PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用制造技术

本发明专利技术提供了PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用，属于食管癌检测和治疗技术领域，所述PIEZO1蛋白在食管癌组织中的表达量显著高于癌旁组织；通过检测PIEZO1蛋白的表达量能够辅助检测食管癌；通过降低所述PIEZO1蛋白的表达量能够治疗食管癌，降低所述PIEZO1蛋白的表达量能够抑制体外食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并且能够抑制体内肿瘤的生长；根据实施例的记载，降低PIEZO1蛋白的表达量后，体内肿瘤的体积和重量显著下调。

【技术实现步骤摘要】
PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用
本专利技术属于食管癌检测和治疗
，尤其涉及PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用。
技术介绍
食管癌的恶性程度在癌症中位列第八，是造成全世界癌症死亡的第六大主要原因。每年都有48万多的新确诊患者和约40万人的死亡。食管癌根据组织学类型可以分为两种：食管鳞状细胞癌、食管腺癌。其中的80％都为食管鳞状细胞癌。食管鳞状细胞癌的诱发因素主要有烟草，酒精，热饮以及不良饮食。到目前为止，食管癌的发病率还在持续的上升，对人类的威胁逐渐增大。80％的患者在确诊时处于晚期，并且大多数患者已不能进行手术治疗，因为很大一部分肿瘤无法切除或在确诊前已经转移。食管癌是一个多步骤的过程，涉及一系列的遗传和表观遗传的改变。对食管癌的研究目前已经报道很多，通过激活EMT途径，PI3K途径和P53信号通路等都可以影响食管癌的增殖，侵袭和迁移，但目前食管癌的预后仍然较差，5年内的总体存活率低至20％；所以亟待寻求对治疗食管癌新的靶点和策略。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供PIEZO1蛋白在制备检测食管癌的试剂、治疗食管癌的药物中的应用。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用。优选的，所述PIEZO1蛋白在食管癌组织中的表达量显著高于癌旁组织。本专利技术提供了一种食管癌检测试剂盒，包括检测PIEZO1蛋白的试剂。优选的，检测PIEZO1蛋白的试剂包括一抗和二抗；所述一抗为Piezo1兔源多克隆抗体；所述二抗为HRP-山羊抗兔。本专利技术提供了PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备治疗食管癌药物中的应用。优选的，所述抑制剂包括PIEZO1蛋白的干扰RNA。优选的，所述PIEZO1蛋白的干扰RNA的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示。优选的，所述抑制剂还包括Piezo1抑制慢病毒，所述Piezo1抑制慢病毒中重组有PIEZO1蛋白的干扰RNA。本专利技术还提供了PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备抑制食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭的药物中的应用。本专利技术还提供了PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备抑制体内肿瘤的生长的药物中的应用。本专利技术的有益效果：本专利技术提供了PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用，所述PIEZO1蛋白在食管癌组织中的表达量显著高于癌旁组织；通过检测PIEZO1蛋白的表达量能够辅助检测食管癌；通过降低所述PIEZO1蛋白的表达量能够治疗食管癌，降低所述PIEZO1蛋白的表达量能够抑制体外食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并且能够抑制体内肿瘤的生长；根据实施例的记载，降低PIEZO1蛋白的表达量后，小鼠体内肿瘤的体积和重量显著下调。附图说明图1为癌组织和癌旁组织中Piezo1蛋白的免疫组化检测结果；图2为TCGA数据库验证PIEZO1蛋白在癌组织和癌旁组织中表达量的比较；图3为PIEZO1蛋白在5种食管癌细胞系表达情况；图4为PIEZO1蛋白在EC109、EC9706细胞中被敲低表达后的结果，其中A为在EC109细胞中，在激光共聚焦显微镜下拍的转染带有绿色标签的sh-Piezo1的荧光照片，B为qRT-PCR检测的在EC109细胞株中敲低Piezo1的效率，C为在EC9706细胞中，在激光共聚焦显微镜下拍的转染带有绿色标签的sh-Piezo1的荧光照片，D为qRT-PCR检测的在EC9706细胞株中敲低Piezo1的效率；图5为CK-8法检测敲低PIEZO1蛋白对食管癌细胞增殖的影响；图6为划痕实验检测敲低PIEZO1蛋白对食管癌细胞迁移能力的影响，其中A为在EC109细胞中，分别在0h、24h和48h拍的划痕情况，B为图A的统计结果；图7为Transwell法检测敲低PIEZO1对食管癌细胞侵袭的影响；图8为qRT-PCR与WestrenBlot法检测P53信号通路的影响，其中A为qRT-PCR，B为WestrenBlot法检测；图9为沉默PIEZO1蛋白抑制体内肿瘤生长结果，其中A为肿瘤照片，B为肿瘤质量，C为肿瘤体积；图10为Piezo1抑制慢病毒的结构示意图。具体实施方式本专利技术提供了PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用。在本专利技术中，所述PIEZO1蛋白在食管癌组织中的表达量显著高于癌旁组织；所述PIEZO1蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，编码所述PIEZO1蛋白的核苷酸的序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术通过公共数据库及组织芯片免疫组化等手段确认PIEZO1蛋白在食管癌癌症组织中的表达量显著高于癌旁组织，PIEZO1蛋白能够作为食管癌标志物应用。本专利技术提供了一种食管癌检测试剂盒，包括检测PIEZO1蛋白的试剂。本专利技术对所述检测PIEZO1蛋白的实际没有特殊限定，能够准确检测PIEZO1蛋白的表达量即可，在本专利技术中，检测PIEZO1蛋白的试剂优选的包括一抗和二抗；所述一抗为Piezo1兔源多克隆抗体；所述二抗为HRP-山羊抗兔；在本专利技术中，所述Piezo1兔源多克隆抗体优选的购自英国Abcam公司；所述HRP-山羊抗兔优选的购自优宁维生物科技股份有限公司。本专利技术提供了PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备治疗食管癌药物中的应用。在本专利技术中，通过降低所述PIEZO1蛋白的表达量实现食管癌的治疗。在本专利技术中，所述抑制剂优选的包括PIEZO1蛋白的干扰RNA。在本专利技术中，所述PIEZO1蛋白的干扰RNA的核苷酸序列优选如SEQIDNO.3所示，具体如下：gcctcgtggtctacaagat。在本专利技术中，所述抑制剂优选的还包括Piezo1抑制慢病毒，所述Piezo1抑制慢病毒中优选的重组有PIEZO1蛋白的干扰RNA；在本专利技术中，所述Piezo1抑制慢病毒包括初始慢病毒载体，所述初始慢病毒载体优选为pLKD-CMV-G&PR-U6；更优选的，所述PIEZO1蛋白的干扰RNA重组于所述初始慢病毒载体的AgeI和EcoRI酶切位点之间。在本专利技术中，所述PIEZO1蛋白的干扰RNA或Piezo1抑制慢病毒转入细胞后，能够降低PIEZO1蛋白的表达量，实现食管癌的治疗。本专利技术还提供了PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备抑制食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的药物中的应用。本专利技术对所述PIEZO1蛋白表达的抑制剂没有特殊限定，能够抑制所述PIEZO1蛋白的表达即可；本专利技术将所述PIEZO1蛋白表达的抑制剂导入食管癌细胞中，通过降低所述食管癌细胞中PIEZO1蛋白的表达量，抑制食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭，从而实现食管癌的治疗。本专利技术还提供了PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备抑制体内肿瘤的生长的药物中的应用。本专利技术采用动物体内荷瘤试验进行检测，结果表明，降低PIEZO1蛋白的表达量，能够显著抑制体内肿瘤的生长。下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。...

【技术保护点】
1.PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用。/n

【技术特征摘要】
1.PIEZO1蛋白作为食管癌标志物的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述PIEZO1蛋白在食管癌组织中的表达量显著高于癌旁组织。


3.一种食管癌检测试剂盒，其特征在于，包括检测PIEZO1蛋白表达量的试剂。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，检测PIEZO1蛋白的试剂包括一抗和二抗；所述一抗为Piezo1兔源多克隆抗体；所述二抗为HRP-山羊抗兔。


5.PIEZO1蛋白表达的抑制剂在制备治疗食管癌药物中的应用。


6.根据权利要求5所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽果，高璐，陈慧平，何美霞，代丽萍，汲振余，张建营，刘静静，张灿，吉云，完迪迪，孙旭，杨小静，裘一兵，刘晓洁，
申请(专利权)人：河南省医药科学研究院，
类型：发明
国别省市：河南;41