【技术实现步骤摘要】
一种检测β-半乳糖苷酶的荧光探针及其制备方法和应用
本专利技术属于化学分析检测
,涉及一种β-半乳糖苷酶的荧光增强型探针及其制备方法和在抑制剂筛选方面的应用。
技术介绍
β-半乳糖苷酶是一种水解糖苷键的水解酶,它广泛存在于各种动植物及微生物中,在维持正常的生命活动中具有重要作用。不仅如此,β-半乳糖苷酶的活性及含量还与多种疾病密切相关,例如卵巢癌、肾小管损伤、莫尔丘综合症、GM1神经节苷脂沉积症等。因此,发展一种廉价、高效、高灵敏度的检测方法用于β-半乳糖苷酶的活性检测和抑制剂筛选具有重要实际意义。到目前为止,传统的β-半乳糖苷酶检测技术包括磁共振、比色法、化学发光法、电化学法、荧光探针法等。其中,荧光探针法因其灵敏度高、选择性好、操作简便、响应速度快、检测效率高等优点称为医学领域的研究热点。虽然目前报道了较多的β-半乳糖苷酶的荧光探针,但这类探针的合成相对复杂,成本相对较高,并且探针主要用于β-半乳糖苷酶在细胞水平或活体水平的成像诊断。用于β-半乳糖苷酶抑制剂筛选方面的探针极少报道。因此,发展一种用于β-半乳 ...
【技术保护点】
1.一种检测β-半乳糖苷酶的荧光探针,其特征在于,其化学结构式如(I)所示:/n
【技术特征摘要】
1.一种检测β-半乳糖苷酶的荧光探针,其特征在于,其化学结构式如(I)所示:
2.一种权利要求1所述的检测β-半乳糖苷酶的荧光探针的制备方法,其特征在于,其合成路线如下:
具体步骤如下:
1)将2,4-二羟基苯甲醛、丙酸钠混合,再加入丙酸酐、三乙胺,加热回流1~3小时,发生关环反应,反应完全后冷却,析出大量白色固体,纯化处理得到化合物a;
2)将化合物a溶于甲醇中,加入K2CO3后,室温搅拌0.5~5小时,发生酯水解反应,反应完全后,用盐酸调节体系pH值至3-4,析出大量固体,将固体洗涤、真空干燥得到白色固体b;
3)将化合物b、Na2SO4和Cs2CO3溶于乙腈溶液中,搅拌5~10min,然后加入2,3,4,6-四乙酰氧基-alpha-D-吡喃糖溴化物,在氮气氛围下室温反应2~12小时,发生成醚反应,待反应完全后,萃取、洗涤、柱层析得到白色固体c;
4)将化合物c溶于甲醇中,加入甲醇钠后,室温搅拌1~3小时,发生脱乙酰基反应,反应完全后用稀盐酸调节pH值至6,提纯得到目标探针化合物d。
3.根据权利要求2所述的检测β-半乳糖苷酶的...
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