【技术实现步骤摘要】
本专利技术属检测方法。对转基因棉花抗虫性的检测，目前国内外采取两种方法，即分子检测和生物学测定。分子检测要使用一些精密仪器和同位素，操作复杂，一般由分子生物学研究人员完成。生物学测定，一方面需要饲养棉铃虫，另一方面需种子长成植株后才能鉴定，另外环境气候还造成检测结果不准确。种子经营和基层育种单位一般不具备分子检测的条件，他们虽然具备生物学测定的条件，但种子单位无法在购种时检测种子是否抗虫，育种单位无法在选择单株时确定所选种子是否抗虫。因此，目前的方法不能满足科研生产单位对转基因棉花抗虫的检测。本专利技术的目的就是为种子和育种单位提供一套快速检测转基因棉花抗虫检测试剂及检测方法。本专利技术包括试剂盒、试剂制备方法和检测方法。试剂盒由4支5ml离心管、1支10ml离心管和支持膜组成，可以放置在一个塑料包装袋内，也可以组成一个盒。这5个离心管和支持膜的组成成份如下。1.对照液，体积1ml，将0.875mg纯化毒蛋白溶于0.5mol/L磷酸缓冲液中。毒蛋白通过苏云金杆菌HD-1菌株发酵制备并提纯。2.提取液，体积10ml，使用时蒸馏水稀释10倍。其成份内含5g聚山梨醇脂20，0.5mol/LTris-HCl，pH值7.9，1.5mol/L NaCl。3.支持膜，5张，每张82mm2，为国产或进口硝酸纤维素膜。4.封闭剂，体积5ml，用时蒸馏水稀释10倍。其成份跟提取液基本相同。再加入7.5g胎牛血清蛋白。5.酶标抗体，体积0.5ml，使用时用提取液稀释500倍。制备方法为，用提纯抗原免疫日本大耳白兔，纯化高效价IgG抗体，用过碘酸法标记辣根过氧化物酶，再加入...
【技术保护点】
一种转基因棉花抗虫检测法，检测试剂主要由对照液、提取液、支持膜、封闭剂、酶标抗体和显色液组成，其特征在于将种子或叶片提取液加在支持膜上，在封闭剂和酶标抗体液中温育后，再由显色液显色，以测定棉花是否抗虫。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：沈法富，于元杰，尹承佾，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]
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