癌症疾病改善抗体制造技术

本发明专利技术涉及使用一种全新筛选方式来制备病人癌症疾病改善抗体的方法。该工艺使用癌症细胞毒性作为指标分离抗癌抗体，使得制备用于治疗和诊断目的抗癌抗体成为可能。抗体可用于帮助进行癌症的定级和诊断，还可用于治疗原发肿瘤和肿瘤转移。抗癌抗体可以与毒素、酶、放射性化合物和造血细胞偶联。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及癌症疾病改善抗体(CDMAB)的分离和制备方法以及这些CDMAB在治疗和诊断过程中的应用，优选地与一种或多种化疗药剂组合应用。本专利技术进一步涉及使用本专利技术的CDMAB的结合实验方法。
技术介绍
每个患有癌症的个体是独特的，正如人的身份有所不同，其所患癌症不同于其它癌症。尽管如此，当前治疗采用相同的方法治疗患有同类癌症处于同样阶段的所有病人。这些病人中至少有30％在一线治疗(first line treatment)中失败，由此造成更多轮次的治疗，增加了治疗失败、癌症转移和最终死亡的可能性。治疗的最佳方法是针对特定个体制定专门化疗法。当前唯一的专门化的疗法是外科手术。化疗和放疗不能针对病人进行设计，而手术本身在大多数病例中不足以治愈癌症。伴随着单克隆抗体的出现，发展方法用于专门化治疗的可能性变得更加现实，因为各抗体可以导向单个抗原决定簇。进一步地，可以生产抗体组合来导向一群抗原决定簇，这些抗原决定簇唯一地定义了特定个体的癌症。在认识到癌细胞和正常细胞之间的显著差异在于癌细胞含有转化细胞所特有的抗原后，科学界长期认为可以设计单克隆抗体通过与这些癌抗原专一性的结合专一地作用于转化细胞；由此产生信念认为单克隆抗体可以作为“魔术子弹”去除癌细胞。根据本专利技术记载的方法分离出的单克隆抗体已经显示能够以有利于病人的方式改善癌症疾病的进程，例如通过降低肿瘤负荷。为了区别，这些单克隆抗体在此被称作癌症疾病改善抗体(CDMAB)或“抗癌”抗体。当前，癌症病人的治疗选择通常很少。统一而严格的癌症治疗方法在整体存活率和发病率方面有所改善。然而，对于特定个体，这些改善了的统计数字和他们个人情况的改善没有必然关联。因此，如果采用方法使得操作者能够在同组病人中独立于其他病人治疗每一例癌症，该方法将允许针对每个人进行独特设计的治疗。这样的治疗过程将理想地提高治愈率，产生更好的效果，由此满足长期需要。历史上，多克隆抗体在人癌症的治疗中取得了有限的成功。已经采用人血浆对淋巴瘤和白血病进行了治疗，但是几乎没有长期的缓解或反应。进一步地，该方法缺乏可重复性，和化疗相比没有额外的益处。已经采用人全血、黑猩猩血清、人血浆和马血清对实体瘤如乳腺癌、黑素瘤和肾细胞癌进行了治疗，相应产生了无法预测和无效的结果。已经进行了很多用单克隆抗体治疗实体瘤的临床实验。在80年代针对人乳腺癌进行了至少4次临床实验，用针对特定抗原或基于组织选择性的抗体在至少47名病人中只产生了1名应答者。直到1998年才使用人源化抗Her 2抗体结合顺铂进行了成功的临床实验。在该试验中对37名病人的反应进行了观察，其中大约四分之一有部分应答率，另一半具有较慢或稳定的疾病进程。研究结直肠癌的临床实验采用了针对糖蛋白和糖脂靶点两者的抗体。诸如对腺癌有一定专一性的17-1A抗体，已经进入了二期临床，在60名病人中只有1名产生了部分应答。在其它实验中，在附加使用环磷酰胺的方法中，17-1A的使用在52名病人中只产生了一个完全应答和两个微弱应答。其它使用17-1A的实验产生的效果相似。最先被批准用来成像的人源化鼠单克隆抗体的使用同样不能引起肿瘤的消退。迄今为止还没有能够有效治疗结直肠癌的抗体。同样的，对于肺癌、脑癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和胃癌的治疗效果均不能令人满意。用抗GD3单克隆抗体治疗黑素瘤已经取得了有限的成功。因此，可以看出尽管成功的小动物实验是进行人临床试验的前提，已试验的抗体对于大部分病例还是无效的。现有专利美国专利号5,750,102公开了一种用MHC基因转染病人肿瘤细胞的过程，MHC基因可以从病人的细胞或组织克隆。随后用这些转染的细胞对病人进行预防接种。美国专利号4,861,581公开的过程包括的步骤有获取对哺乳动物肿瘤和正常细胞的一种细胞内组分而非胞外组分具有专一性的单克隆抗体；标记单克隆抗体；将标记后的抗体与接受治疗的哺乳动物组织进行接触以杀死肿瘤细胞；以及通过测定标记抗体与降解的肿瘤细胞胞内组分的结合确定疗效。在制备针对人胞内抗原的抗体时，专利权人认识到恶性细胞代表了这类抗原的便捷来源。美国专利号5,171,665提供了一种全新抗体及生产该抗体的方法。特别地，该专利对一种单克隆抗体的形成进行了指导，该单克隆抗体可以和人肿瘤，例如结肠癌和肺癌的相关蛋白抗原发生很强地结合，但和正常细胞的结合程度小得多。美国专利号5,484,596提供了一种癌症治疗的方法，该方法包括从癌症患者体内手术去除肿瘤组织；处理肿瘤组织获得肿瘤细胞；照射肿瘤细胞，使其可以存活但不再是致瘤的；以及采用这些细胞为病人制备疫苗，该疫苗能够抑制原发瘤的复发并同时抑制肿瘤转移。该专利对开发与肿瘤细胞表面抗原反应的单克隆抗体进行了指导。如第4列第45行及其以后所述，专利权人用内源性肿瘤细胞开发单克隆抗体，在人肿瘤形成中形成有活性的专一免疫疗法。美国专利号5,693,763提供了以人癌症为特征的糖蛋白抗原，且其不依赖于其来源的上皮组织。美国专利号5,783,186提出了诱导Her2表达细胞凋亡的抗Her2抗体，生成抗体的杂交瘤细胞系，用抗体和含有所述抗体的药物组合物治疗癌症的方法。美国专利号5,849,876描述了新的杂交瘤细胞系，该细胞系可生成从肿瘤和非肿瘤组织源中纯化出的粘蛋白抗原的单克隆抗体。美国专利号5,869,268提出了人淋巴细胞的生成方法，该淋巴细胞产生专一针对目标抗原的抗体，生产单克隆抗体的方法以及用这种方法生产的单克隆抗体。该专利特别提到一种抗-HD人单克隆抗体的生产，该抗体可用于癌症的诊断和治疗。美国专利号5,869,045涉及与人体癌症细胞反应的抗体、抗体片段、抗体偶联物和单链免疫毒素。这些抗体的功能机理是双重的，分子与人癌表面上的细胞膜抗原反应，进一步地抗体在结合之后能够内化进癌细胞，这种机理使它们特别适于形成抗体-药物和抗体-毒素偶联物。在特定浓度下未修饰的抗体同样具有明显的细胞毒性。美国专利号5,780,033公开了自身抗体在肿瘤治疗和预防中的应用。但是，该抗体是源自老年哺乳动物的抗细胞核自身抗体。在该例中，自身抗体据称是免疫系统中发现的一类天然抗体。因为自身抗体来自“老年哺乳动物”，因此不要求自身抗体实际上来自接受治疗的病人。此外该专利公开了老年哺乳动物中的天然和单克隆抗核自身抗体，以及生产单克隆抗核自身抗体的杂交瘤细胞系。
技术实现思路
本专利技术的专利技术者此前已被授予名为“个性化的病人专一性抗癌抗体”的美国专利6,180,357。该专利提出了个性化定制的用于治疗癌症疾病的抗癌抗体的选择工艺。为了本文的目的，术语“抗体”和“单克隆抗体”(mAb)交替使用来指杂交瘤(例如鼠或人的)生成的完整的免疫球蛋白、免疫偶联物和合适的由免疫球蛋白衍生出的免疫球蛋白片段和重组蛋白，如嵌合的和人源化免疫球蛋白、F(ab’)和F(ab’)2片段、单链抗体、重组免疫球蛋白可变区(Fv)、融合蛋白等。在本领域中人们充分认识到改变多肽链中的某些氨基酸序列对蛋白的结构和功能不会产生显著影响。在抗体的分子重排中，对骨架区域的核酸或氨基酸序列的修饰一般是可以接受的。这些修饰包括但不限于替换(优选保守替换)、缺失或增加。进一步地，将标准的化疗模式例如放射核与本专利技术的CDMAB偶联由此关注所述化疗的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通过治疗哺乳动物体内的人肿瘤来延长存活和／或延缓疾病进程的方法，其中所述肿瘤表达一抗原，所述抗原与由保藏于ＡＴＣＣ，保藏号为ＰＴＡ－４８９０的克隆编码的单克隆抗体或其抗原结合片段专一性结合，该抗原结合片段具有单克隆抗体的识别特征，所述方法包括用所述单克隆抗体对所述哺乳动物以有效剂量给药从而降低所述哺乳动物的肿瘤负荷，由此延缓疾病进程并／或延长存活。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴维SF扬，苏珊E哈恩，海伦P芬德利，
申请(专利权)人：阿里乌斯研究公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]