白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病的判定方法以及诊断药技术

本发明专利技术涉及以对造血干细胞生长因子（ＳＣＧＦ）进行定量为特征的对白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行判定的方法、对白血病与前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行区别的方法、对再生障碍性贫血和骨髓发育异常综合征进行区别的方法、对造血干细胞移植后的造血干细胞的存活的状态进行判定的方法、或对移植物抗宿主病进行判定的方法。还涉及作为有效成分含有与造血干细胞生长因子（ＳＣＧＦ）反应的抗体的白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病的诊断药、造血干细胞移植后的造血干细胞的存活延迟或移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的诊断药。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及以测定造血干细胞生长因子(SCGF)为特征的对白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行判定的方法、对白血病与前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行区别的方法、对再生障碍性贫血与骨髓发育异常综合征进行区别的方法、对造血干细胞移植后的造血干细胞的存活状态进行判定的方法、或对移植物抗宿主病进行判定的方法。另外，还涉及含有以与造血干细胞生长因子(SCGF)反应的抗体为有效成分的白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病、造血干细胞移植后的造血干细胞的存活状态或移植物抗宿主病的诊断药以及诊断试剂盒。
技术介绍
白血病、前白血病和非白血病性恶性血液疾病的诊断、或白血病、前白血病和非白血病性恶性血液疾病治疗后的诊断对于决定对白血病、前白血病和非白血病性恶性血液疾病进行治疗的方针是很重要的。作为白血病初发的诊断，有测定患者末梢血中的白细胞数，计测值超过正常值时，怀疑白血病发生的方法。然而，即使是感冒等白血病以外的疾病，由于体内免疫反应的亢进，白细胞数也会增大，所以仅凭白细胞数的测定，存在假阳性的可能性。另外，末梢血中白细胞数的正常值为4,000～8,000个/μL，范围很宽，也存在假阴性的可能性。因此，需要准确度更高的白血病的诊断方法。作为白血病复发的诊断方法有通过WT-1基因的RT-PCR进行的检测。然而该诊断方法不仅操作烦杂，而且需要特殊的装置。而作为上述的白血病、前白血病以及非白血病性恶性血液疾病、先天性代谢疾病、实体瘤等的治疗方法之一，有造血干细胞移植疗法。有关造血干细胞移植疗法的问题方面，如由于供者的造血干细胞与患者的造血干细胞的HLA配型不相合、患者一方的身体条件或感染症等，出现移植的造血干细胞不能存活的造血干细胞的存活延迟的移植物抗宿主病(以下称为GVHD)等，有时不能充分获得造血干细胞移植治疗的效果，最坏的时候还会出现死亡的危象。对于造血干细胞的存活延迟，可以通过向机体内给予G-CSF，促进造血干细胞的存活。另外对于GVHD，可以通过向机体内给予免疫抑制剂，抑制对提供的造血干细胞的排斥反应。然而，无论哪一种药剂过量给予时，都有副作用的危险。因此，对造血干细胞的存活状态、出现的GVHD症状进行诊断或预知对于治疗方针的决定是重要的。作为确认造血干细胞移植后的造血干细胞存活的方法，可以测定末梢血中的白细胞数或血小板数，如果这些测定值上升，可以诊断为造血干细胞存活。然而，由于造血干细胞的存活需要从移植后10日至1个月以上时间，通过测定末梢血中的白细胞数或血小板数不能在早期对造血干细胞的存活进行判断。作为GVHD发病的判定方法，有观察在造血干细胞移植后的恢复期出现的皮疹等。然而，简便、而且准确度高的GVHD发病的判定方法还没有。另外在GVHD发病以前预知GVHD发病的方法也没有。人造血干细胞生长因子(Stem Cell Growth Factor；以下、简记为SCGF)是具有序列1或序列2的氨基酸序列的蛋白质。作为识别SCGF的抗体，已知有可以通过使用基因重组法得到的SCGF、以及以从SCGF的N末端开始的第6位残基到第25位残基的部分肽作为免疫原制备的多克隆抗体以及从细胞培养上清进行部分纯化的SCGF或以通过基因重组法得到的SCGF作为免疫原制备的单克隆抗体。据报道该单克隆抗体具有中和活性，以通过基因重组法得到的SCGF作为免疫原制备的多克隆抗体在ELISA中可以与通过基因重组法得到的SCGF反应，通过使用以从SCGF的N末端开始的第6位残基至第25位残基的部分肽作为免疫原制备的多克隆抗体的Western印迹(blotting)可以检测通过基因重组法得到的SCGF。另外，以从SCGF的N末端开始的第6位残基至第25位残基的部分肽作为免疫原的抗SCGF单克隆抗体KM2142已有报道。据报道对人正常组织进行Northern印迹(blotting)，结果发现SCGF基因的表达在肾脏多，而在心脏少，而在脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、胰脏中没有表达，在脾脏、胸腺、盲肠、骨髓、胎儿肝中表达多，而在末梢血表达少。另外据报道对正常新生小鼠进行原位杂交，结果发现SCGF在骨髓、增殖软骨、骨膜附近表达。另外，据报道在骨髓细胞株(HT60、KPB-M15)、单核细胞株(THP-1、U-937)、成红细胞株(HEL)、成纤维细胞株(NHF)中发现了SCGF基因的表达，但在B细胞株(U266B1、IM-9)、T细胞株(MOLT-4)、成红细胞株(K562)、上皮系癌细胞株(HeLaS3、A431)、黑色素瘤细胞株(Bowes)、腺病毒转化胚胎性肾脏细胞株(293)、成纤维细胞株(CCD-8Lu)中没有发现SCGF基因的表达。然而、有关正常的和血液疾病的、或接受造血干细胞移植的包括人在内的动物的末梢血、骨髓中的血细胞的SCGF的mRNA量的差异还没有报道。组织或细胞的mRNA与编码的蛋白质的量的相关性低(相关系数＝0.48)，所以由SCGF的mRNA量推定SCGF蛋白质量是困难的。如上所述，有关包括人在内的动物的血清、血浆等体液和组织中的SCGF蛋白质的存在、功能、与疾病的关系还没有被阐明。本专利技术的目的在于提供白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病的判定、白血病与前白血病或非白血病性恶性血液疾病的区别、再生障碍性贫血与骨髓发育异常综合征的区别、造血干细胞移植后的造血干细胞的存活状态以及GVHD的判定的方法、以及白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病、造血干细胞移植后的造血干细胞的存活状态和GVHD的诊断药以及诊断试剂盒。
技术实现思路
本专利技术涉及以下(1)～(20)内容。(1)以测定机体样品中造血干细胞生长因子(SCGF)为特征的对白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行判定的方法。(2)以测定机体样品中造血干细胞生长因子(SCGF)为特征的对白血病和、前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行区别的方法。(3)以测定机体样品中造血干细胞生长因子(SCGF)为特征的对再生障碍性贫血和骨髓发育异常综合征进行区别的方法。(4)以测定机体样品中造血干细胞生长因子(SCGF)为特征的对造血干细胞移植后的造血干细胞的存活状态进行判定的方法。(5)以对机体样品中造血干细胞生长因子(SCGF)进行定量为特征的对移植物抗宿主病进行判定的方法。(6)上述(1)～(5)任一项所述的方法，其中判定或区别方法是免疫学的测定方法。(7)上述(6)所述的方法，其中免疫学的测定方法是夹层法(三明治法)。(8)上述(7)所述的方法，其特征是夹层法使用与造血干细胞生长因子(SCGF)的不同抗原表位反应的2种抗体。(9)上述(8)所述的方法，其中抗体是从多克隆抗体和单克隆抗体选出来的抗体。(10)上述(9)所述的方法，其中单克隆抗体是从可识别以序列1的6～28位的氨基酸序列表示的区域的单克隆抗体、识别以29～59位的氨基酸序列表示的区域的单克隆抗体以及60～302位的氨基酸序列表示的区域的单克隆抗体选出来的单克隆抗体。(11)含有以与造血干细胞生长因子(SCGF)反应的抗体作为有效成分的白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病的诊断药。(12)含有以与造血干细胞生长因子(SCGF)反应的抗体作为有效成分的造血干细胞移植后的造血干细胞的存活状态的诊断本文档来自技高网...

【技术保护点】
对白血病、前白血病或非白血病性恶性血液疾病进行判定的方法，其特征在于测定机体样品中造血干细胞生长因子ＳＣＧＦ。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：安藤洁，堀田知光，伊东千绘，佐藤秀尚，古谷安希子，设乐研也，杉本整治，河野弘明，
申请(专利权)人：学校法人东海大学，协和发酵工业株式会社，协和梅迪克斯株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]