增生性疾病对mTOR抑制剂敏感性的生物标志制造技术

公开了用于确定受试者中增生性疾病对用ｍＴＯＲ抑制剂治疗的敏感性的方法，所述方法包括确定来自该受试者的样品中Ｓ６的表达水平和／或磷酸化状态，还公开了相关治疗方法和用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于确定增生性疾病诸如癌症对治疗剂，特别是mTOR抑制剂的敏感性的生物标志。许多mTOR抑制剂具有强效抗增生性质，使它们用于癌症的化学治疗，特别是实体瘤，尤其是晚期实体瘤的化学治疗。然而，还需要mTOR抑制剂的更定向的用途，所述更定向的用途需要鉴定可能对此类活性剂治疗有反应的患者。因此需要用于例如临床试验的生物标志，所述生物标志能预测患者中增生性疾病，例如肿瘤对用mTOR抑制剂治疗的反应。令人惊奇地发现S640S核糖体蛋白质(另外称为S6)是预测增生性疾病对用mTOR抑制剂治疗的敏感性的有用的生物标志。特别地，发现S6的磷酸化状态与对mTOR抑制剂的敏感性有很好的相关性。当用于处理显示较高水平表达磷酸化S6的癌细胞系时，mTOR抑制剂更可能显示显著的抗增殖作用。S6是40S核糖体亚单位的组分，所述40S核糖体亚单位是mTOR蛋白激酶下游效应子p70 S6激酶的底物。S6的多重磷酸化牵涉到编码蛋白质合成器组分的mRNA的翻译上调，并因此认为在哺乳动物细胞的生长中起主要作用(Volarevic和Thomas，Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.2001，65101-27)。人S6的序列可以以Genbank检索号M20020获得。一方面，本专利技术提供了S640S核糖体蛋白质(S6)，特别是磷酸化S6作为生物标志用于确定增生性疾病对用mTOR抑制剂治疗的敏感性的用途。另一方面，本专利技术提供了用于确定患者中增生性疾病对用mTOR抑制剂治疗的敏感性的方法，其包括确定来自受试者的样品中S6的表达水平和/或磷酸化状态。另一方面，本专利技术提供了选择患有增生性疾病的受试者用于用mTOR抑制剂治疗的方法，其包括通过如以上描述的方法确定每名受试者中增生性疾病对mTOR抑制剂治疗的敏感性，和选择显示磷酸化S6表达增加的受试者用于用mTOR抑制剂治疗的方法。如文中使用的术语“mTOR抑制剂”包括但不限于雷帕霉素(西罗莫司)或其衍生物。雷帕霉素是已知的由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的大环内酯类抗生素。雷帕霉素的合适的衍生物包括例如式A的化合物 其中R1aa是CH3或C3-6炔基，R2aa是H或-CH2-CH2-OH、3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基-丙酰基或四唑基，和Xaa是＝O、(H，H)或(H，OH)条件是当Xaa是＝O并且R1aa是CH3时，R2aa不是H，或当R2aa是-CH2-CH2-OH是，还包括所述化合物的前体药物，例如其生理学可水解的醚，例如其中R2aa是-CH2-CH2-O-Alk的化合物，Alk是任选在链中由1个或2个氧原子中断的C1-9烷基。例如在WO 94/09010、WO 95/16691、WO 96/41807、USP 5,362,718或WO 99/15530中公开了式A的化合物，此处将它们引用作为参考。如这些参考文献中公开地或通过这些参考文献中描述的方法的类似方法可以制备它们。优选的雷帕霉素衍生物是32-脱氧雷帕霉素、16-戊-2-炔氧基-32-脱氧雷帕霉素、16-戊-2-炔氧基-32(S)-二氢-雷帕霉素、16-戊-2-炔氧基-32(S)-二氢-40-O-(2-羟基乙基)-雷帕霉素和更优选地，40-O-(2-羟基乙基)雷帕霉素。雷帕霉素衍生物的其他实例包括例如在USP 5,362,718中公开的CCI779或40--雷帕霉素或其可药用盐，例如在WO 99/15530中公开的ABT578或40-(四唑基)-雷帕霉素，特别是40-表-(四唑基)-雷帕霉素。雷帕霉素衍生物也可以包括例如在WO98/02441、WO 01/14387和WO 03/64383中公开的所称的雷帕类似物(rapalog)，例如AP23573、AP23464、AP23675或AP23841。雷帕霉素衍生物的其它实例为以TAFA-93、biolimus-7或biolimus-9名称公开的雷帕霉素衍生物。在给出专利申请或科学出版物的引用的每种情况下，涉及化合物的主题在本申请中引用作为参考。同样包含其可药用盐、对应的外消旋物、非对映异构体、对映体、互变异构体以及文中公开的化合物的对应的结晶修饰(如存在)，例如溶剂化物、水合物和多晶型物。如分别在引用的文献中描述地，可以制备和施用在本专利技术的组合中用作活性成分的化合物。增生性疾病可以是良性或恶性增生性疾病，例如良性前列腺增生或瘤性疾病，优选恶性增生性疾病，例如癌症，例如实体瘤，特别是在WO02/66019中公开的晚期实体瘤。“实体瘤”表示肿瘤和/或转移瘤(无论位于何处)而不是淋巴癌，例如脑和其它中枢神经系统肿瘤(例如脑膜、脑、脊髓、脑神经和中枢神经系统的其它部分的肿瘤，例如成胶质细胞瘤或髓质胚细胞瘤)；头和/或颈癌；乳腺肿瘤；循环系统肿瘤(例如心脏、纵隔和胸膜，和其它胸内器官肿瘤、血管瘤和肿瘤相关的血管组织)；排泄系统肿瘤(例如肾、肾盂、输尿管、膀胱、其它和未指定的泌尿器官的肿瘤)；胃肠道肿瘤(例如食道、胃、小肠、结肠、结肠直肠、直肠乙状结肠连接部、直肠、肛门和肛管的肿瘤)、涉及肝脏和肝内胆管、胆囊、胆管的其它和未指定部分、胰腺、其它和消化器官的肿瘤)；头和颈；口腔肿瘤(唇、舌、牙龈、口底、腭和口的其它部分、腮腺、和唾液腺的其它部分、扁桃体、口咽、鼻咽、梨状隐窝、下咽、和唇、口腔和咽的其它部位的肿瘤)；生殖系统肿瘤(例如阴户、阴道、子宫颈、子宫体、子宫、卵巢和与女性生殖器官相关的其它部位、胎盘、阴茎、前列腺、睾丸和与男性生殖器官相关的其它部位的肿瘤)；呼吸道肿瘤(例如鼻腔、中耳、副鼻窦、喉、气管、支气管和肺的肿瘤，例如小细胞肺癌或非小细胞肺癌)；骨骼系统肿瘤(例如四肢的骨和关节软骨、骨关节软骨和其它部位的肿瘤)；皮肤肿瘤(例如皮肤的恶性黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌、间皮瘤、卡波西肉瘤)；和涉及其它组织的肿瘤，包括外周神经和自主神经系统、结缔组织和软组织、腹膜后腔和腹膜、眼和副器、甲状腺、肾上腺和其它内分泌腺和相关结构的肿瘤、淋巴结的次级和未指定恶性赘生物、呼吸和消化系统的次级恶性赘生物和其它部位的次级恶性赘生物。当上文及随后谈及肿瘤、肿瘤疾病、癌或癌症时，无论肿瘤和/或转移瘤的位置，备选地或此外也包括最初器官或组织和/或任意其它部位的转移瘤。根据本专利技术的方法，可以筛选患有此种增生性疾病的受试者以预测他们对mTOR抑制剂的敏感性。可以在体外，例如在来自受试者的生物学组织的样品上进行该方法。样品可以是分离自哺乳动物身体的任意生物学材料，诸如组织、细胞系、血浆或血清、细胞或组织裂解物，优选肿瘤组织。受试者优选为人受试者。通过基于例如RNA表达或例如蛋白质表达的任意技术手段测定了生物学样品中S6的表达水平和/或磷酸化状态，所述基于RNA表达的技术手段使用例如RT-PCR技术，所述基于蛋白质表达的技术手段使用例如蛋白质印迹、免疫组织化学或ELISA的技术，包括免疫测定、免疫沉淀和免疫电泳测定。优选地，该方法包括测定样品中(例如人)S6蛋白质及特别地，磷酸化S6的表达水平。该方法可以涉及检测S6上任意磷酸化位点的磷酸化。例如，可以测定(例如人)S6在丝氨酸235/236的磷酸化，更本文档来自技高网...

【技术保护点】
Ｓ６作为生物标志的用途，用于确定受试者中增生性疾病对用ｍＴＯＲ抑制剂治疗的敏感性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A布莱，H莱恩，SM马伊拉，T奥赖利，
申请(专利权)人：诺瓦提斯公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]