多级放大荧光免疫分析方法技术

本发明专利技术属于荧光免疫分析技术领域，涉及多级放大荧光免疫分析方法。采用含１６碳长链琥珀酰亚胺酯－生物素标记特异及发光蛋白（Ｒ－ＰＥ），使Ｒ－ＰＥ分子与相结合的亲和素（Ａ）之间的空间距离以及Ｒ－ＰＥ与固相微珠（ＰＳＭＤ）的距离加长，有效的解决了发光基团（Ｒ－ＰＥ）与多级结合的免疫复合物之间的“空间阻碍”，使Ｒ－ＰＥ发出的不被相邻的分子及固相材料所熄灭，保证了荧光强度的多级放大。实现了荧光强度１０↑［３］以上的多级放大，使灵敏度达１ｐｇ／ｍｌ。可方便的应用于各类免疫分析，如ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ、ＦＩＡ等领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于荧光免疫分析

技术介绍
荧光免疫分析技术(FIA)因无放射性，无酶试剂的不稳定性及效期限制，在超微量免疫分析领域引起人们更大的关注；但由于FIA存在两个问题—是液相中产生的散射光降低了信号/噪声比；二是直接检测的荧光信号远低于放免分析(RIA)的电离放大和酶联免疫分析(ELISA)的酶底物放大，造成该技术分析的灵敏度较低。前者经采用时间分辨、荧光微珠技术及流式细胞仪(Flow Cytometry)得以解决，后者经普遍采用亲和素(Avidin，A)—生物素(Biotin，B)放大体系，虽灵敏度有所提高，但仍低于RIA和ELISA法(免疫荧光及有关的染色技术，编辑W.Knapp.，等，Elsevier/North-Holland.NEW YORK出版，1978年，147-148页。Immunofluorescence and related Staining Techniques.Ed W.Knapp.et.al.，Elsevier/North-Holland NEW YORK.Press.1978，P147-148.). 早在1975年，Green就证明亲本文档来自技高网...

【技术保护点】
多级放大荧光免疫分析方法，其特征在于，步骤和条件如下：Ⅰ．使用的仪器：●荧光分析仪ＬｕｍｉｎｅｘＭｕｌｔｉ－１００型；●高速离心机２０００ｒｐｍ；●超声波清洗仪５０ＨＺ；●蛋白、核酸监测仪；　 　Ⅱ．使用的试剂：●羧基化聚苯乙烯（ＰＳＭＤ）中８０－１００ｎｍＬｕｍｉｎｅｘＣＯ产；●硫代琥珀酰亚胺酯，碳二亚胺，生物素，链亲和素，Ｒ－藻红蛋白，皆为免疫纯，购自ｓｉｇｍａ试剂；●ＨＢｓＡｇ，抗ＨＢｓ，羊抗 人ＩｇＧ，免疫纯长春生物制品研究所产；●...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：潘利华，马世盐，钮倩，曲晓春，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]