多层试剂测试条和用它量度生理样品中糖化蛋白的方法技术

提供了为量度流体样品中糖化蛋白的多层试剂测试条，以及使用它的方法。本发明专利技术的多层测试条至少包括一个滤器层、一个蛋白酶层和一个酮胺氧化酶信号产生和流体流动控制系统层。在使用本发明专利技术的测试条时，把流体样品加到测试条上，信号随之产生，此信号可被利用来量度样品中的糖化蛋白的水平。定量化的糖化蛋白水平随后可用来测定流体样品中糖化蛋白的量。还提供的有包括本发明专利技术的测试条和用于实施本发明专利技术的方法的成套器件和系统。除其它功用外，本发明专利技术的组成和方法还可应用于糖化蛋白监测用途。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术的领域是被分析物检测，特别是糖化蛋白的检测。
技术介绍
患有糖尿病的人，由于胰腺不能分泌足够量的活性激素胰岛素到血流中以调节碳水化合物的代谢，所以通常都有异常高的血糖水平。假若异常高的血糖水平，已知为高血糖状态，再持续更长的时间，则患者将会受到糖尿病慢性并发症的威胁，包括视网膜病、肾病、神经病和心血管疾病等。研究指出，能维持接近正常的血糖控制的糖尿病患者会大大减少这些可怕并发症的可能性。因此，开发出了几种测试法用来测量和控制血糖的情况。为控制血糖状况的一种通常的医学测试方法是直接测量糖尿病患者的血葡萄糖水平。由于血葡萄糖水平在一天中会有明显的波动，受到饮食、活动和治疗的影响，依赖于患者病例的状况和严重性，有的病人测量他们的血葡萄糖一天多达七次。基于测量葡萄糖的观察模式，病人和医师一起做了饮食、锻练和胰岛素摄入的调整，以便更好地控制疾病。显然，这种信息应当立刻提供给病人。然而，由于在一天中葡萄糖水平时常发生变动，依赖于病人的饮食、活动和/或治疗并且提供较长时期血葡萄糖水平指示的测试法也已被开发。这些测试方法测量的是糖化蛋白或“蛋白结合葡萄糖”(PBG)的浓度。比如那些出现在全血、血浆和其他生物流体中的蛋白质，在非酶作用的情况下，可与葡萄糖发生反应而产生糖化蛋白。反应的程度直接取决于血液中的葡萄糖浓度。最初开发的糖化蛋白的测试法之一是测量糖化血红蛋白，即血红蛋白A1c(HbA1c)，它反映的是约2到3个月期间的血糖控制情况。其他这类测试法测量血清蛋白，例如总糖化血清蛋白，或特异的糖化血清蛋白，即糖化白蛋白。糖化白蛋白反映2到3周期间内对血糖控制的居中情况。还有另一种间接评定血糖浓度的方法就是分析糖化蛋白浓度。在体内血浆蛋白被糖化是通过葡萄糖和可利用的血蛋白的氨基之间主要是与赖氨酸残基的γ-氨基和蛋白质末端氨基酸上的α-氨基之间发生的非酶反应。葡萄糖结合到蛋白质的氨基上形成席夫碱，即醛亚胺，它再经历分子重排形成稳定的酮胺。在本领域中，这类酮胺一般已知为“果糖胺”。蛋白质糖化及果糖胺形成的程度是与血葡萄糖浓度成正比的。血清或血浆糖化蛋白水平的测量对于监测糖尿病的控制是有用的，因为在血清或血浆中糖化蛋白的浓度反映了大约半个月期间内血葡萄糖水平的平均数。一种当前使用的化验方法提供血液糖化蛋白水平的准确测定，这就是Genzyme公司现在在市场上销售的GlyProTM化验，在美国专利号6,008,006中描述了这种化验方法。虽然这种化验方法提供了准确的分析结果，但它需要在临床实验室中由经过培训的技术人员使用复杂的仪器才能完成，因此不适合家庭或医师办公室使用。美国专利号5,470,752；5,695,949和5,725,774描述一种用于果糖胺定量的多层试剂测试条，此测试条是为家庭或医师办公室使用而设计的。然而，用此处所描述的测试条所提供的检测不太准确，因为除了果糖胺分析物之外，在流体样品中的其他物质也与信号产生系统起反应，而且影响到由此产生的信号，导致用这种测试条在最终果糖胺定量测定时的不准确。因此，需要继续关注另外的适合于糖化蛋白定量测定的多层试剂条形式的开发，这种测试条适合于家庭或医师办公室使用，而且提供高度准确的测量，与当前使用的基于临床实验室的方案所得到的一致。相关文献有关的美国专利包括5,470,752；5,695,949；5,725,774；6,008,006。有关的还有WO 96/31270；WO 96/31619；WO 96/34977；EP821064；和EP 737744。
技术实现思路
提供了一种多层试剂测试条，用于定量测定流体样品中的糖化蛋白，以及使用它的方法。本专利技术的多层测试条包括至少一个滤器层，一个蛋白酶层和一个产生酮胺氧化酶信号和流体流动控制系统层。在使用本专利技术的测试条时，把流体样品加到测试条上，然后就产生可被用来定量测定样品中糖化蛋白水平的信号。还提供了成套器件和系统，其包括本专利技术的测试条并用于实施本专利技术方法。本专利技术的组成和方法除了其他用途尤其可应用于糖化蛋白的监测。附图简述附图说明图1提供了按照本专利技术的一个具体实施方式的多层试剂测试条的分解视图。图2提供的是用单层血液分离层构造的测试条完成的化验图示结果。图3提供的是用双层血液分离层构造的化验图示结果。具体实施例方式提供了为定量测量流体样品中糖化蛋白的多层试剂测试条及其使用方法。本专利技术的多层测试条包括至少一个滤器层，一个蛋白酶层，和一个产生酮胺氧化酶信号的流体流控制系统层。在使用本专利技术的测试条时，将流体样品加到测试条上，然后产生信号，此信号可用来定量测量样品中糖化蛋白水平。还提供了成套器件和系统，其包括本专利技术的测试条并用于实施本专利技术方法。除了其它用途，本专利技术的组成和方法尤其可应用于糖化蛋白的监测。在进一步描述本专利技术之前，需要说明的是本专利技术不仅限于以下所描述的本专利技术的具体实施方式，因为这些具体实施方式可以做些改动，但仍然落在附加权限范围之内。还需要说明的是使用术语的目的是为了描述具体实施方式，而并不是意在限制。换句话说，现在本专利技术的覆盖范围将由附加权限设定。在本说明书和附加权限中，单数形式的“一个”、“一种”和“所述的”都包含了复数的指代物，除非上下文中另外明确说明。除非另有说明，否则在此处使用的所有技术术语和科学术语，都与在本专利技术所属领域中的普通技术人员的一般理解的含意相同。当提供了一个数值范围时，应理解的是，在该范围的上下限之间的每一居中值(至下限单位的十分之一位，除非另外规定)以及该范围中的任何其它所述值或居中值都包含在本专利技术内。这些较小范围的上下限可以被独立地归入所述的较小范围中，并且也包含在本专利技术内，服从于所述范围中的任何具体排除的限制。当所述范围包括一个或两个所述限值时，排除其中任一个或全部两个的范围也将包括在本专利技术内。除非另外指定，否则此处所使用的所有的技术术语和科学术语都与本专利技术所属的
中的普通技术人员的理解具有相同的意义。尽管相似或等同于此处所描述的那些的任何方法、装置和材料都可用于本专利技术的实施或测试，但是优选的方法、装置和材料是现在所描述的。此处提到的所有出版物都作为参考引入本专利技术中，目的是描述和披露元件范围(cell lines)、向量和方法，这些都是在所述出版物中介绍的，可以与目前描述的专利技术联合使用。如同上面所概述的那样，本专利技术提供了多层试剂测试条，为的是定量测量样品中的糖化蛋白，以及提供了包括本专利技术的测试条的系统和成套器件。在本专利技术的进一步描述中，首先详尽介绍了测试条，然后是对使用测试条定量测定糖化蛋白水平的方法的综述。最后，还提供了依照本专利技术的代表性系统和成套器件的综述。多层试剂测试条如同上面所概述的，本专利技术提供了多层试剂测试条，本专利技术的测试条用于定量测量流体组分中的糖化蛋白，下面将更详细的描述。本专利技术的试剂测试条是多层的试剂测试条，这意谓本专利技术的试剂测试条包括多个不同的层，其中流体按顺序流过各层，使得加到多层中首层的流体按顺序地顺续流过所述多层的其余层。构成本专利技术的测试条的相异层数目可以改变，通常范围约为2到10，在许多实施方式里通常约为3到7。在许多实施方式中，本专利技术的测试条包括最少三个不同的层，按顺序这几个层是(a)为从血浆中分离红细胞的血液滤器层；(b)蛋白酶层；和(c)产生本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多层测试条，包含：（ａ）血液分离组件，用于从血浆分离红细胞；（ｂ）蛋白酶层，与所述的血液分离组件流体联通；和（ｃ）酮胺氧化酶信号产生系统层，与所述的蛋白酶层流体联通。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱苏月，S郭，KW梁，
申请(专利权)人：生命扫描有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]