多参数全面分析核酸以及同样样品上的形态学特征制造技术

公开了一种高敏感性的分析法，其利用了一种方法来从血液中发现的稀有细胞和稀有转录本进行基因特异性的ｍＲＮＡ库的引物扩增。该分析法通过免疫磁法富集的方式可以检测到１到１０个细胞分离的稀有的ｍＲＮＡ（１０个拷贝／细胞）。该分析法是多重ＰＣＲ的改进，可以有效检测血液中的循环癌细胞的稀有编码序列。该方法适用于分离自组织或体液的细胞的分析，以及作为临床检测各种癌的辅助手段，包括循环癌细胞的早期检测和分类。以传统的或者微阵列方式进行的细胞核酸和蛋白质图谱的监视，有助于治疗介入的管理，包括病情分期、治疗响应的监测、症状缓解的确认以及恢复的检测。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一般地涉及用于肿瘤领域和诊断测试的胞质生物分子的基因特异性扩增、分析和图谱。本专利技术特别适用于这些领域，如癌症普查、化疗选择和监测、或者癌症复发。更特别地，本专利技术提供了有助于来自生物样品的肿瘤细胞或其它稀有细胞的mRNA和DNA的全面分析的方法、装置和试剂盒，同时保持细胞的完整用于计数和形态图像分析。为实现这点，本专利技术也提供了方法以允许分析从细胞例如肿瘤细胞释放的可溶性胞质生物分子，其用渗透试剂来确定释放的核酸分子的表达谱，同时仍然保持细胞的形态学和抗原性特征以用于随后的或者并行的多参数流体细胞计数、成像、以及免疫细胞化学分析(参见US6,365,362)。本专利技术也提供了方法以允许使用由基于醛和醛-脲衍生物的固定剂稳定的样品进行同样的全面分析。相关现有技术的说明任何特定的细胞仅仅表达其基因组中存在的总基因的一部分。被表达的总基因的部分决定了细胞的功能，诸如发育和分化、自体调节、细胞循环的调节、老化、凋亡，等等。基因表达的改变决定了正常细胞发育的进程以及疾病状态例如癌症的出现。特异性基因的表达对于任何特定细胞的本质将具有深远的影响。因此，分析基因表达的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断受试患者的疾病严重性的方法，该方法包括：ａ．从疑有癌症的受试患者的血液中获得样品，样品包括怀疑包含上皮来源的癌细胞的混合细胞群体；ｂ．将所述样品与特异性结合所述癌细胞的免疫磁学微粒混合，基本排除其它样品组分； ｃ．将样品－免疫磁学微粒混合物经高梯度磁场处理以产生富集有磁微粒结合癌细胞的分离细胞部分；以及ｄ．分析所述富集部分中所述癌细胞的存在，所述样品中所述癌细胞的存在预示着癌症。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：SM奥哈拉，D兹维茨，B福尔克，
申请(专利权)人：免疫公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]