松材线虫检测试剂盒，包括以下成分： １）松材线虫与拟松材线虫特异性引物序列： 上游引物Ｐ１：５′－ＧＡＴＧＡＴＧＣＧＡＴＴＧＧＴＧＡＣＴ－３′ 上游引物Ｐ２：５′－ＴＧＴＴＴＧＡＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＡＣ－３′ 下游引物Ｐ３：５′－ＴＴＴＣＡＣＴＣＧＣＣＧＴＴＡＣＴＡＡＧＧ－３′ 其中Ｐ１／Ｐ３构成松材线虫特异性引物对，Ｐ２／Ｐ３构成拟松材线虫特异性引物对； ２）１．２５ｍｌ溶液Ⅰ，内含１ｍｌＷＬＢ和０．２５ｍｌ１ｕｇ／ｕｌ蛋白酶Ｋ，其中１ｍｌＷＬＢ（Ｗｏｒｍ Ｌｙｓｉｓ Ｂｕｆｆｅｒ）含有５００ｍＭ ＫＣｌ，１００ｍＭ Ｔｒｉｓ－Ｃｌ ｐＨ８．０，１５ｍＭ ＭｇＣｌ↓［２］，１０ｍＭ ＤＴＴ，４．５％（质量比，下文同）Ｔｗｅｅｎ２０，０．１％明胶和水； ３）１ｍｌ溶液Ⅱ，内含 ２×ＰＣＲ ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ，４．０ｍＭ ＭｇＣｌ↓［２］，０．２ｍＭ ｄＮＴＰ，０．８μＭ Ｐ↓［１］，０．８μＭ Ｐ↓［２］，０．８μＭ Ｐ↓［３］，１００Ｕ ｔａｑ酶，松材线虫和拟松材线虫对照ＤＮＡ各５０ｕｌ和水。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：林茂松，余本渊，王金成，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
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