冷冻保存溶液制造技术

一种浓缩冷冻保存溶液，主要包含： （ａ）甘油； （ｂ）对提高细胞存活率来说为有效量的碱金属氯化物； （ｃ）对在环境条件下细胞的维持来说为有效量的可生物代谢的单糖； （ｄ）对保护质膜完整性来说为有效量的血清白蛋白。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及冷冻保存溶液。更具体地说，本专利技术是特别适用于冷冻保存各种血液循环细胞和骨髓细胞，例如造血干细胞和祖细胞的冷冻保存溶液。本专利技术还涉及冷冻保存细胞和恢复经冷冻保存的细胞的方法。
技术介绍
血液具有可识别形态和不同功能的血循环细胞包括红细胞，嗜中性、嗜酸性和嗜碱性粒细胞，B淋巴细胞，T淋巴细胞，非B淋巴细胞，非T淋巴细胞和血小板。这些成熟细胞来源于各谱系具有可识别形态的分裂的前体细胞，且于需要时可由它们取代，这些前体细胞例如有红细胞系的成红细胞，粒细胞系的成髓细胞、前髓细胞和髓细胞，以及血小板系的巨核细胞。造血干细胞和祖细胞前体细胞来自可简单分为两亚群的更原始的细胞干细胞和祖细胞。对干细胞和祖细胞的定义是操作型的，取决于功能标准而不是其形态标准。有些干细胞在需要时发生分化，但是有些干细胞或其子代细胞生成别的干细胞以维持宝贵的这类细胞的集合。这样，多能干细胞除了能够维持自己的种系之外，还能够分化成几个亚系的、具有较为有限的自我更新能力或没有自我更新能力的祖细胞。由这些祖细胞最终产生具有可识别形态的前体细胞。祖细胞能够增殖和沿一种或多种髓细胞样分化途径进行分化。干细胞和祖细胞在骨髓、脾脏和血液中的有核细胞中占很小的百分比。存在于脾脏中的这些细胞比骨髓中的约少10倍，成人血液中甚至更少。例如，有核骨髓细胞中约有千分之一是祖细胞；干细胞更少。已经能够通过骨髓移植来再建造血系统。Lorenz及其同事证明，通过静脉输注骨髓可以保护小鼠抵抗致死量的辐射(Lorenz，20E，等，1951，国立癌症研究所杂志(J.Natl.Cancer Inst.)12197-201)。以后的研究表明，保护作用来自输注的细胞在受体骨髓中的定居(Lindsley，D.L.，等，1955，实验生物学与医学会记事(Proc.Sco.Exp.Biol.Med.)90512-515；Nowell，P.C.，等，1956，(癌症研究(CancerRes.)16258-261；Mitchison，N.A.，1956，英国实验病理学杂志(Br.J.Exp.Pathol.)37239-247；Thomas，E.D.等，1957，新英格兰医学杂志(N.Engl.J.Med.)257491-496)。这样，供体骨髓中的干细胞和祖细胞能够增殖和取代负责保护性免疫、组织修复、凝血和其它血液功能的血细胞。在成功的骨髓移植中，血液、骨髓、脾脏、胸腺和其它免疫器官中都重新集合了来自供体的细胞。骨髓移植已越来越成功地被用于治疗许多致死或致残的疾病，其中包括某些类型的贫血，例如再生障碍性贫血(Thomas，E.D.等，1972年2月5日，柳叶刀(TheLancet)pp.284-289)，范康尼氏贫血(Gluckman，E.等，1980，英国血液学杂志(Brit J.Haematol.)45557-564；Gluckman，E.等，1983，英国血液杂志(Brit J.Haematol.)54431-440；Gluckman，E.等，1984，血液学评论(Seminars inHematology)21(1)20-26)，免疫缺陷(Good，R.A.等，1985，细胞免疫学(CellularImmunol.)8236-54)，癌症，例如淋巴瘤和白血病(Cahn，J.Y.等，1986，英国血液学杂志(Brit J.Haematol.)63457-470；Blume，K.J.和Forman S.J.，1982，细胞生理学杂志增刊(J.Cell.Physiol.Supp.)199-102；Cheever，M.A.等，1982，新英格兰医学杂志(N.Engl.J.Med.)307(8)479-481)，癌(Blijham，G等，1981欧洲癌症杂志(Eur.J.Cancer)17(4)433-441)，各种实体瘤(Ekert，H.等，1982，癌症(Cancer)49603-609；Spitzer，G.等，1980，癌症(Cancer)453075-3085)，以及各种造血遗传疾病。最近，骨髓移植还被用于治疗遗传性贮积病(Hobbs，J.R.，1981，柳叶刀(Lancet)2735-739)，重型地中海贫血(Thomas，E.D.等，1982，柳叶刀(Lancet)2227-229)，镰状细胞疾病(Johnson，F.J.等，1984，新英格兰医学杂志(N.Engl.J.Med.)311780-783)，骨硬化病(Coccia，P.F.，等，1980，新英格兰医学杂志(N.Engl.J.Med.)302701-708)(全面的论述可参见Storb，R.和Thomas，E.D.，1983，免疫学评论(Immunol.Rev.)7177-102；O’Reilly，R.等，1984，血液学评论(Sem.Hematol.)21(3)188-221；1969，骨髓的保存、培养和移植，小组委员会会议录，莫斯科(Bone-Marrow Conservation，Culture and Transplantation，Proceedings of aPanel，Moscow)，1968年7月22-26，International Atomic Energy Agency，Vienna；McGlave，P.B.等，1985，血液学最新进展(Recent Advances in Haematology)，Hoffbrand，A.V.编，Churchill Livingstone，London，pp.171-197)。现在骨髓移植的使用受到严格限制，因为很难找到完全匹配(遗传上全等)的供体，除非是得到全等双生儿或者缓解期病人的骨髓细胞以活的冷冻状态保存。即使在这样的自体系统中未能察觉的恶性细胞污染造成的危险，以及病人必须足够强健以便进行骨髓移植，仍造成严重的限制。除这样的自体移植之外，不可避免地有某种程度的遗传不匹配性，这会造成严重的有时是致命的并发症。这些并发症是双重性的。首先，为防止病人对外来骨髓细胞的免疫排斥(宿主抗移植物反应)病人通常事先服药而形成免疫抑制。其次，当(和如果)供体骨髓细胞移植成功，它们就会将病人作为异物进行攻击(移植物抗宿主病)。即使是高度匹配的亲属供体，这些部分不匹配造成的并发症也会导致遗传上不同的个体间骨髓移植引起的许多死亡或疾病。另外还研究了将外周血作为用于再建造血系统的干细胞的来源(Nothdurtt，W.等，1977，斯堪的纳维亚血液学杂志(Scand.J.Haematol.)19470-471；Sarpel，S.C.等，1979，实验血液学(Exp.Hematol.)7113-120；Ragharachar，A.等，1983，细胞生物化学杂志增刊(J.Cell.Biochem.Suppl.)7A78；Juttner，C.A.等，1985，英国血液学杂志(Brit.J.Haematol.)61739-745；Abrams，R.A.等，1983，细胞生物化学杂志增刊(J.Cell.Biochem.Suppl.)7A53；Prummer.O.等，1985，实验血液学(Exp.Hematol.)13891-898；)。在有些研究中，对于各种白血本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：M·R·波洛维那，
申请(专利权)人：切洛克斯实验室股份有限公司，
类型：发明
国别省市：