耐热菌的PCR快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种对苹果浓缩汁中耐热菌的快速检测方法，其技术原理是利用ＰＣＲ技术，快速特异扩增核酸的方法，使浓缩汁中极微量的核酸在数小时之内扩增至原来的数百万倍以上，选择合适的引物，ＰＣＲ就可特异性地扩增目标ＤＮＡ片断至易检测水平，从而实现对耐热菌的快速检测目的。其操作程序如下：目的菌（耐热菌）浓集→预增菌（耐热菌的预扩增）→菌体破壁释放出核酸→提取核酸进行ＰＣＲ扩增→扩增产物凝胶电泳检测→结果判断。由于苹果浓缩汁出口贸易中对耐热菌的要求为“不得检出”，因此本方法的检测结果完全满足实际生产的要求。且检测时间仅为１０小时，比传统培养检测法４～５日的检测周期大大缩短，并可实现多样品的同时检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品微生物的检测方法，具体涉及一种对苹果浓缩汁中耐热菌的PCR快速检测方法。
技术介绍
苹果浓缩汁中的酸土环脂芽孢杆菌(Alicyclobacillus acidoterrestris)，是环状脂肪酸芽孢杆菌属(Alicyclobacillus)中的一员，其俗称为耐热菌，是一种嗜热、嗜酸的细菌。耐热菌的芽孢能经受酸性条件下的巴氏杀菌过程而存活，在适宜条件下，耐热菌在果汁中大量繁殖时，不产生气体，不改变果汁的pH值，但会产生特殊气味化合物，有时还使果汁产生轻微沉淀或雾状浑浊，对果汁感官品质有很大影响。尽管耐热菌并不致病，也不产生毒素，但其引起的果汁感官性状劣变，甚至引起果汁败坏，完全破坏了果汁的食用性和商品价值。所以，国际贸易中对苹果浓缩汁中的耐热菌含量要求很严，耐热菌是苹果浓缩汁产品的必检项目，也常常成为苹果浓缩汁贸易中的技术壁垒，从而为苹果浓缩汁的生产、贸易和商检提出了新的要求。为了使耐热菌得到有效控制，首先要求将耐热菌快速而准确的检测出来，以便及时向生产线反馈信息以采取相应的防范、控制与清洗措施，提高苹果浓缩汁生产过程中对耐热菌的实时监控能力。目前沿用的耐热菌检本文档来自技高网...

【技术保护点】
耐热菌的ＰＣＲ快速检测方法，其特征是操作步骤如下：目的菌（耐热菌）浓集→预增菌（耐热菌的预扩增）→菌体破壁释放出核酸→提取核酸进行ＰＣＲ扩增→扩增产物凝胶电泳检测→结果判断。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：仇农学，李建科，常玉华，冯再平，
申请(专利权)人：陕西师范大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]