本发明专利技术涉及含有ｈｓｇｋ片段的单链或双链核酸在诊断高血压中的用途，所述片段的长度至少１０个核苷酸／碱基对，并且所述片段包含由ｈｓｇｋ１基因内含子２中７３２／７３３位置处的核苷酸Ｇ插入的存在或缺乏而产生的多态性。本发明专利技术含涉及ｓｇｋ家族的人同系物的过表达或功能性分子修饰与Ｑ／Ｔ间期长度之间的正相关性用于诊断长Ｑ／Ｔ综合征的用途，以及ｓｇｋ基因家族的人同系物的核酸或它的片段用于诊断长Ｑ／Ｔ综合征的用途。ｓｇｋ基因家族的人同系物中单独核苷酸的多态性（单核苷酸多态性（ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ＝ＳＮＰｓ）特别可用于诊断长Ｑ／Ｔ综合征的先天性倾向。在另一方面，本发明专利技术涉及增加ｓｇｋ家族基因表达的功能活化剂或转录因子在制备治疗和／或预防长Ｑ／Ｔ综合征的药物中的用途。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及含有hsgk片段的单链或双链核酸在诊断高血压中的用途，所述片段长度至少10个核苷酸/碱基对，此外所述片段包含由hsgk1基因的内含子2中732/733位的核苷酸G插入的存在或缺乏而产生的多态性。此外，本专利技术涉及sgk家族的人同系物的过表达或功能性分子修饰与Q/T间期长度之间的正相关用于诊断长Q/T综合征的用途，以及sgk基因家族的人同系物的核酸或其一个片段用于诊断长Q/T综合征的用途。特别是，s gk基因家族的人同系物中单独核苷酸的多态性(单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphisms)＝SNPs)在本专利技术的情况下也可以用于诊断长Q/T综合征的遗传决定的倾向性。在进一步的方面，本专利技术涉及增加sgk家族基因表达的功能活化剂或转录因子在制备治疗和/或预防长Q/T综合征的药物的用途。很多胞外信号引起细胞内磷酸化/脱磷酸级联反应，以确保这些信号从胞质膜及其受体快速转移到细胞质和细胞核内。通过许多个别蛋白，尤其是激酶(它们将磷酸基转移到各自底物上)，使得这些可逆信号转移级联反应的特异性成为可能。血清和糖皮质激素依赖性激酶(sgk)是丝氨酸/苏氨酸激酶，血清和糖皮质激素可增加它的表达，它最初是从大鼠乳腺癌细胞克隆的(Webster et al.，1993)。人型sgk，即hsgk1是从肝细胞克隆的(Waldegger et al.，1997)。据发现调节细胞容积会影响hsgk1的表达。迄今仍没能证明大鼠sgk表达涉及对细胞容积的依赖性。此外发现该大鼠激酶刺激上皮的Na+通道(ENaC)(Chen et al.，1999；Naray-Pejes-Toth et al.，1999)。ENaC继而在肾Na+排泄中起着重要作用。ENaC活性的增加导致钠离子的肾潴留增加，并因此导致高血压的发展，如WO02/074987A2所证明的。最后，已经克隆了人sgk人家族的另两个成员，即hsgk2和hsgk3(Kobayashi et al.，1999)，二者如同hsgk1一样，均经PI3激酶途径被胰岛素和IGF1活化。电生理学实验表明hsgk2和hsgk3的共表达同样导致ENaC活性显著增加。由DE 197 08 173 A1明显可知hsgk1对其中细胞容积的改变起重要病理生理作用的很多疾病有坚实的诊断潜力，所述疾病例如高钠血症、低钠血症、糖尿病、肾功能不全、分解代谢过度、肝性脑病和微生物或病毒感染。WO 00/62781报道了hsgk1活化内皮Na+通道，从而增加肾Na+再吸收。由于这种肾Na+再吸收增加伴随有高血压，因此推测在这种情况下，hsgk1表达的增加将导致高血压，而hsgk1表达的降低将最终导致低血压。DE 100 421 37也报道了人同系物hsgk2和hsgk3的过表达或活性过强与ENaC过度活化之间的相似联系，由此导致的肾Na+再吸收增加和由此发展而来的高血压。此外，这个文件已经探讨了激酶hsgk2和hsgk3对于原发性高血压的诊断潜力。WO02/074987A2公开了hsgk1基因中各个核苷酸的两种不同多态性(单核苷酸多态性(SNP))的存在和高血压的遗传决定的倾向性之间的关系。在这种情况下，hsgk1基因中多态性是内含子6中的多态性(T→C)和外显子8中的多态性(C→T)。尤其是，从WO 02/074987A2的表5明显可知，在已经分析的两个SNPs之间存在强相关性失衡外显子8中SNP的大多数CC携带者也是内含子6 TT携带者(即64％)，而只有少数外显子8 TT携带者同时也是内含子6 CC携带者(仅仅2％)。内含子6和外显子8中多态性存在情况之间的这些相关性证实，为了证明高血压倾向，有必要分析这两种多态性(内含子6和外显子8)的基因型，这样引起极度技术投入和时间消耗。因此本专利技术的目的是提供hsgk1基因中进一步的多态性，其中一种或另一种形式的存在可比外显子8和内含子6中两个已知多态性更好地与患者中高血压的表型存在相关联。尤其是，提供与高血压倾向相关、并且以一种或另一种形式的存在具有对hsgk1蛋白的功能性分子修饰后果的单一SNP将非常有利。通过提供hsgk1基因中的新多态性完成了这个目的，其中所述多态性包括在732/733位插入核苷酸G。已经发现在732/733位具有核苷酸G插入(InsG/InsG)的个体以更高频率存在，并且发展为高血压的倾向较低。另一方面，在732/733位不具有这种插入的个体(WT/WT)更罕见存在，并且发展为高血压的倾向明显较高。根据迄今获得的结果，有关内含子2中732/733位处多态性的基因型与发展为高血压的倾向性之间的这种相关性看起来比外显子8和内含子6中多态性的相应相关性具有明显较高的显著性(见表1)。此外，根据使用已知预测程序获得的预测，推测hsgk1基因的特定剪接变体的表达取决于在hs gk1基因内含子2中732/733位存在还是缺乏G插入。hsgk1基因的这种特定剪接变体的表达可以导致hsgk1蛋白的功能性分子修饰，引起hsgk1活性改变，尤其是hsgk1活性增加。因此，hsgk1蛋白的这种分子修饰，尤其是hsgk1活性增加的生理后果最终可以导致高血压症状的发展。在第一个方面，本专利技术涉及分离的单链或双链核酸在诊断高血压中的用途，该核酸包含如SEQ ID No.1描述或如SEQ ID No.2描述的核酸序列的片段，所述片段的长度是至少10个核苷酸/碱基对，优选至少15个核苷酸/碱基对，尤其是至少20个核苷酸/碱基对，并且所述片段包含hsgk1基因的内含子2中在732/733位有或无核苷酸G插入的多态性。SEQ ID No.1描述了这样的hsgk1基因组DNA序列，其中在hsgk1基因内含子2的732/733位没有核苷酸G(或GTP)的插入，即所谓的“野生型(WT)”序列，SEQ ID No.2描述了这样的hsgk1的基因组DNA序列，其中在hsgk1基因内含子2的732/733位具有核苷酸G(或GTP)的插入，即所谓的“G插入(InsG)”序列。在第二个方面，本本专利技术涉及诊断高血压的试剂盒，该试剂盒包含至少一个分离的单链或双链核酸，该核酸包含如SEQ ID No.1或2描述的序列的片段。在这一点上，来自SEQ ID No.1或2的所述片段的长度是至少10个核苷酸/碱基对，优选至少15个核苷酸/碱基对，尤其是至少20个核苷酸/碱基对。此外，来自SEQ ID No.1或2的所述片段应该包含hsgk1基因内含子2中在732/733位有或没有核苷酸G插入的多态性。或者，除上述单链或双链核酸之外，或与上述单链或双链核酸相反，诊断高血压的试剂盒也可以包含至少一种抗体，该抗体针对的是hsgk蛋白的某一区域，hsgk1蛋白中所述区域的存在取决于相应hsgk编码基因的内含子2中732/733位核苷酸G插入的存在。例如，如果hsgk1基因中732/733位G插入的存在会诱导外显子被剪接掉，那么精确地针对该被剪接掉的蛋白区域的抗体可以用来检测该个体中的多态性形式。因此，这种抗体可以用来诊断发展高血压的倾向性。在第三个方面，本专利技术涉及诊断高血压的方法，该方法包括下列程序步骤a)从个体中取出身体样品，b)合适时，从根据a)的身体样品分离和本文档来自技高网...
【技术保护点】
含有ＳＥＱＩＤＮｏ．１或ＳＥＱＩＤＮｏ．２所述核酸序列的片段的分离的单链或双链核酸用于诊断高血压的用途，其特征在于所述片段的长度是至少１０个核苷酸／碱基对，并且所述片段包含ｈｓｇｋ１基因内含子２中在７３２／７３３位置处有或没 有核苷酸Ｇ插入的多态性。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：弗洛里安朗，安德勒斯巴斯亚恩，
申请(专利权)人：弗洛里安朗，
类型：发明
国别省市：DE[德国]
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