用于使用抗VEGF剂治疗血管生成病症的方法和组合物技术

提供用于使用抗VEGF剂治疗血管生成病症的方法和组合物。所述抗VEGF剂包含VEGF结合结构域并且具有结合玻璃体的能力。提供具有VEGF结合结构域的Fc‑IgG融合蛋白的示例性实施例，所述VEGF结合结构域具有强肝素结合特性、对VEGF有丝分裂活性的强抑制和改善的药代动力学，即所述抗VEGF剂的半衰期更长，并且因此投配频率更低。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于使用抗VEGF剂治疗血管生成病症的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请要求2018年1月26日提交的美国临时申请第62/622,382号的优先权权益，所述申请以引用的方式并入本文中。序列表本申请含有序列表，所述序列表以ASCII格式以电子方式提交，并且以全文引用的方式并入本文。所述ASCII副本创建于2019年1月25日，被命名为24978-0470_SL.txt并且大小为50,960字节。
技术介绍
新生血管供应或血管生成的发展起至关重要的动态平衡作用，因为血管将营养物输送到组织和器官并且移出分解代谢产物1。然而，不受控制的血管生长可能促进或有助于多种疾病进程，包括肿瘤和眼内血管病症1。尽管最初鉴定并表征了几种血管生成因子(例如EGF、TGF-α、TGF-β、aFGF、bFGF、血管生成素)2，但是在过去的三十年中进行的工作已确定了VEGF-A(下文VEGF)在正常和病理性血管生成中的关键作用34。VEGF为以下基因家族的成员，所述家族还包括PlGF、VEGF-B、VEGF-C和VEGF-D。据报道，三种相关的受体酪氨酸激酶(RTK)结合VEGF配体：VEGFR-1、VEGFR-2和VEGFR-35。PlGF和VEGF-B与VEGFR-1选择性地相互作用，VEGF结合VEGFR-1和VEGFR-2。此RTK家族的第三个成员VEGFR-36结合VEGF-C和VEGF-D，这与淋巴管生成有关。此RTK类的每个成员在胞外部分中均具有七个免疫球蛋白(Ig)样结构域7。人们普遍认为VEGFR-2为VEGF的主要信号传导受体5。然而，VEGFR-1结合VEGF的结合亲和力显著高于VEGFR-27。VEGF抑制剂已成为多种肿瘤的疗法标准，并且彻底改变了眼内新生血管病症的治疗，如年龄相关性黄斑变性(AMD)的新生血管形式、增生性糖尿病性视网膜病变和视网膜静脉闭塞，这些都是视力丧失和法定盲的主要原因84。目前，在美国，三种抗VEGF药物被广泛用于眼科适应症：贝伐单抗、兰尼单抗和阿柏西普4。贝伐单抗为靶向VEGF的全长IgG抗体9。即使贝伐单抗尚未开发用于眼科适应症，但由于其低成本而被广泛超药品说明书使用。雷尼单抗为亲和力成熟的抗VEGFFab10。阿柏西普一种IgG-Fc融合蛋白1112，具有来自结合VEGF、PIGF和VEGF-B的VEGFR-1和VEGFR-2的成员13。康柏西普为结构上与阿柏西普相关的可溶VEGF受体，广泛在中国用于治疗眼内新血管生成14。在世界范围内已有数百万患者用这些药物治疗。重要的是，在使用兰尼单抗或贝伐单抗治疗五年后，约有一半的新生血管AMD患者视力良好，即视敏度为20/40或更高，在获得抗VEG剂之前无法达到的结果15。然而，在现实临床环境中，许多患者接受比在临床试验中少的抗VEGF注射剂，并且已假设，这可与差的视力结果相关16。确实，需要进行相对频繁的玻璃体内注射已经阻碍了患者的依从性并最终阻碍疗法的益处，尤其是在某些国家16。因此，需要开发在眼内注射时具有更长持续时间的药剂，因此降低注射频率，并且为此目的已经尝试了许多方法17,18。阿柏西普(艾力雅(EYLEA))是基于临床试验批准的，所述临床试验示出，每8周施用2mg剂量可匹配每月兰尼单抗(0.5mg)的功效。然而，尽管预测改用阿柏西普将减少玻璃体内注射的次数，但是最近的研究表明事实并非如此19。因此，对于具有改善半衰期的玻璃体内抗VEGF仍然剂存在未满足的医学需求。在1996年，Davis-Smyth等人20(参也见美国专利第5,952,199号)报道VEGFR-1的结构域(D)2为VEGF和PIGF的关键结合元件。缺失D2完全消除结合。用VEGFR-1D2代替VEGFR-3的D2将VEGFR-1的配体特异性授予VEGFR-320。随后的工作通过X射线晶体学证明D2和VEGF(或PlGF)之间的相互作用21-23。最初的研究导致设计了具有完整VEGF结合特性的构建体，所述构建体包含与Fc-lgG(Flt-1-3-IgG)融合的VEGFR-1的前三个Ig样Ds20。Flt-1-3-lgG在体外和体内均显示出强有力的中和VEGF的能力24-27。然而，此分子的全身半衰期受存在D3的阻碍，D3由于存在碱性残基簇而具有显著的肝素亲和力，导致结合到各种组织中的HSPG。在2002年，Holash等人13(美国专利第7,070,959号)描述了包含VEGFR-1D2(结合元件)和VEGFR2的D3的IgG融合构建体，与VEGFR-1D3相比，其具有弱的多的肝素亲和力。据报道，此分子在全身施用后与Flt(1-3-lgG)相比具有更长的半衰期(今天称为阿柏西普(以EYLEA出售))13，显然，例如针对肿瘤适应症的治疗优势。
技术实现思路
本专利技术提供用于抑制血管生成和用于治疗VEGF相关的病状如眼部疾病的组合物和方法，所述眼部疾病包括但不限于年龄相关性黄斑变性、增生性糖尿病性视网膜病变、视网膜静脉闭塞、继发于近视的脉络膜新生血管生成、早产儿视网膜病、糖尿病黄斑水肿、息肉状脉络膜血管病变，所述方法包含施用抑制VEGF活性并且同时具有强肝素结合特性的抗VEGF剂，由此提供优异的药代动力学，即在玻璃体内施用后具有更长的治疗剂半衰期。在实施例中，本专利技术提供治疗其中局部直接施用抗VEGF剂为有益的病状的组合物和方法，例如治疗和预防内皮细胞增殖性病状或血管生成，例如在治疗实体瘤中，如但不限于在胶质母细胞瘤中的颅内施用。在实施例中，本专利技术提供抗VEGF剂，其中抗VEGF剂为融合具有VEGF结合特性的结构域和结合肝素蛋白多糖的结构域的Fc-IgG构建体。在实施例中，本专利技术提供抗VEGF剂，其中抗VEGF剂为具有结合肝素的能力的Fc-IgG构建体并且含有具有VEGF结合特性的一个或多个结构域。在实施例中，本专利技术提供抗VEGF剂，其中抗VEGF剂为具有改善的结合到VEGF和肝素的功效的融合蛋白。在实施例中，本专利技术提供抗VEGF剂，其中抗VEGF剂为具有极低内毒素水平的融合蛋白。在实施例中，本专利技术提供抗VEGF剂，其中抗VEGF剂为包含VEGF受体元件的IgG嵌合蛋白。在实施例中，本专利技术提供IgG嵌合蛋白，其中IgG嵌合蛋白在VEGF酪氨酸激酶受体的胞外部分中包含七个免疫球蛋白(Ig)样结构域的一个或多个片段。在实施例中，本专利技术提供IgG嵌合蛋白，其中IgG嵌合蛋白包含与Fc-IgG融合的VEGFR-1的一个或多个胞外结构域片段。在实施例中，本专利技术提供IgG嵌合蛋白，其包含至少一个VEGF结合结构域VEGFR-1结构域2和至少一个额外的VEGFR-1结构域1或3，并且不包括结构域4。在实施例中，本专利技术提供IgG嵌合蛋白，其中IgG嵌合蛋白包含与Fc-IgG融合的VEGFR-2的一个或多个胞外结构域片段。在实施例中，本专利技术提供IgG嵌合蛋白，其中IgG嵌合蛋白包含与Fc-IgG融合的VEGFR-1和VEGFR-2的一个或多个胞外结构域片段。在实施例中，本专利技术提供包含可操作地连接到Fc-IgG的VEGF结合部分的抗VEGF剂，其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗VEGF剂，其包含可操作地连接到Fc-IgG的VEGF结合部分，其中所述VEGF结合部分包含至少一个VEGF结合结构域，所述VEGF结合结构域为VEGFR-1的IgG样结构域2，并且其中所述抗VEGF剂的抑制VEGF刺激的有丝分裂的能力比阿柏西普更大。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180126 US 62/622,3821.一种抗VEGF剂，其包含可操作地连接到Fc-IgG的VEGF结合部分，其中所述VEGF结合部分包含至少一个VEGF结合结构域，所述VEGF结合结构域为VEGFR-1的IgG样结构域2，并且其中所述抗VEGF剂的抑制VEGF刺激的有丝分裂的能力比阿柏西普更大。


2.根据权利要求1所述的抗VEGF剂，其中所述抗VEGF剂具有比阿柏西普大的玻璃体结合能力。


3.根据权利要求2所述的抗VEGF剂，其中所述抗VEGF剂的抑制玻璃体结合VEGF刺激的内皮细胞增殖的能力比阿柏西普更大。


4.根据权利要求3所述的抗VEGF剂，其中与阿柏西普相比，所述药剂在体内具有增加的半衰期。


5.根据权利要求4所述的抗VEGF剂，其中所述VEGF结合部分主要由VEGFR-1的IgG样结构域1、2和3(V1-2-3)组成。


6.根据权利要求5所述的抗VEGF剂，其中所述抗VEGF剂包含如SEQIDNO:1中定义的氨基酸序列。


7.根据权利要求4所述的抗VEGF剂，其中所述VEGF结合部分主要由VEGFR-1的IgG样结构域2和3(V2-3)组成。


8.根据权利要求5所述的抗VEGF剂，其中所述抗VEGF剂包含如SEQIDNO:3中定义的氨基酸序列。


9.根据权利要求4所述的抗VEGF剂，其中所述VEGF结合部分主要由VEGFR-1的IgG样结构域1、2、3和3(V1-2-3-3)组成。


10.根据权利要求5所述的抗VEGF剂，其中所述抗VEGF剂包含如SEQIDNO:5中定义的氨基酸序列。


11.根据权利要求4所述的抗VEGF剂，其中所述VEGF结合部分主要由VEGFR-1的IgG样结构域2、3和3(V2-3-3)组成。


12.根据权利要求5所述的抗VEGF剂，其中所述抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：N·费拉拉，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国;US