内含磁性体的粒子及其制造方法、免疫测定用粒子以及免疫测定方法技术

本发明专利技术提供一种内含磁性体的粒子，由有机高分子物质和平均粒径为１～３０ｎｍ的磁性体形成，所述磁性体以分散的状态被包含于粒子内部。由此，本发明专利技术可提供具有均匀的磁性、分散稳定性出色且粒径分布狭窄的内含磁性体的粒子及其制造方法、使用该粒子的免疫测定用粒子、以及使用这些内含磁性体的粒子或免疫测定用粒子的免疫测定方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及具有均匀的磁性、分散稳定性出色且粒径分布狭窄的内含磁性体的粒子及其制造方法、使用该粒子所形成的免疫测定用粒子、以及使用这些内含磁性体的粒子或免疫测定用粒子的免疫测定方法。
技术介绍
以往，作为含有磁性体的高分子粒子的制作方法，已知有(1)使已制作完的高分子粒子中含铁离子而制作磁性体的方法、(2)在由单体经聚合制作高分子粒子的过程中使之含已制作完的磁性体粒子的方法(参照特开平9-208788号公报)、(3)使分别制作的高分子粒子和磁性体粒子复合化的方法(参照特开平6-231957号公报)。另外，除此之外，还有用高分子等覆盖磁性体粒子的方法(参照特开平6-92640号公报)。在(1)的方法中，因为使高分子粒子吸收铁离子，所以存在磁性体露在表面上而被氧化的问题。另外，在(2)的方法中，存在磁性体粒子无法被均匀地导入到高分子粒子中的问题，还有因粒径很难控制而成为粒径分布广的物质的问题。另外，在(3)的方法中，因为高分子粒子发生凝聚而无法用于粒径小的粒子。另外，在(4)的方法中，因为无法均匀覆盖，所以有时浮游性或分散性差，而且磁性体粒子表面的一部分会暴露在外。另一方面，作为微量免疫测定方法，一直以来，已知有放射免疫测定方法、酶免疫测定方法、荧光免疫测定方法等，这些已经被实用化。这些方法中使用分别将同位素、酶、荧光物质等作为标识而附加的抗原或抗体，检测出有无与其发生特异反应的抗体或抗原。当采用这样的免疫测定方法时，内含磁性体的粒子被用于有效且简便地进行B/F分离。另外，还公开了B/F分离以外的使用(参照特开2000-88852号公报)、或将内含磁性体的粒子自身作为标识材料的免疫测定方法(参照特开平6-148189号公报、特开平7-225233号公报、特表2001-524675号公报)。在将内含磁性体的粒子自身作为标识材料的免疫测定方法中，其测定精度取决于内含磁性体的粒子的均质性即每个粒子的磁性体含量的均匀性。但是，市售的内含磁性体的粒子在磁性体含量方面有偏差，在以往公知的内含磁性体的粒子的制造方法中，难以控制磁性体含量的均匀性。当将内含磁性体的粒子用于免疫测定方法时，在使抗原或抗体结合的工序或者与被检测物质进行的工序中，有时作为将内含磁性体的粒子分散于缓冲液中的分散液进行处理。为此，要求内含磁性体的粒子具有在分散液的状态下粒子不会自然沉降的高分散稳定性。但是，市售的内含磁性体的粒子如果在分散液的状态下放置一段时间，则过一会儿其中的一部分就会发生沉降，因此存在处理性差的问题。
技术实现思路
鉴于上述问题，本专利技术的目的在于提供具有均匀的磁性、分散稳定性出色且粒径分布狭窄的内含磁性体的粒子及其制造方法，使用其的免疫测定用粒子，以及使用这些内含磁性体的粒子或免疫测定用粒子的免疫测定方法。本专利技术提供一种内含磁性体的粒子，是由有机高分子物质和平均粒径为1～30nm的磁性体构成的内含磁性体的粒子，其特征在于，上述磁性体以分散的状态被包含于粒子内部。在本专利技术的内含磁性体的粒子中，构成有机高分子物质的碳元素和构成磁性体的金属元素的构成比率的绝对偏差优选为0.3以下。在本专利技术的内含磁性体的粒子中，磁性体优选为在形成内含磁性体的粒子的聚合过程中，在粒子内部氧化金属离子而形成的磁性体。另外，上述金属离子优选为铁离子。在本专利技术的内含磁性体的粒子中，上述有机高分子物质优选将由丙烯酸系单体构成的聚合物作为主构成成分，上述丙烯酸系单体优选为具有缩水甘油基的单体。另外，上述有机高分子物质也优选将由具有缩水甘油基的单体和苯乙烯系单体构成的聚合物作为主构成成分。此时，上述有机高分子物质中的源自苯乙烯系单体的单体单元的比率优选为5～90重量％。进而，上述有机高分子物质也优选作为聚合物的单体成分具有用下述通式(1)表示的聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯或用下述通式(2)表示的化合物。特别优选在具有缩水甘油基的单体、或者具有缩水甘油基的单体和苯乙烯系单体中作为聚合成分而添加。CH2＝CR-COO-(CH2-CH2-O)n-H(1)式中，R表示H或CH3，n表示1～20的整数。 式中，X表示H或SO3-NH4+，n表示3～30的整数。在本专利技术的内含磁性体的粒子中，上述有机高分子物质优选已被交联。本专利技术的内含磁性体的粒子，优选在粒子表面上具有从羧基、羟基、环氧基、氨基、三乙基铵基、二甲基氨基和磺酸基中选择的至少一种官能团。本专利技术的内含磁性体的粒子的平均粒径优选为0.05～1μm。在本专利技术的内含磁性体的粒子中，磁性体的含量优选为0.1～50重量％。本专利技术的内含磁性体的粒子中含有的磁性体的平均粒径优选为1～10nm。本专利技术的内含磁性体的粒子优选在其粒子表面上结合有具有可以与抗原或抗体形成共价键的官能团的连接物质(linker)。上述官能团优选为环氧基，上述连接物质优选为聚乙二醇二缩水甘油醚。本专利技术的内含磁性体的粒子可以通过下述的方法而制造，即，所述的方法由在水系溶剂中使不具有亲水基的单体和/或具有亲水基的单体发生聚合而形成粒子的工序、在上述粒子中引入金属离子的同时氧化上述金属离子而形成磁性体的工序构成，且同时进行上述形成粒子的工序和上述形成磁性体的工序。上述不具有亲水基的单体，优选为具有缩水甘油基的丙烯酸系单体、或者、具有缩水甘油基的丙烯酸系单体以及苯乙烯系单体。另外，也优选使不具有亲水基的单体和具有亲水基的单体进行聚合而形成粒子，具有亲水基的单体优选为用下述通式(1)表示的聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯或用下述通式(2)表示的化合物。CHa2＝CR-COO-(CH2-CH2-O)n-H(1)式中，R表示H或CH3，n表示1～20的整数。 式中，X表示H或SO3-NH4+，n表示3～30的整数。另外，在形成上述粒子的工序中，可以添加反应性乳化剂作为共聚单体。另外，优选后添加聚合引发剂。在本专利技术的内含磁性体的粒子上吸附或结合抗原或抗体而成的免疫测定用粒子也是本专利技术之一。另外，使用本专利技术的内含磁性体的粒子或免疫测定用粒子的免疫测定方法也是本专利技术之一。进而，将本专利技术的内含磁性体的粒子用作标识的免疫测定方法也是本专利技术之一。附图说明图1是在实施例2中得到的内含磁性体的粒子(平均粒径；内含磁性体的粒子0.21μm、磁性体5nm)的TEM照片。具体实施例方式下面，详细说明本专利技术。本专利技术的内含磁性体的粒子是由有机高分子物质和平均粒径为1～30nm的磁性体构成的。上述有机高分子物质，是以如下聚合物为主构成成分的物质，所述聚合物由用于形成粒子的核的不具有亲水基的单体、和用于形成在水中稳定分散的粒子且形成粒子的壳的具有亲水基的单体构成。<不具有亲水基的单体> 作为上述不具有亲水基的单体，例如可以举出苯乙烯、α-甲基苯乙烯、对甲基苯乙烯、对氯苯乙烯、氯甲基苯乙烯等苯乙烯系单体；氯乙烯；醋酸乙烯酯、丙酸乙烯酯等乙烯基酯类；丙烯腈等不饱和腈类；(甲基)丙烯酸甲酯、(甲基)丙烯酸乙酯、(甲基)丙烯酸丁酯、(甲基)丙烯酸2-乙基己酯、(甲基)丙烯酸硬脂酯、(甲基)丙烯酸乙二醇酯、(甲基)丙烯酸三氟乙酯、(甲基)丙烯酸五氟丙酯、(甲基)丙烯酸环己酯、(甲基)丙烯酸缩水甘油酯、(甲基)丙烯酸四氢糠基酯等丙烯酸系单体等。这些不具有亲水基的单体可以单独使用，还本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种内含磁性体的粒子，由有机高分子物质和平均粒径为１～３０ｎｍ的磁性体形成，其特征在于，所述磁性体以分散的状态被包含于粒子内部。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：冈孝之，大本泉，川口春马，涌井涉，
申请(专利权)人：积水化学工业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]