一种用于检测甲胎蛋白异质体的方法技术

涉及一种医学检测法。检测甲胎蛋白异质体的方法是将醋酸纤维素膜条带两端浸泡于缓冲液中，后吸干，取待检血清与植物凝聚素预先混合，再将混合血清滴加到醋酸纤维素膜的一端，另一端加标记抗甲胎蛋白抗体，通电电泳，后观察结果。因血清与植物凝聚素预先混合，即让甲胎蛋白异质体与植物凝聚素预先结合，再用电泳分离此结合物，故检测快速，不需制备传统的琼脂糖，有利于标准化和工业化生产，不存在放射性污染，节省设备，降低成本。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种医学检测方法。甲胎蛋白(AFP)检测是用于肝癌早期诊断的首要方法，甲胎蛋白异质体的检测是目前用于区分肝癌和非癌所产生的甲胎蛋白的唯一方法。在第四届全国肝癌学术交流会上，已作为原发性肝癌的诊断标准，推荐给医师使用。崔贞福等(中华医学检验杂志，1986，9(3)154-155)介绍了亲和交叉免疫电泳自显影法检测甲胎蛋白糖链异质体。关赛芳等(肿瘤，1990，10(1)38-39)介绍了Western免疫酶标印迹法鉴别异源性AFP分子变异体。韩玲，等(上海免疫学杂志，1993，13(4)227-228)介绍了人甲胎蛋白异质体直接固相时间分辨荧光免疫测定。目前使用的检测方法，主要存在的问题是1)检测花费时间多，需要3天才能出结果。2)需要使用放射性同位素，因此无论在试剂制备(125-碘标记抗甲胎蛋白抗体)，还是在医院使用，都存在同位素污染的问题。3)在制备含凝聚素的琼脂糖胶时，质量不容易控制；因为凝聚素是一种植物蛋白，对热敏感，而琼脂糖胶在50℃以下，就会凝固。因此，制备时要在不低于56℃时加入凝聚素，质量不容易控制。此外，受不同批号的凝聚素、琼脂糖和聚合度的影响，使检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测甲胎蛋白异质体的方法，其特征在于１）将醋酸纤维素膜条带的两端浸泡于巴比妥缓冲液中，取出后吸干；２）取待检血清１～２０μＬ与１～５ｍｇ／ｍＬ的植物凝聚素１～１０μＬ预先混合，在室温下放置待用；３）将混合血清滴加到醋酸纤 维素膜的一端，在另一端滴加标记抗甲胎蛋白抗体，再吹干；４）将加好待测样品的醋酸纤维素膜放在电泳槽上，并通电电泳；５）电泳后取下醋酸纤维素膜，用生理盐水浸泡洗涤，吸干后观察结果：若为甲胎蛋白异质体阳性的肝癌血清，则有２条带；而其他甲胎 蛋白阳性的肝病病人血清，则仅有１条带；甲胎蛋白阴性的病人不出现条带。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：廖绵初，干侣仙，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]