一种检测呼吸道病原的核酸的试剂盒、检测方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种检测呼吸道病原的核酸的试剂盒，其包括CRISPR‑Cas检测体系：如本发明专利技术所述的crRNA、Cas蛋白和核酸探针。本发明专利技术还提供了一种呼吸道病原的核酸的检测方法、一种分离的核酸、crRNA、引物对及其应用。本发明专利技术的试剂盒和检测方法不依赖于大型仪器而可通过肉眼直接进行结果观测，在温和的条件即可实现检测，检测更方便；使用本发明专利技术的试剂盒和检测方法可用于高效、快速地检测/诊断呼吸道病原(例如甲型流感、乙型流感以及新型冠状病毒等)，特异性和灵敏度均较高，可用于呼吸道病原的检测与筛查，例如快速区分包括甲型流感、乙型流感以及新型冠状病毒在内的多种呼吸道病原。

【技术实现步骤摘要】
一种检测呼吸道病原的核酸的试剂盒、检测方法及应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种检测呼吸道病原的核酸的试剂盒、检测方法及应用。
技术介绍
COVID-19案例很快出现在世界各国，并被世界卫生组织(WorldHealthOrganization，WHO)宣布为世界性的公共卫生威胁。虽然目前报道COVID-19的中位发作时间为4-5天，但有一小部分感染者是在14天隔离之后才出现症状。COVID-19最常见的症状是咳嗽和发烧。不过，也有一定比例的病人并不呈现症状，包括X光检测及CT检测。COVID-19出现症状时间的不确定以及无症状感染的情况给疾病的早期精准检测带来了极大障碍，因而也使得疾病防控极具挑战。这使得COVID-19病原核酸的分子检测变得尤为重要。引起COVID-19的病原已经被确认为是β属冠状病毒，被命名为SARS-CoV-2。和其他冠状病毒类似，SARS-CoV-2是单链、正义的RNA病毒。SARS-CoV-2和SARS-CoV以及中东呼吸综合症冠状病毒(MERS-CoV)分别具有79％和50％的核酸相似性。针对COV本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种crRNA，其特征在于，所述crRNA为检测呼吸道病原的核酸的crRNA，所述呼吸道病原为新型冠状病毒、甲型流感病毒和/或乙型流感病毒；其中；/n检测所述新型冠状病毒的crRNA的序列如SEQ ID NO:29-40、42、43、45-48中的一种或多种所示；/n检测所述甲型流感病毒的crRNA的序列如SEQ ID NO:50-52中的一种或多种所示；/n检测所述乙型流感病毒的crRNA的序列如SEQ ID NO:53-56中的一种或多种所示；/n所述crRNA优选用于CRISPR-Cas检测体系。/n

【技术特征摘要】
1.一种crRNA，其特征在于，所述crRNA为检测呼吸道病原的核酸的crRNA，所述呼吸道病原为新型冠状病毒、甲型流感病毒和/或乙型流感病毒；其中；
检测所述新型冠状病毒的crRNA的序列如SEQIDNO:29-40、42、43、45-48中的一种或多种所示；
检测所述甲型流感病毒的crRNA的序列如SEQIDNO:50-52中的一种或多种所示；
检测所述乙型流感病毒的crRNA的序列如SEQIDNO:53-56中的一种或多种所示；
所述crRNA优选用于CRISPR-Cas检测体系。


2.一种扩增呼吸道病原的核酸的引物对，所述呼吸道病原为新型冠状病毒、甲型流感病毒和/或乙型流感病毒；其中，
扩增所述新型冠状病毒的引物对的核苷酸序列如SEQIDNO:58-97中的一种或多种所示；
扩增所述甲型流感病毒的引物对的核苷酸序列如SEQIDNO:98和SEQIDNO.99所示；
扩增所述乙型流感病毒的引物对的核苷酸序列如SEQIDNO:100和SEQIDNO.101所示；
所述引物对优选用于QPCR、LAMP或RPA中以扩增所述核酸。


3.一种用于检测呼吸道病原的核酸的试剂盒，其特征在于，其包括CRISPR-Cas检测体系，所述CRISPR-Cas检测体系包括：crRNA、Cas蛋白和核酸探针；其中，所述crRNA如权利要求1所述；
较佳地：
所述试剂盒还包括扩增所述核酸的引物对；其中，扩增新型冠状病毒的引物对的核苷酸序列优选如SEQIDNO:58-97中的一种或多种所示；和/或，扩增甲型流感病毒的引物对的核苷酸序列优选如SEQIDNO:98和SEQIDNO.99所示；和/或，扩增乙型流感病毒的引物对的核苷酸序列优选如SEQIDNO:100和SEQIDNO.101所示，所述的引物对优选用于QPCR、LAMP或RPA中以扩增所述核酸；
和/或，所述CRISPR-Cas检测体系还包括金属离子和/或缓冲液；
和/或，所述Cas蛋白包括Cas9、Cas12a、Cas12b和/或Cas13；
和/或，所述Cas蛋白的含量为100ng；
和/或，所述试剂盒的检测样品为痰液、痰液上清、鼻拭子、咽拭子、肛拭子和/或粪便。


4.一种用于检测呼吸道病原的核酸的试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求2所述的扩增呼吸...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘佳，
申请(专利权)人：上海科技大学，
类型：发明
国别省市：上海;31