一种水产品中兽药分布的成像检测试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了检测水产品中兽药分布的方法和试剂盒，其中，该方法包括：对所述水产品进行切片处理，以便选取待测切片；将所述待测切片进行敞开式质谱成像检测，以便得到质谱检测信息；以及基于所述质谱检测信息，以便获得所述水产品的兽药分布信息。该方法通过对待测水产品进行切片，通过对切片的观测自由选择待测切片进行检测，并利用敞开式质谱进行成像检测，操作简单、分析时间短、无须或仅很少的样品需预处理、样品用量少，实现了水产品中兽药及其代谢物的可视化，分析时间短，检测速度快。

【技术实现步骤摘要】
一种水产品中兽药分布的成像检测试剂盒和方法
本专利技术涉及分析化学领域，具体地，涉及检测水产品中兽药分布的方法和检测水产品中兽药分布的试剂盒。
技术介绍
我国水产品质量安全水平呈稳定提升，但硝基呋喃类药物、孔雀石绿和磺胺类兽药残留超标事件仍时有发生。因此，需研究兽药在水产养殖动物中的分布与代谢规律，从而保证鲜活水产品的质量安全。孔雀石绿(malachitegreen，MG)是水产养殖中禁用的一种三苯基甲烷类工业染料，能有效地的防治鱼类外部真菌、原虫感染等疾病。孔雀石绿多用于水产动物的繁殖、消毒和运输等环节。另一方面，孔雀石绿和其主要代谢产物隐色孔雀石绿(leucomalachitegreen，LMG)对人体具有致畸、致癌、致突变的“三致”作用，因此，MG禁止用于所有动物食品中。但是，由于孔雀石绿抗菌效果好、价格低廉，在水产养殖中仍有违规使用的情况。人类食用抗生素残留超标的食物，可能会造成体内菌群失衡，耐药菌株产生，中枢神经系统毒性，更有甚者引发变态反应。因此实现食品中痕量兽药残留的快速检测，挖掘残留兽药在生物体内的分布规律，对保障食品安全、协助食品安全监管具有重要意义。传统的兽药分析方法，如酶联免疫吸附法(ELISA)，气相色谱-质谱(GC-MS)，高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UV)和液相色谱-质谱或串联质谱(LC-MS，LC-MS/MS)可用于(半)定量分析残留含量。然而，这些方法都需要复杂的样品制备，耗时费力，占用大量实验资源。例如，LC-MS必须经过复杂的样品提取和纯化过程，防止干扰物质对分析的影响，同时防止杂质污染仪器。通常这些方法是首先进行组织匀浆，导致样品中分析物的空间分布信息难以精确获得。由此，检测水产品中兽药分布的方法有待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种检测水产品中药物分布的方法，该方法实现了水产品中兽药及其代谢物的可视化，分析时间短，检测速度快。根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种检测水产品中兽药分布的方法。根据本专利技术的实施例，该方法包括：对所述水产品进行切片处理，以便选取待测切片；将所述待测切片进行敞开式质谱成像检测，以便得到质谱检测信息；以及基于所述质谱检测信息，以便获得所述水产品的兽药分布信息。根据本专利技术实施例的检测水产品中兽药分布的方法，通过对待测水产品进行切片，通过对切片的观测自由选择待测切片进行检测，并利用敞开式质谱进行成像检测，操作简单、分析时间短、无须或仅很少的样品需预处理、样品用量少，实现了水产品中兽药及其代谢物的可视化，分析时间短，检测速度快。另外，根据本专利技术上述实施例的检测水产品中兽药分布的方法，还可以具有如下附加的技术特征：根据本专利技术的实施例，所述切片处理包括：将所述水产品进行冷冻，以便得到冷冻水产品；；将所述冷冻水产品进行冷冻切片，以便得到切片样本；以及将所述切片样本进行显微观察，以便选取所述待测切片。根据本专利技术的实施例，所述切片样本的厚度为25-35μm。根据本专利技术的实施例，所述敞开式质谱成像检测为基质辅助激光解吸飞行时间质谱成像(MatrixAssistedLaserDesorptionIonization-TimeofFlightMassSpectrometryImaging，MALDI-TOFMSI)检测。根据本专利技术的实施例，所述敞开式质谱成像检测包括：将所述待测切片进行多次基质喷涂处理，以便得到喷涂后切片；利用成像显微镜对所述喷涂后切片进行质谱成像检测，以便得到所述质谱检测信息。根据本专利技术的实施例，所述基质喷涂处理的喷雾基质为含有α-氰-4-羟基肉桂酸的基质溶液。根据本专利技术的实施例，所述基质溶液的α-氰-4-羟基肉桂酸的浓度为15-25mg/mL。根据本专利技术的实施例，所述多次基质喷涂处理为10-15次。根据本专利技术的实施例，所述成像显微镜为iMScopeTRIO显微镜。根据本专利技术的实施例，所述成像显微镜的工作参数为：离子源：300-400nm脉冲激光光源；所述聚焦激光的工作参数为：频率0-1000Hz，激光强度0-25.0，激光步距10-100μm；最小激光斑点直径：不大于5μm。根据本专利技术的实施例，所述敞开式质谱成像检测的质谱条件：离子极性：正离子；质量范围：m/z100-2000Da；样品电压：3.5kV；检测器电压：1.90kV。根据本专利技术的实施例，所述食品为肉类和水产品。根据本专利技术的实施例，所述兽药为硝基呋喃类兽药、孔雀石绿和磺胺类兽药。进一步地，根据本专利技术的又一方面，本专利技术提供了一种检测水产品中兽药分布的试剂盒。根据本专利技术的实施例，该试剂盒包括前述的检测水产品中兽药分布的方法中所使用的试剂、标准品、辅助材料或其中至少一项的组合。由此，该试剂盒通过对待测水产品进行切片，通过对切片的观测自由选择待测切片进行检测，并利用敞开式质谱进行成像检测，操作简单、分析时间短、无须或仅很少的样品需预处理、样品用量少，实现了水产品中兽药及其代谢物的可视化，分析时间短，检测速度快。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1显示了根据本专利技术一个实施例的检测水产品中兽药分布的方法的流程示意图；图2显示了根据本专利技术一个实施例的不同基质对于孔雀石绿质谱信号的影响的结果示意图；图3显示了根据本专利技术一个实施例的孔雀石绿以及隐色孔雀绿MALDI质谱图以及二级质谱图结果示意图，其中，a为孔雀石绿的质谱图，b为孔雀石绿的二级质谱图，c为隐色孔雀石绿的质谱图，d为隐色孔雀石绿的二级质谱图；图4显示了根据本专利技术一个实施例的鲫鱼样品及冷冻切片示意图，其中，a为鲫鱼样品，b为冷冻切片；图5显示了根据本专利技术一个实施例的不同组织中孔雀石绿及其代谢产物的空间分布的结果示意图，其中，a为图4b中1区域显微镜光学成像图；b为图4b中2区域显微镜光学成像图；c为图5a对应区域孔雀石绿质谱成像图及分布(m/z＝329.20)；d为图5b对应区域孔雀石绿质谱成像图及分布；e为图5a对应区域隐色孔雀绿质谱成像图及分布(m/z＝331.20)；f为图5b对应区域隐色孔雀绿质谱成像图及分布。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本专利技术的描述中，除非另有说明本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测水产品中兽药分布的方法，其特征在于，包括：/n对所述水产品进行切片处理，以便选取待测切片；/n将所述待测切片进行敞开式质谱成像检测，以便得到质谱检测信息；以及/n基于所述质谱检测信息，以便获得所述水产品的兽药分布信息。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测水产品中兽药分布的方法，其特征在于，包括：
对所述水产品进行切片处理，以便选取待测切片；
将所述待测切片进行敞开式质谱成像检测，以便得到质谱检测信息；以及
基于所述质谱检测信息，以便获得所述水产品的兽药分布信息。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述切片处理包括：
将所述水产品进行冷冻，以便得到冷冻水产品；
将所述冷冻水产品进行冷冻切片，以便得到切片样本；以及
将所述切片样本进行显微观察，以便选取所述待测切片，
任选地，所述切片样本的厚度为10-100μm。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述敞开式质谱成像检测为基质辅助激光解吸飞行时间质谱成像检测。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述敞开式质谱成像检测包括：
将所述待测切片进行多次基质喷涂处理，以便得到喷涂后切片；以及
利用成像显微镜对所述喷涂后切片进行质谱成像检测，以便得到所述质谱检测信息。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述基质喷涂处理的喷雾基质为含有α-氰-4-羟基肉桂酸的基质溶液，
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张峰，贺木易，杨敏莉，刘通，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11