，Hulst A G，de Jong A L，Verweij A和Boter H L，J.Anal.Tox.，1985 9254)，还是芥子气经水解作用主要的环境分解产物(Black R M，ClarkeR J，Read R W和Reid M T J，J.Chromatogr.，1994 662 301)。因此，能按照暗中使用活性剂的指示，检测芥子气这种产物和其它水解产物如2-氯-羟基二乙基硫同样是有价值的。对这些化合物可靠测定的需求已导致研究许多完善的仪器方法，主要涉及使用气相色谱仪-质谱仪(GC-MS)或GC-MS-MS。这些仪器使用供鉴定和定量用的各种电离方式，尤其是为了筛选在选择性离子监测方式中使用检测器，然而为了分析2，2′-二羟基二乙硫需要衍生程序。芥子气及其降解产物吸收性能很差而且在电磁谱的紫外或可见光区不发荧光，由此普通的液相检测方法具有有限的用途，因为经常要求必须的衍生作用。能为直接测定含硫化合物如芥子气和2，2′-二羟基二乙硫提供所需要的必要选择性的灵敏液相系统至今尚未获得。这类化合物的剧毒性意味着在其低浓度下进行检测是特别重要的。本专利技术方法能检测样品中存在浓度0.2μg ml-1(2×10-6M)的2，2′-二羟基二乙硫，然而，该方法对检测样品中存在浓度1μg ml-1的有机硫化合物也是有价值的。此外所述方法对比由Lancaster和Worsfold描述的研究化学发光的早期方法要灵敏得多，该方法引用2-乙基苯硫酚的理论检测极限为4×10-4M，而且只给出能证明低于2×10-2M的光发射和低于5×10-3M非常低的光发射实施例。按照本专利技术，测定样品中至少一种与二-(2-氯乙基)-硫有关的化合物的存在和/或数量的方法包括如下步骤i)往样品中加氧化剂ii)测量所产生的化学发光以及使所产生的化学发光与样品中与二-(2-氯乙基)-硫有关化合物的存在和/或数量相关联。检测的化合物可能与二-(2-氯乙基)硫(例如反应剂，副产物)的形成有关，或者可能是分解产物并且包括1，2-二(2-氯乙基硫代)乙烷、二-(氯乙基硫代乙基)醚和2，2＇-二羟基二乙硫。优选实施方案包括在氧化剂加入前水解样品的步骤，并允许检测例如可被水解成2，2＇-二羟基二乙硫的化合物例如2-氯-2-羟基二乙硫和二-(2-氯乙基)硫。另外优选的实施方案包括测量化学发光以后往样品中加还原剂的步骤，所述还原剂能把2，2＇-二羟基二乙基亚砜还原成2，2＇-二羟基二乙硫，再次测量样品的化学发光，以及使所述还原剂加入前后样品化学发光差与处理前样品中存在的2，2′-二羟基二乙基亚砜的数量相关联的步骤。最佳还原剂是四氯化钛。样品水解后进行的测量将反映所存在的2，2＇-二羟基二乙硫及其可水解前体的总量。前体量可根据水解前后所测量的信号差来确定。然而为了筛选芥子气及其分解产物，有一个肯定的结果就足够了，没有必要进行定量测量。敏化剂，即能增强化学发光信号强度的荧光物质，可在测量化学发光之前加到样品中。已知往化学发光体系中加这种高荧光化合物后，按照下列一组方程式经由能量转换至荧光分子可以增强较弱的信号。A+B→P*P*+F→F*+PF*→F+hv式中F代表荧光分子A和B是引发反应剂P*是电激发态产物。合适的敏化剂包括占吨及其衍生物和盐，(例如若丹明B、荧光素、玫瑰红和钙黄绿素)。吖嗪，例如酚藏花红和噻嗪衍生物(见Dictionaryof Analytical Reagents，Townsend A，Burns DT，Lobinski R，Guilbault GGNewman Ej，Marnzenko Z，Onishi H；p774，(1993)，Chapman和Hall，London，New York)包括Phenazathiozoniums及其衍生物都是合适的敏化剂。亚甲兰是特别有效的。本专利技术最佳实施方案利用若丹明B可提高化学发光信号到100倍以上。用于本专利技术方法的合适氧化剂是那些能把二价硫氧化而不干扰化学发光发射的氧化剂，实例包括次氯酸盐，例如次氯酸钠。化学发光可用光检测器，例如光电倍增管或固态光电二极管来进行测量。化学发光适合在550-650nm间测量。本专利技术的一个最佳实施方案提供的方法中化学发光是在590-600nm间测量的。本专利技术的优选方法是能检测样品中1μg ml-12，2′-二羟基二乙硫或前体。更佳实施方案可检测样品中0.2μgml-1或以上的2，2′-二羟基二乙硫或前体。本专利技术的优选方法是那些其中敏化剂和氧化剂均是溶液态的方法。样品和氧化剂能很方便地被引入两股流的流动注入系统中以便经济和容易地使用筛选体系。氧化剂以氧化剂流的形式适宜地引入系统，而样品则以载体流的形式适宜地引入，在优选实施方案中进一步含有敏化剂。载体流优选的是非水的，例如使用醇类或酮类，特别是脂族的醇类和酮类。在本专利技术的优选实施方案中氧化剂流含有低级烷基醇类或酮类例如甲醇或丙酮。对于氧化步骤来说最佳pH取决于许多因素如方法借以完成的介质。在本专利技术的特定实施方案中优选pH值介于8和12，更好的pH值介于8.5和11，而最佳的pH值介于8.5和10.5。当如上所述采用流动控制系统完成方法时，氧化剂流优选具有介于8和12的pH值，更好地介于8.5和11，最好介于8.5和10.5。当使用流动系统时，由于两股液流混合得不够充分所以结果的再现性可能较差。往该系统加表面活性剂，优选非离子表面活性剂，至少可部分克服这类难题。为此目的聚乙二醇是合适的表面活性剂，尤其是聚氧乙烯醚，例如TritonX-100和TritonCF 10。表面活性剂优选加入的浓度在其临界胶束浓度以上。如果使用表面活性剂或敏化剂的话最方便的是含于载体流中。当使用流动系统时液流的混合比可影响所得到的化学发光信号的强度。在本专利技术的最佳实施方案中载体∶氧化剂流比本文档来自技高网...

【技术保护点】
测定样品中至少一种与二－（２－氯乙基）硫有关的化合物的存在和／或数量的方法，该方法包括如下步骤：ｉ）往样品中加入氧化剂ｉｉ）测量所产生的化学发光以及使所产生的化学发光与样品中二－（２－氯乙基）硫有关的化合物的存在和／或数量相关联 。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：TJ克里斯蒂，A汤森德，AN特赖施威，
申请(专利权)人：英国国防部，
类型：发明
国别省市：GB[英国]