一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用技术

一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用，属肿瘤多药耐药逆转剂筛选的技术领域。本发明专利技术的技术方案是构建转运蛋白高表达为特征的耐药细胞株，通过检测转运蛋白类底物荧光强度及其变化，确定待筛选的ＭＤＲ逆转剂对ＭＤＲ的逆转作用，实现对ＭＤＲ逆转剂的筛选。用上述方法工作的原理，可制成快速筛选ＭＤＲ逆转剂的试剂盒。本发明专利技术具有直观、快速、准确、高效、经济的优点。适合应用于高通量快速筛选ＭＤＲ逆转剂。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用，即涉及一种抗转运蛋白类介导的MDR逆转剂的筛选方法及应用，属肿瘤多药耐药逆转剂筛选的

技术介绍
肿瘤多药耐药性(Multidrug resistance，MDR)指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物耐药的同时对其它结构和作用机制相同或不同的抗肿瘤药物也产生了耐药性。肿瘤细胞产生MDR是化疗失败的重要原因，临床上许多肿瘤病患者因此对化疗不敏感，导致化疗效果差和肿瘤的复发或转移。从某种意义上说，90％死于恶性肿瘤的病例都与原发性或获得性耐药有关。人们已对MDR的发生机制进行了广泛的研究，总体看这是一种受多因素、多机制调控，主要表现为降低化疗药物的内流、减少细胞内的药物积聚、增加能量依赖性的药物主动外排、增强DNA修复活性、加强细胞解毒系统的作用和阻碍药物引起的凋亡等因素(见图1)。临床证实，结肠癌、肾癌、肝癌、非小细胞肺癌、神经角质瘤和kaposis肉瘤等实体瘤是容易产生MDR的恶性肿瘤，甚至在刚确诊时就有耐药性存在。进一步的研究发现这些肿瘤的肿瘤细胞常有P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)、多药本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法，其特征在于，转运蛋白指Ｐ－ｇｐ、ＭＲＰ、ＢＣＲＰ和ＬＲＰ，包括以下步骤：第一步构建转运蛋白高表达的耐药细胞株①构建含人肿瘤耐药相关的转运蛋白基因的真核表达质粒； ②转染人肿瘤细胞，如实体瘤或血癌，获得稳定高表达该转运蛋白的细胞株；③确定获得的转染细胞株具有高表达该转运蛋白，并具有相应的ＭＤＲ特性；第二步选择合适的荧光化合物作为转运蛋白的荧光底物第三步进行ＭＤＲ逆转剂的 筛选用待筛选化合物及荧光底物作用转染的耐药细胞，用荧光显微镜...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈菲，王弢，周捷，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]