一种γ-谷氨酰甲胺合成酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种γ‑谷氨酰甲胺合成酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO:5，与野生型γ‑谷氨酰甲胺合成酶相比，提高了催化谷氨酸钠和乙胺反应生产茶氨酸的酶活力，最高可以生成63.01g/L的L‑茶氨酸，产物生成率超过90％，产物ee值超过99％，具有较好的工业化开发应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种γ-谷氨酰甲胺合成酶突变体及其应用
本专利技术属于酶催化
，具体地说，涉及一种γ-谷氨酰甲胺合成酶突变体、及其用于酶法催化谷氨酰胺与乙胺发生缩合反应生成L-茶氨酸的用途。
技术介绍
茶氨酸(Theanine)是1950年日本学者酒户弥二郎首次从绿茶中分离出来的，在自然界它仅存在于茶植物中，占茶叶干重的1％～2％，它以一种游离的形式存在而且是茶叶中主要的氨基酸，占所有游离氨基酸的50％左右。茶氨酸为人体所必需，但人体内不能合成，要靠外界供给。自然界中存在的茶氨酸均为L型，化学名为N-乙基-γ-谷氨酰胺，纯品为白色针状晶体，熔点217-218℃，比旋光[α]D＝+7.7-8.5，分子量为174.2。茶氨酸极易溶于水，不溶于乙醇和乙醚，有茚三酮反应，加热后可生成紫色物质，跟碱式碳酸酮反应后可生成浅紫色柱状铜盐，可被25％硫酸或6M盐酸水解成L-谷氨酸和乙胺。目前茶氨酸的制备方法主要有三种：植物提取法、化学合成法、酶催化合成法。植物提取法主要以茶叶为原料采用碱式碳酸酮沉淀法或离子交换分离提取法两种方法进行提取，其中离子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种γ-谷氨酰甲胺合成酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO:5。/n

【技术特征摘要】
1.一种γ-谷氨酰甲胺合成酶突变体，其氨基酸序列为SEQIDNO:5。


2.编码如权利要求1所述γ-谷氨酰甲胺合成酶突变体的基因。


3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，核苷酸序列为SEQIDNO:6。


4.包含如权利要求2或3所述基因的质粒。


5.转化了如权利要求4所述质粒的微生物。


6.如权利要求5所述的微生物，其特征在于，是所述微生物选自大肠杆菌、毕赤酵母、枯草芽孢杆菌。


7.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：范文超，王金刚，梁岩，高书良，
申请(专利权)人：浙江华睿生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33