冷薄荷醇受体TRPM8的低分子量调节剂的检测和用途制造技术

本发明专利技术涉及冷薄荷醇受体TRPM8的低分子量调节剂的检测和用途。具体而言，本发明专利技术涉及冷薄荷醇受体TRPM8的新调节剂，使用这些调节剂调节TRPM8受体的方法；所述调节剂用于诱导冷感觉的用途；以及使用这些调节剂制备的物品和工具。

【技术实现步骤摘要】
冷薄荷醇受体TRPM8的低分子量调节剂的检测和用途本申请为中国专利技术申请201710396933.0的分案申请，该中国专利技术申请201710396933.0为中国专利技术专利申请201410336374.0的分案申请，所述中国专利技术专利申请201410336374.0是2009年8月26日提交的、专利技术名称为“冷薄荷醇受体TRPM8的低分子量调节剂的检测和用途”的PCT申请PCT/EP2009/061019的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段的日期为2011年2月28日，申请号为200980133390.7。
本专利技术涉及冷薄荷醇受体TRPM8的新型调节剂，使用这些调节剂调节TRPM8受体的方法；所述调节剂诱导冷感觉的用途；以及使用这些调节剂制备的物品和组合物。
技术介绍
冷薄荷醇受体TRPM8(也称为冷膜受体(CMR)1)属于“瞬时受体电位离子通道”家族，在一类特定的神经元中表达，在细胞膜中形成空穴(在各种情况下4个单元结合形成四聚体)，其选择性的允许Ca2+离子通过。所述蛋白具有6个跨膜结构域以及胞质C和N末端。低温(优选10-25℃)能刺激该受体，产生信号转导，所述信号被神经系统理解为冷感觉。该受体在2002年在多篇出版物中首次被描述为冷觉受体(PeierAM等，感觉冷刺激和薄荷醇的TRP通道，2002Mar8；108(5):705-15；McKemyDD等，冷受体的鉴定揭示了TRP通道在热感觉中的普遍作用，Nature.2002Mar7；416(6876):52-8；ZukerCS.神经生物学：冷离子通道，Nature.2002Mar7；416(6876):27-8)。致冷的化合物，例如薄荷醇，很长时间以来在调味剂和芳香剂工业中具有重要作用，以产生新鲜和清洁感的结合。对于化合物薄荷醇来说，已显示其作为受体TRPM8的天然调节剂起作用(McKemyD.D.,MolecularPain1,2005,16；McKemyD.D.,Nature416,2002,52-58；PeierA.M.,Cell108,2002,705-715；DhakaA.,Annu.Rev.Neurosci.29,2006,135-161)。通过应用薄荷醇，激活TRPM8，使得Ca2+流入冷敏神经元中。产生的电信号最终被感知为冷感觉。薄荷醇浓度升高可导致刺激和麻醉效应。此外，许多出版物描述了具有类似效应的薄荷醇衍生物(英国专利1971#1315761；WatsonH.R.,J.Soc.Cosmet.Chem.29,1978,185-200；FurrerS.M.,Chem.Percept.1,2008,119-126)。还有结构上与薄荷醇不相关的个别化合物也产生了显著的TRPM8调节效应，例如Icilin(WeiE.T.,J.Pharm.Pharmacol.35,1983,110-112；WO2004/026840)、WS-23或专利申请WO2007/019719中所列的化合物。调节TRPM8受体和/或其昆虫中的类似物的物质的另一种效应是对昆虫的驱除作用(WO2002/015692；WO2004/000023、US2004/0028714)，其在抗肿瘤治疗(例如影响前列腺肿瘤)、炎性疼痛/痛觉过敏的治疗中也具有活性，并且可用作TRPM8拮抗剂来有效治疗膀胱综合征或膀胱活动过度(BeckB.CellCalcium,41,2007,285-294；LevineJ.D.Biochim.Biophys.Acta,Mol.BasisDis.1772,2007,989-1003；MukerjiG.,BMCUrology6,2006,6；US2003/0207904；US2005/6893626,DissertationBehrendtH.J.2004,Bochum；LashingerE.S.R.Am.J.Physiol.RenalPhysiol.AmJPhysiolRenalPhysiol.2008Jun18.[在出版之前的电子版]；PMID:18562636)。然而，迄今为止许多TRPM8调节剂在效应强度、效应持续时间、皮肤/粘膜刺激、气味、味觉、溶解性和/或挥发性方面仍具有缺陷。
技术实现思路
因此，本专利技术的一个目的是鉴定调节TRPM8受体的新物质，其可用作迄今已知的调节剂的备选物。这些化合物还应当尤其适用于化妆品(例如护发、护肤、口腔护理)、营养品(饲料/食物)、纺织品、OTC产品(例如烧伤软膏)、药物(例如肿瘤治疗、膀胱虚弱)、包装领域或作为杀虫剂或驱虫剂。专利技术详述:1.通用术语定义：在文献中，"TRPM8"有多个同义词：TRPP8、LTRPC6、CMR1、MGC2849、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员8。在本专利技术的背景中，涵盖所有的名称。该受体的所有功能性修饰也包括在内，例如尤其是剪接变体，亚型，例如TRPM8CRA_a、TRPM8CRA_b，和来自各种生物体例如人、小鼠、大鼠中的所有类似受体。不同受体的核苷酸和氨基酸序列是本身已知的，在序列数据库中列出。因此，例如hTRPM8的序列信息可以登录号NM_024080表示。在本专利技术的内容中，“调节剂”是指能在体内和/或体外作为TRPM8受体激动剂和/或拮抗剂起作用的化合物。在本文中适当的调节剂可仅作为拮抗剂或激动剂起作用，或同时作为拮抗剂和激动剂起作用，此时，产生激动效应或拮抗效应取决于选择的具体调节剂的浓度。在本文中，“激动剂”是指介导TRPM8受体活化，由此诱导Ca2+进入冷敏神经元，从而介导冷感觉的化合物。相反，“拮抗剂”是指阻碍TRPM8受体活化的化合物。本专利技术的介导物可通过可逆或不可逆、特异性或非特异性结合TRPM8受体分子发挥其作用。通常，与受体分子的结合通过离子和/或非离子的例如疏水作用而非共价性的发生。在本文中，“特异性的”包括与一种或多种不同的TRPM8受体分子(例如不同来源或不同亚型的TRPM8分子)排他性的相互作用。相反，“非特异性的”是指所述调节剂与多种不同功能和/或序列的受体分子相互作用，但是可产生对TRPM8所希望的受体激动和/或拮抗调节(如上文所述)。2.优选的实施方案本专利技术首先涉及体外或体内调节冷薄荷醇受体TRMP8的方法，尤其是人TRPM8受体，其中所述受体与至少一种选自多环有机化合物的化合物接触，所述化合物在使用重组表达人TRPM8受体的细胞进行的细胞活性测试中、特别是在标准条件下调节了这些细胞对Ca2+离子的通透性。在该部分中，“标准条件”理解为表示使用经人TRPM8转化的HEK293细胞进行的实验，该细胞加载了钙敏感染料(例如Fluo-4AM,即氟-4-乙酰氧基甲基酯)后加入测试化合物，并检测颜色变化，实验过程在37℃进行，如下文实施例3所述，或参见Behrendt等(2004)，见上文)。特别的，所述调节化合物包含至少2个4-至7-元环，其各自独立地为碳环或杂环、单环或多环，其中在这些环中至少2个可任选稠合或螺连接。合适的环连接的其他非限制性实例包括环碳原本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.体外调节冷薄荷醇受体TRMP8的方法，其中所述受体与至少一种选自以下的化合物接触，所述化合物在使用重组表达人TRPM8受体的细胞进行的细胞活性测试中调节了这些细胞对Ca

【技术特征摘要】
20080826 EP 08162997.41.体外调节冷薄荷醇受体TRMP8的方法，其中所述受体与至少一种选自以下的化合物接触，所述化合物在使用重组表达人TRPM8受体的细胞进行的细胞活性测试中调节了这些细胞对Ca2+离子的通透性：











2.如权利要求1所述的方法，其中所述调节剂对于细胞Ca2+离子通透性具有激动或拮抗效应。


3.TRPM8受体调节剂在制备诱导人和/或动物的冷感觉的组合物中的用途，其中所述调节剂如权利要求1所定义。


4.TRPM8受体调节剂在制备用于前列腺癌治疗、膀胱虚弱治疗或疼痛治疗的组合物中的用途，其中所述调节剂如权利要求1所定义。


5.TRPM8受体调节剂在制备作为昆虫驱虫剂或杀虫剂的组合物中的用途，其中所述调节剂如权利要求1所定义。


6.TRPM8受体调节剂在诱导包装的冷感觉中的用途，其中所述调节剂如权利要求1所定义。


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【专利技术属性】
技术研发人员：T·萨布科夫斯基，C·博尔施韦勒，J·维特恩伯格，M·克龙，H·青克，
申请(专利权)人：巴斯夫欧洲公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE