提供了检测试样中被分析物的存在或量的基于膜的分析装置。该装置利用包含所感兴趣的被分析物的特异性结合元件的缀合探针。当互相接触时，该特异性结合元件优先与试样内的被分析物络合。保持与特异性结合元件未络合的过量被分析物经历非特异结合例如至疏水性域。结果，未络合被分析物与装置检测区中的络合被分析物的竞争能力受到限制。因此，以简单、有效和相对便宜的方式控制“假阴性”的发生率。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
多种分析方法和装置通常用于流过式分析，以确定可能存在于试样中的被分析物的存在和/或浓度。例如，免疫测定利用免疫系统的机理，其中响应对生物体来说具有致病性或为外源的抗原的存在产生抗体。这些抗体和抗原，即免疫反应物，能够彼此结合，从而产生可以用来确定生物试样中特定抗原的存在或浓度的高度特异性反应机理。存在几种公知的免疫测定方法，使用标记有可检测成分的免疫反应物，使得可以分析检测被分析物。例如，“夹层型”分析通常包括混合试样和可检测探针例如染色胶乳或放射性同位素，所述探针与用于被分析物的特异性结合元件缀合。该缀合探针与被分析物形成络合物。然后这些络合物到达其中抗体和被分析物之间结合形成三元“夹层络合物”的固定抗体区(zone)。夹层络合物被局限在该区以检测被分析物。该技术可以用于获得定量或半定量结果。该夹层型分析的一些实例描述于Grubb等人的美国专利号4,168,146和Tom等人的美国专利号4,366,241。然而，许多常规的“夹层型”分析模式当暴露至较高的被分析物浓度时遇到明显错误。具体地，当被分析物以高浓度出现时，试样中相当大部分的被分析物不能与缀合的探针形成络合物。因此，到达检测区时，未络合被分析物与络合的被分析物竞争接合点。因为未络合被分析物没有用探针标记，因此它不能被检测。因此，如果很多接合点被未络合被分析物占据，那么该分析可能显示出“假阴性”。该问题通常称为“钩状效应(hook effect)”。已经提出多种用于减少免疫测定中“钩状效应”的技术。例如，Neumann等人的美国专利号6,184,042描述了用于减少夹层分析中钩状效应的技术。该技术包括在固相存在下培养样品和至少两种能够与被分析物结合的受体。第一种受体是选自抗体、抗体片段和其混合物的结合分子的低聚物。第二种受体结合至固相，或能够结合至固相。使用可溶低聚物抗体据说减少“钩状效应”。然而，现在仍然需要以简单有效和相对便宜的方式减少“钩状效应”的改进技术。专利技术概述根据本专利技术的一个实施方案，公开了检测试样中被分析物的存在或量的方法。该方法包括i)提供一种流过式分析装置，该装置包括与能够产生检测信号的检测探针联系的多孔膜，检测探针与被分析物的特异性结合元件缀合，多孔膜限定接受材料被固定其中的检测区；ii)使包含被分析物的试样与缀合的检测探针接触，以便形成被分析物/探针络合物和未络合被分析物；iii)令未络合被分析物经历非特异性结合；和iv)在被分析物/探针络合物和检测区内的接受材料之间形成三元络合物，其中接受材料保持相对不含未络合被分析物。例如在一个实施方案中，未络合被分析物非特异地结合至存在于至少一部分缀合检测探针上的域(domain)上。在这种情况下，包含该域的缀合检测探针可以单独地限定构成约20％至约100％被探针占据的空间体积的中空内部。这些“中空”探针可以具有内表面和外表面，其中内表面包括所述域。一个实施方案中，所述域是疏水性的。根据本专利技术的另一个实施方案，公开了一种用于检测试样中被分析物的存在或量的流过式分析装置。该流过式分析装置包括与能够产生检测信号的检测探针联系的多孔膜。检测探针与被分析物的特异性结合元件缀合，并当接触试样中被分析物时与其结合，以便形成被分析物/探针络合物和未络合被分析物。缀合检测探针还包含能够非特异结合至未络合被分析物的域。多孔膜还限定接受材料被固定于其中的检测区，该区配置为结合至被分析物/探针络合物。该缀合检测探针能够在检测区内部产生检测信号，以便可根据所述检测信号测定试样内被分析物的量。在下文中更详细地讨论本专利技术的其它特征和方面。附图简述参考附图，说明书的其余部分更特别地列出针对本领域普通技术人员的本专利技术完整和能够实现的公开内容，包括其最佳方式，在附图中附图说明图1是本专利技术流过式分析装置的一个实施方案的透视图；图2图解说明了共价缀合抗体至中空探针的一个实施方案；图3是本专利技术流过式分析装置的一个实施方案的示意图；图4是实施例3结果的图解图；图5是实施例4结果的图解图；和图6是实施例1中使用的中空颗粒的SEM照片(放大倍数为100倍)。本说明书和附图中重复使用的参考符号用来表示本专利技术相同或类似的特征或元件。代表性实施方案的详细说明定义在这里使用的术语“被分析物”通常是指待检测的物质。例如，被分析物可以包括抗原物质、半抗原、抗体和其组合。被分析物包括但是不局限于毒素、有机化合物、蛋白质、肽、微生物、氨基酸、核酸、荷尔蒙、类固醇、维生素、药物(包括给药用于治疗用途的以及给药用于不正当用途的)、药物中间体或副产物、细菌、病毒颗粒和任何上述物质的代谢物或抗体。一些被分析物的具体实例包括铁蛋白；肌酸酐激酶MIB(CK-MB)；异羟基洋地黄毒苷；二苯乙内酰脲；苯巴比妥；酰胺咪嗪；万古霉素；庆大霉素；茶碱；丙戊酸；奎尼丁；促黄体生成激素(LH)；促卵泡激素(FSH)；雌二醇、孕酮；C-反应蛋白；脂肪分解酶(lipocalins)；免疫球蛋白E抗体；维生素B2微球蛋白；糖化血红蛋白(glycated hemoglobin，Gly.Hb)；氢化可的松；洋地黄毒苷；N-乙酰基普鲁卡因酰胺(NAPA)；普鲁卡因酰胺；风疹抗体，例如风疹免疫球蛋白G和风疹免疫球蛋白M；弓形体病抗体，例如弓形体病免疫球蛋白G(Toxo-Ig G)和弓形体病免疫球蛋白M(Toxo-Ig M)；睾丸激素；水杨酸酯；退热净；乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)；乙型肝炎核心抗原抗体，例如抗乙型肝炎核心抗原免疫球蛋白G和免疫球蛋白M(Anti-HBC)；人免疫缺陷病毒1和2(HIV1和2)；人T细胞白血病毒1和2(HTLV)；乙型肝炎e抗原(HBeAg)；乙型肝炎e抗原抗体(Anti-HBe)；流感病毒；促甲状腺激素(TSH)；甲状腺素(T4)；全部的三碘甲腺原氨酸(Total T3)；自由三碘甲腺原氨酸(Free T3)；癌胚抗原(CEA)；甲胎蛋白(AFP)。滥用药物和受控物质包括，但是不限于安非他明；脱氧麻黄碱；巴比妥酸盐，例如异戊巴比妥、司可巴比妥、戊巴比妥、苯巴比妥和巴比妥；苯并二氮杂，例如利眠宁和安定；大麻，例如大麻麻醉剂和大麻；古柯碱；芬太奴；LSD；甲苯喹唑酮；鸦片制剂，例如海洛因、吗啡、可待因、氢吗啡酮、氢可酮、美沙酮、氧可酮、氧吗啡酮和鸦片；苯西克定；和丙氧芬(propoxyhene)。其它可能的被分析物描述于Everhart等人的美国专利号6,436,651和Tom等人的美国专利号4,366,241。在这里使用的术语“试样”泛指怀疑包含被分析物的材料。可以直接使用从来源获得的试样或先进行样品性质改性预处理。试样可以衍生自任何生物来源，例如生理性液体，包括血液、组织液、唾液、眼球晶状体液、脑脊液、汗水、尿、牛奶、腹水液体、沙哑、滑膜液、腹膜液、阴道液体、羊水等。可以在使用前预先处理试样，例如从血液制备血浆、稀释粘性流体等。处理方法可以包括过滤、沉淀、稀释、蒸馏、混合、浓缩、干扰成分的灭活和加入试剂。除生理性液体之外，可以使用其它液体样品例如水、食品等用于环境分析或食品生产分析。此外，可以使用怀疑包含被分析物的固体材料作为试样。在有些情况下，改性固体试样以形成液体介质或释放被分析物可解是有益的。详细说明现在将详细描述本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检测试样中被分析物的存在或量的方法，该方法包括：ｉ）提供一种流过式分析装置，该装置包括与能够产生检测信号的检测探针联系的多孔膜，所述检测探针与被分析物的特异性结合元件缀合，所述多孔膜限定接受材料被固定于其中的检测区；ｉｉ）使包含被分析物的试样与所述缀合的检测探针接触，以便形成被分析物／探针络合物和未络合被分析物；ｉｉｉ）令所述未络合被分析物经历非特异性结合；和ｉｖ）在所述被分析物／探针络合物和所述检测区内的所述接受材料之间形成三元络合物，其中所述接受材料保持相对不含所述未络合被分析物。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：卫宁，黄延宾，杨开元，
申请(专利权)人：金伯利克拉克环球有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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