【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于提供聚乙二醇化蛋白质组合物的方法专利
本专利技术涉及用于提供聚乙二醇化蛋白质组合物的方法，特别是用于提供包含单-聚乙二醇化蛋白质和寡-聚乙二醇化蛋白质的聚乙二醇化蛋白质组合物的方法，并且提供用于提供单-聚乙二醇化蛋白质组合物的方法。特别地，本专利技术涉及用于提供包含单-聚乙二醇化EPO和寡-聚乙二醇化EPO的聚乙二醇化红细胞生成素(EPO)组合物的方法和用于提供单-聚乙二醇化红细胞生成素(EPO)组合物的方法。背景蛋白质的PEG化或聚乙二醇化是指一个或多个PEG(聚乙二醇)基团添加至蛋白质。聚乙二醇化特别地用于治疗蛋白，例如，这归因于它增加体内循环半衰期。然而，聚乙二醇化还可以降低治疗蛋白的生物活性，由此降低其有效性。因此。在增加的循环时间与降低的治疗功效之间的平衡被打断。对于某些治疗蛋白，单-聚乙二醇化为特别期望的，因为它提供了改善的稳定性，而不会显著地损害治疗功效。单-聚乙二醇化治疗蛋白包括和为红细胞生成素(EPO)的单-聚乙二醇化形式且用于治疗贫血。聚乙二醇化反应倾向于产生包含非-聚乙二醇化蛋白质(未反...
【技术保护点】
1.用于生产聚乙二醇化蛋白质混合物的方法，该方法包含：/na)使非-聚乙二醇化蛋白质与聚乙二醇化试剂反应，产生包含非-聚乙二醇化蛋白质和聚乙二醇化蛋白质的反应产物混合物，其中聚乙二醇化蛋白质包含单-聚乙二醇化蛋白质和寡-聚乙二醇化蛋白质；/nb)使反应产物的混合物经历离子交换色谱(IEC)步骤，得到IEC流通溶液，其中聚乙二醇化蛋白质的级分相对于反应产物的混合物增加；/nIEC步骤包含将反应产物的混合物在适合于结合非-聚乙二醇化蛋白质的条件下施加于IEC材料；和/nc)从步骤b)中收集IEC流通溶液，得到包含单-聚乙二醇化蛋白质和寡-聚乙二醇化蛋白质的聚乙二醇化蛋白质混合物...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171229 EP 17211124.71.用于生产聚乙二醇化蛋白质混合物的方法，该方法包含：
a)使非-聚乙二醇化蛋白质与聚乙二醇化试剂反应，产生包含非-聚乙二醇化蛋白质和聚乙二醇化蛋白质的反应产物混合物，其中聚乙二醇化蛋白质包含单-聚乙二醇化蛋白质和寡-聚乙二醇化蛋白质；
b)使反应产物的混合物经历离子交换色谱(IEC)步骤，得到IEC流通溶液，其中聚乙二醇化蛋白质的级分相对于反应产物的混合物增加；
IEC步骤包含将反应产物的混合物在适合于结合非-聚乙二醇化蛋白质的条件下施加于IEC材料；和
c)从步骤b)中收集IEC流通溶液，得到包含单-聚乙二醇化蛋白质和寡-聚乙二醇化蛋白质的聚乙二醇化蛋白质混合物，
其中通过从IEC材料中洗脱IEC洗脱液在步骤b)中回收非-聚乙二醇化蛋白质，并且将洗脱的非-聚乙二醇化蛋白质用于随后的聚乙二醇化反应。
2.根据权利要求1的方法，其中所述蛋白质为激素、细胞因子、酶或抗体。
3.根据权利要求1或权利要求2的方法，其中所述蛋白质为红细胞生成素。
4.根据上述权利要求任一项的方法，其中IEC步骤为阴离子交换(AEC)步骤。
5.根据上述权利要求任一项的方法，其中进行步骤a)、b)和c)的两个或多个循环，其中通过从IEC材料中洗脱IEC洗脱液在步骤b)中回收非-聚乙二醇化蛋白质，并且将洗脱的非-聚乙二醇化蛋白质用于随后的聚乙二醇化反应。
6.根据权利要求5的方法，其中该方法包含3、4或5个循环，其中在每个循环的步骤b)中，回收非-聚乙二醇化蛋白质并且用于随后的聚乙二醇化反应。
7.根据权利要求5或权利要求6的方法，其中步骤c)还包含汇集从每个IEC步骤中收集的流通溶液，得到聚乙二醇化蛋白质混合物，其为汇集的聚乙二醇化蛋白质混合物。
8.根据上述权利要求任一项的方法，其中从IEC材料中洗脱非-聚乙二醇化蛋白质使用包含小于或等于约45mM盐的洗脱缓冲液。
9.根据上述权利要求任一项的方法，其中将步骤b)IEC的洗脱液直接添加到随后的聚乙二醇化反应中。
10.根据上述权利要求任一项的方法，其中回收非-聚乙二醇化蛋白质并且用于随后的聚乙二醇化反应，并且，其中还将新鲜的非-聚乙二醇化蛋白质加入到随后的聚乙二醇化反应中，以便在每次聚乙二醇化反应维持基本上恒定的聚乙二醇化反应条件。
11.根据上述权利要求任一项的方法，其中IEC材料具有低于约1.5g/L的聚乙二醇化蛋白质的结合容量。
12.根据上述权利要求任一项的方法，其中：
i.反应产物的混合物包含低于25％的寡-聚乙二醇化蛋白质；和/或
ii.IEC流通溶液包含至少90％的聚乙二醇化蛋白质。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：W·克恩莱因，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。