一种用于宫颈癌检测的试剂盒、使用方法技术

本发明专利技术公开了一种用于宫颈癌检测的试剂盒、使用方法、应用。该试剂盒通过检测或测量受试样品DNA中一种或多种特定基因的甲基化状态或水平来筛查和诊断宫颈癌。经实验测试，本发明专利技术的方法具有快速、灵敏度高和特异性高等特点，能够在早期及时对人宫颈癌进行诊断，使得早期准确诊断宫颈癌成为可能，避免了医疗资源的浪费。本发明专利技术试剂盒能够显著提高早期宫颈癌的阳性检出率和特异性(真实阴性率)。

【技术实现步骤摘要】
一种用于宫颈癌检测的试剂盒、使用方法
本专利技术属于生物技术和DNA检测
，尤其涉及一种用于宫颈癌检测的试剂盒、使用方法、应用，具体而言，涉及一种利用宫颈细胞DNA进行甲基化qPCR以确定一个目标基因靶点的甲基化状态来用于宫颈癌检测或筛查的试剂盒及其使用方法，此外，本专利技术还涉及上述检测试剂盒在生物医学中的应用。
技术介绍
宫颈癌是女性最常见的癌症之一，多发生于宫颈鳞柱交界处(移行带)。在全球范围内，估计2018年有57万例新发病例，占所有癌症死亡妇女的7.5％。而中国的宫颈癌病例占全球的28％以上，高发年龄为50—55岁。近年来，中国宫颈癌的发病率和死亡率一直呈上升趋势。其中85－90％为鳞状细胞癌，余下的10－15％中多数为腺癌。宫颈癌的临床表现多不明显，或仅有类似宫颈炎的症状，容易造成漏诊；一旦出现症状，多已发展到晚期，从而丧失了最佳的治疗窗口。多项大型研究表明，定期接受宫颈癌筛查是预防宫颈癌的最佳方法。常用的宫颈癌筛检方式主要有两种，一种是常见的宫颈细胞学检查，包括传统的巴氏涂片(Paptest)和液基薄层细胞技术(TC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于宫颈癌检测的试剂盒，通过检测或测量受试样品DNA中一种或多种特定基因的甲基化状态或水平来筛查和诊断宫颈癌。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于宫颈癌检测的试剂盒，通过检测或测量受试样品DNA中一种或多种特定基因的甲基化状态或水平来筛查和诊断宫颈癌。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测或测量受试样品DNA中一种或多种特定基因的甲基化状态或水平的特异性引物和探针，所述特定基因包括PAX1和ACTB。


3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，用于检测PAX1基因甲基化状态的特异性引物和探针选自下述三种特异性引物和探针组合中的任一种：特异性引物SEQIDNO:1-2和探针SEQIDNO:3、特异性引物SEQIDNO:4-5和探针SEQIDNO:6、特异性引物SEQIDNO:7-8和探针SEQIDNO:9。


4.根据权利要求1-3任一所述的试剂盒，其特征在于，用于检测ACTB基因甲基化状态的特异性引物和探针为特异性引物SEQIDNO:10-11和探针SEQIDNO:12。


5.根据权利要求1-4任一所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性引物SEQIDNO:1、2、4、5、7、8、10、11均经过硫代磷酸酯修饰，且在严格条件下与甲基化或非甲基化的目标基因区域杂交；
和/或，所述探针SEQIDNO:3、6、9、12是基于TaqManTM设计的，且在严格条件下与甲基化或非甲基化的目标基因区域杂交。


6.根据权利要求1-5任一所述的试剂盒，其特征在于，PAX1基因探针SEQIDNO:3、6、9核苷酸序列5’端标记FAM，3’端标记QSY；ACTB基因探针SEQIDNO:12核苷酸序列5’端标记VIC，3’端标记MGBNFQ；
和/或，所述特异性引物SEQIDNO:1、2、4、5、7、8、10、11和所述探针SEQIDNO:3、6、9、12的长度为10-50nt；
和/或，所述试剂盒中还包含下述组成部分：dNTP混合溶液、MgCl2溶液、DNA聚合酶、PCR反应缓冲液、PCR去离子水；
和/或，所述试剂盒中还包含下述组成部分：组织基因组D...

【专利技术属性】
技术研发人员：王志强，万季，潘晓新，夏迪，金泰庆，蔡雪儿，罗海燕，王一杏，关建洪，王弈，宋麒，
申请(专利权)人：深圳市新合生物医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44